진단세포학★ 선배의 한마디 : 진단세포학은 국가시험에 나오는 문제의 수에 비해서 외울 것이 많은 과목 중에 하나입니다. 악성세포의 기원, 세포의 염색성, 호르몬의 분비에 따른 세포변화양상, 세포의 채취방법 등 아주 넓은 범위에 걸쳐서 중요한 부분이 조목조목 위치해 있습니다. 특히 호르몬계와 여성의 월경주기에 관한 것과 검체 및 Pap stain 등의 이론문제와 2차 실기문제는 자주 출제되는 경향이 있으므로 반드시 이해하고 넘어가세요.★ 국가고시 : 2교시 조직병리세포학 총 20문제 중 5문제 출제Ⅰ. 진단 세포학의 정의* 정의 : 인체 세포를 대상으로 현미경하에서 병리학적 진단을 목적으로 하는 학문 ★★★(1) 탈락세포학* 검체 중 가장 많이 사용하는 검체는 질후원개의 질풀 분비물이다. ★★★★★* 질풀에 탈락되어 있는 세포의 분석을 통해서 질병의 유무, 호르몬계의 이상 등을 판단한다. ★★★* 검체는 Brushing, Scarpping(찰과)를 통해서 채취한다.(2) 세침흡인생검 세포학(fine needle aspiration biopsy cytology, FNABC) ★★★* 최근에 많이 사용된다.* 진단이 빠르고 생검(biopsy)이나 동결절편을 대신해서 진단이 가능하다.? 도말후 건조고정 → Diff quick stain* 장기는 주로 촉지가 가능한 병소부위로, 림프절, 갑상선, 유선, 타액선, 간, 폐, 신장 등이 있다 (장기 중요) ★★★(3) 날인표본 (수술중 응급진단 목적)* 비장, 림프절, 골수 등의 장기에 실시한다. ★★★(4) 진단세포 장점 ★★★* 간편 · 신속하고 반복검사 용이 저렴하고 넓은 부위 검사 가능, 세포의 구조를 더욱 상세히 관찰* 염증이나 감염상태 잘 평가, 특수염색 가능, 진균류나 기생충은 도말표본 더 쉽게 관찰* 세포변화의 평가도 더 용이, 고통이 덜 하다.* 확실한 진단 가능1. 세포채취, 보존2. 혈액, 정액, Debris 제거3. 세포분산4. 필터로 세포회수ThinprepⅡ. 세포 표본의 제작(1) 여성 생식기 검사로 세포 성분이 적은 액체성 검체물, 객담, 유출액, 소변- 장점 : ① 위음성 진단율 감소② 재염색, 특수염색 필요시 추정검사가능③ 진단, 병적세포 발견 용이④ 세포의 기원, 분화의 인지 용이(5) 압흔 도말- 장기 : 림프절, 비장, 골수- 세포표본의 자동도말① 자동도말하기 쉽다. ② GY. nonGY ③ 용액 ④ 작동방법ⅰ. 분산 ⅱ. 세포의 수집 ⅲ. 세포의 이전Ⅲ. 염색방법과 염색액의 준비(1) Papanicolaou stain1. 장점① 핵의 미세구조가 명확하게 보인다.② 세포질의 투명도가 높다.③ 세포분화 잘 된다.2. Papanicolaou 주요 4단계- 고정 → 핵염색(Hematoxylin) → 세포질 염색(OG-EA) → 청명(xylol)★★★★★?세포투명도 증가- 고정 : 습윤고정- 핵염색 : 퇴행성 Hematoxylin(Harris hematoxylin), 진행성 Hematoxylin(Mayer hematoxylin)- 세포질 염색① Orange G★★★(염색의 순서 hematoxylin → Orange G → EA 중요하다.)② EA ★★★(구성 eosin, light green)ⅰ. eosin : 편평상피세포 세포질 - 핵소체, 섬모ⅱ. light green : 방기저세포(probasal cell), 중간세포(intermediate cell), 원주상피 세포, 신진대사 활발하다.-청명 : 세포의 투명도(xylene)※ 표재세포(superficial cell) - 호산성, 중간세포(intermediate cell) ? 방기저세포(probasal cell) - 호염기성3. 시약만들기① hematoxylin : Harris(Aluminum+Mercuric oxide), Gill(Alum+Sod. lodate)★★★(Harris 산화제, 매염제 암기)- 산화제 : Mercuric oxide, 매염제 : Aluminum(ammonium alum)★★★② Orange G-6(0.5%): Phosphotungstic acid(매염제)③ EA 36 궁근층, 자궁내막-자궁내막선 글리코겐 분비- 자궁내막 상피 : 단층원주, 입방상피- 분비형 자궁내막 세포 : 가장 크다, 호염성 세포질- 섬모성 자궁내막 세포- 자궁내막 기질 세포 - 표층기질세포(중첩 x) : 조직구와 유사, 액포성 세포질심층기질세포(중첩 o) : 세포질이 없고 과립상의 염색질, 핵모양 타원형, 중간세포들- 월경기가 끝나면 이주현상(Exodus)이 나타난다.★★★★★(2차실기에도 출제)① 월경후 5~6일(증식기 초) ② IUD ③ 자궁내막 증식증 ④ 잘 부화된 선암종 ⑤ 용종- 임신, 폐경기 후 여성에서는 자궁내막세포가 나타나면 “비정상”⑤⑤⑤⑤* 난관- 결핵이 많이 발생- 구성 : 난소를 옮겨주는 통로(나팔관), 간질부, 협부, 팽대부(수정이 이루어 지는 곳)- 3층 : 장막, 근육층, 점막* 난소 - 큰 아몬드 모양- 수질 : 많은 혈관과 신경 소성 결합조직- 피질 : 난포, 섬유성, 근조직, 포상 난포Ⅳ. 내분비세포학(1) 내분비 평가의 보고① 핵농축 지수(Karyopyknotic index)- 표재세포와 중간세포만 검경, 농축된 핵(표재), 수포성 핵(중간)- 결과 농축지수 90:10 estrogen의 영향② 호산성지수(Eosinophilic index)- 호산성 세포수 : 호청성 세포수- 결과 호산성 지수 높으면 estrogen 영향③ 접힌 세포 지수(folded cell index)- 접힌 세포수 :접히지 않은 세포수- 접힌 세포수가 높으면 Progesteron영향-가임기 여성 분비기때④ 군집 세포 지수(Crowded cell index)- 덩어리(군집)부개↑ : 1~2개 progesterone⑤ 성숙지수 ( Mataration index : MI)★★★★★- 방기저세포, 중간세포, 표재세포의 백분율- 방기저 : 위축(좌방이행) 중간 : Progesterone 표재 : estrogen(우방이행)(2) 나이에 EKfms 잘 상피의 세포 생리학적 양상 ★★★★★신생아중간세포(intermediate cell)소아기방기저세포(probasa및 종류- 외상, 질의 산성도 저하, 상피의 위축, 방사선조사및 신생물↑:무핵, 중간, 표재―:방기저↓:화생* 투명도1) 자궁경염(Cervictis)자궁외경부- 거미세포(화생세포) : 세포질의 돌기를 낸 것★★★?세포질이 아주 두꺼움! ① 화생세포 수 ② 핵의 활성도 ③염증 변화 ⇒ 경도(mild), 중등도(moderate), 고도(severe)2) 자궁 내 경염(Endocervictis)자궁내경부- 원주세포, 화생세포, 수복세포3) 만성 림프구성 자궁영염 or 여포성 자궁경염- 폐경기 이후 여성, 기질에 림프구 침윤, 조직구와 세망세포, 다형핵- 백혈구, 형질세포, 화생, 수복세포, 미성숙 림프구4) 노인성 질염, 위축성 질염★★★? 호르몬 결핍- 원인 : ① 자연적인 폐경 ② 생식선의 절제 ③ 질ㄹ병으로 인한 난소파괴, 기능상실- 세포학적 특징 : ① 방기저세포 ② 착각화증, 위착각화증 ③ 세균은 없다 ④ 나핵 ⑤ 청색얼룩(변성된 방기저세포)- 세포파괴 : 위축현상(방기저), 세포분해(중간 세포-글리코겐, Doderlein bacillus)Ⅵ. 미생물의 침윤- 세포분해는 중간세포의 찌꺼기들, 나핵, Doderlein 간균으로, 주로 볼 수 있는 세포표본은 분비기, 임신기1. Doderlein bacillus (Lactobacillus)★★★(2차)- 글리코겐을 가수분해- 중간세포의 세포질 찌꺼기들, 나핵과 Doderlein bacillus① 분비기 : 배란기후 ② 임신 ③ 피임약 복용시 ④ 프로게스테론 양태 ⑤ 폐경기 - 당뇨환2. 혼합된 세균 - 질염3. 구균 - 만성 자궁경염 동반, 다형핵백혈구의 세포질 내와 바깥쪽 쌍구균(임균)4. Gardnerella vaginalis(Haemophilus vaginalis)★★★(2차)- clue cell(실마리 세포)분포 : 중간세포(intermediate cell), 편평상피세포 위에 간구균이 붙어있는 상태- 작은 간균들의 덩어리 출현, 다형핵 백혈구 들이 약간 보인다. 유산균은 없다.- 혼탁하게 보인다.5. 첨규콘딜로마④ 큰 공포를 갖는 intermediate cell, superficial cell 출현, metachromatic, 핵분자, 핵막 뚜렷하지 않다.⑤ 밝은 오렌지(OG-6), 두껍고 입체감 있는 덩어리, 수포성 핵⑥ HPV감염하지 않아도 일어날 수 있는 경우- 소아기 → 요충, 이질아메바, 사상충- Alterna 진균의 공기 중에 퍼져 있다가 염색이나 봉입 과정중- 오염되게 되면 Alternarin의 대생분자는 눈신(snow shoes)이나 정구채 모양★★★(2차)Ⅶ. 양성 증식성 반응자궁외경부 : 착각화증 과각증자궁내경부 : 예비세포, 화생세포1. 과각화증 - 자궁 탈출등, 백반증, 과각화증, 편평세포 유두종★★★① 만성적인 자극 ex)자궁 하수증② 표재세포층 증식, 유령세포, 무핵세포→각질층 발육③ 비각화성인 자궁경부의 경부 진성 표피화④ 흰 헝겊들을 붙여 → 백반증 + 유련 세포 무핵세포 덩어리 ⇒ 과각화증⑤ 표재세포의 세포질에는 eosinophilic 이나 cytomophilic, 각질유리과립 보인다.2. 착각화증① 농축핵, 과분화 작은 표재세포(eosin색, halloween orange, 농축 핵 작은 cell)② 표피세포(superficial cell)와 닮았기 때문에 “착각화증”이라고 한다.★★★③ 착각화증에서 EJfdjwu 나온 세포가 길쭉해졌거나, 꼬리모양이다.3. 예비세포 증식(핵소체x)① 광학현미경상 → 원주상피가 기저막 위에 놓임② 전자현미경상 → 기저막과 원주상피 사이에 장차 원주상피도 발육해 나갈 작은 세포들 - 예비세포③ 원주상피나 기저막 사이에 하층 or 여러 층의 미성숙 cell -예비세포 증식★★★④ 예비세포 → 자궁내경부 or 이소 도말세포학적 특징 - 핵과 세포질 비율 큼, 작은 cell 둥글거나 불규칙- 세포질 cyamophilic, 미세한 공포- 세포들이 직선배열, 핵은 둥글거나 난형 균일- 염색질은 미세한 과립상, 염색중심립- 핵소체, 핵의 과염색 나타나지 않음 ( 나타나는 시기 - 폐경기전, 임신, 호르포
조직검사학조직검사학★ 선배의 한마디 : 학교에서 모의고사 볼 때 보다 난이도가 그렇게 높지 않는 문제가 국가시험에 주로 출제되는 경향이 있습니다. 조금만 투자하면 점수가 나오는 과목입니다. 노력한 만큼 점수가 나오는 과목 !!★ 국가시험 : 2교시 20문제 중 10문제Ⅰ. 검체의 채취1. 생검시료▷ 생검 - 환자로부터 시험적으로 채취한 작은 조직괴를 대상으로 조직병리학적 진단을 내리는 것1) 절제생검(excisional biopsy): 검사할 작은 조직괴를 메르를 사용하여 외과적으로 절제하는 방법피부, 피부 연부조직, 림프절, 유방, 근육2) 펀치생검(punch biopsy)① 절제겸자를 사용하여 시료를 채취하는 방법② 피부, 자궁경부(uterine cervix) 등에 적용③ 내시경(endoscopy)의 발달로 인해 소화관, 기관지, 폐, 인두 관절강 등에도 많이 활용★★★→ 내시경검사(endoscopic biopsy)3) 침생검(needle biopsy)▷ 인체의 심부에 위치한 간장, 신장(내부 장기) 증의 실질성 장기로부터 검체를 채취하는데 적용★▷ 실질성 장기 - 속이 찬 장기 ex) 췌장강동 장기 - 속이 빈 장기 ex) 자궁, 방광4) 천자흡입성(aspiration biopsy) Gun를 이용: 골수, 유방, 림프절, 갑상선, 폐, 전립선 등의 장기를 천자하여 시료를 채취하는 방법★★★5) 시험소파(exploratory curettage) - 자궁★★① 끝이 예리한 큐렛(curet)을 이용하여 병변부위의 조직을 긁어 채취하는 방법② 자궁내막(endometrium)을 이용하여 병변부위의 조직을 긁어 채취하는 방법③ 종양의 악성과 양성의 감별. 결핵과 같은 특이성 염증(specific inflammation)의 진단에 이용☞ DC(dilatation Curettage)- 자궁 경관을 확장시켜 curet으로 긁어 채취- 이상자궁 출혈의 원인 규명 불임 또는 월경 규명 유산 후 확인6) 골 생검(bone biopsy)- 외과적 수술을 통해 각종 뼈조직을 얻는장점 : 강한 살균력(방부제로 많이 쓰임)④ 단점 : 단백질을 변성(교차결합)- formalin을 장시간 보존할 경우 산소와 결합하여 산화가 되어 formic acid(개미산)을 형성(pH가 낮아진다.)- Hb와 결합, 흑색의 인공색소(formalin)형성 → 충실성 장기(간, 비장, 골수)- 비응고성, 단백질 고정- formaldehyde가 중합되는 것을 방지 하기 위해 10~15% 정도의 메탄올 첨가 - 산화방지- 냉소에 보관시 중합체를 형성하여 백색침전물 형성 - 따뜻한 수조에 가열(2) Glutaraldehyde → 고정시 침투속도가 느린 고정제(2006, 국시)① aldehyde기가 2개가 존재하는 무색의 액체② 미세 구조의 보존효과가 좋아 전자 현미경 표준 1차고정제(농도 : 2~3%, pH 7.2~7.5)③ 갈색병, 냉장보관(3) Osmium tetroxide(Osmic acid,)① 연한 황색(노란색) 결정체② 단백질로 탄수화물 및 지질고정에 우수③ 전자현미경 시료고정의 2차 고정제로 사용④ 밀폐된 용기에 보관(증발 물질이 인체에 유해, 환기 시설 내에서 사용)⑤ 불포화 지질을 흑색으로 만드는 가교형성 방식 고정제(4) Mercuric chloride(, 승홍, 염화 제 2수은)① 백색 결정체 유독성이 강하다. 포화 수용액 상태로 사용, 단독으로 사용 안함.② 용해도 : 물 7%, 알콜 33%③ 장점 - 강력한 단백질 응고력 및 강한 매염작용, 세포질 염색에 양호④ 단점 - 조직의 침투가 느리고, 조직을 경화 및 위축(단점). 금속 부식성(금속 제품 사용금지)- 승홍 결정 침착(흑갈색의 인공색소) - 염색 전에 승홍 색소 제거⑤ 수은 색소 제거법(박절하여 염색 전에 제거)※ 수은 색소 + Iodine(승홍제거) → Mercuric iodine(알콜에 작용)Iodine(갈색) + Sodium thiosulfate(요오드제거) → 무색(5) Potassium dichromate(, 중크롬산 칼륨)① 오렌지색 결정체, 응고 침전형 고정제② 조직과 반응투제로 이용한다.※paraffin의 융점이 높은 것이 낮은 거보다 실온에서 더 단단히 굳어 박절시 얇고 균일한 리본을 만들어 낸다.※paraffin은 methan 계열의 탄화수소 화합물로 그 융점에 따라 여러 등급으로 나눔융점용도사용계절조직종류절편종류신전기온도온수조온도경질paraffin56~58℃일반조직검사용여름단단한 조직얇은 절편61~62℃45~50℃연질paraffin45~50℃연구용겨울연한 조직두꺼운 절편55℃50℃4. paraffin 침투방법⑴ 수동 침투법 : 60℃로 설정된 항온 paraffin oven에서 2~3단계 과정으로 진행. 정전시, tissue processor가 고장이 났을 경우. 큰 조직이나 응급시 사용⑵ 자동 침투법 : 자동 조직 과정 처리기(Autotechnicon, Tissue processor)의 맨 마지막 2 단계가 paraffin 침투과정으로 침투가 효과적이며 기계작용으로 routine 으로 사용 -> 야간에 수행가능(고정~침투) 12단계의 침투과정을 입력, 시작시간,온도,각 단계별 시간, 진공 침투 여부⑶ Autotechnicon- Autotechnicon은 기계적 진탕 작용을 하고, interval timer에 정해진 시간대로 조직 과정이 진행되며, 주로 rotary 형태로 되어있다.⑷ paraffin침투(2-3)(자동침투기)° timing disk° weekend delay timer° 진탕장치° 이온 장치° 15시간, 12단계로 구성② 장점 : 인력, 시간 단축③ 단점 : 투명제가 조직에 잔류, 침투시간을 조절하기 어려움용기가 한정되어 있으므로 연한 조직은 부서지기 쉬움▶ 회전형 rotary type (개방형) → 조직편이 이동: tissue basket 에 들어있는 조직편이 운반기 carrier 에 의해 각 시약용기를 이동한다. 탈수, 투명, 침투, bath로 온도조절기 장착 60℃ 항온▶ 폐쇠형 enclosed type (분합형) → 시약이 이동: 디지털 방식으로 12개의 용기에 각 단계별, 시간, 온도, 진공상태 등1㎛의 얇은 박절가능→유리칼, diamond칼 사용: 열팽창식을 이용하여 전진 이동장치를 정밀하게 움직인다.* 박절기의 구조: 칼 고정대, 블록 재물대, 두께조절기, 전후진 장치5. 각종 포매 조직의 제작법1) 파라핀 블록의 박절법절편 두께는 목적에 따라 큰 차이가 있지만 보통 4~6㎛가 적당★★★조직, 기관의 구성이 엉성한 것일수록 절편을 두껍게 생산-얇은 절편보다 많은 정보를 억디 쉽다. 비장,림프절-치밀한조직은 얇은 절편이 관찰하기에 좋다.(1) 박절 과정① 박절기의 박절용 칼 설치: 틈의 각은 5~10˚가 적당(7˚가 가장 이상적). 틈의 각이 크면 block면을 깊이 판다.칼 자체의 마도면의 각(facet or bevel angle)- 칼끝의 양면인 마도면과 마도면의 각으로 잘 연마된 칼의 쐐기의 각 (Wedge angle)은 15도 이다.② Paraffin block을 박절기에 단단히 고정③ 조동 손잡이를 조정하여 칼과 block을 접근시켜 조직이 노출될 때까지 박절④ gauze, 나무지지대 핀셋 가는붓 등으로 block의 paraffin을 떨어냄⑤ 원하는 부분이 박절되면 70% alcohol에 넣어 1차적으로 조직을 폄⑥ 45℃~50℃(융점 56℃~58℃ 보다 10~15℃낮게)의 부유 온수조에 넣어 조직을 완전히 폄⑦ 60℃의 신전기(슬라이드에 절편부착기능)나 부란기에서 조직 절편을 기울여(수분, 기포제거 위해) 20~40분간 건조 (융점보다 2~3℃높은 온도)※ 절편은 SLIDE에 고정시 떨어지므로 접착제 발라서 고정- 접착제(난백 알부민 egg albumin, 젤라틴 용액, 혈청, 한천 등) 절편주위로 염색되는 단점- 난백 알부민(egg albumin) → flesh egg albumin +glycerin = 1 : 1 냉장고 보관★* 미리 코팅된 슬라이드(상품화)probe on plus(모세관 현상). poly-L-lysine : ISH, 교잡화 탈회조직, 분자생물학★2) celloidin block의 박절법: 15㎛의 두께(10~20㎛), 의 적정 pH는 pH 8.0★★★2) 시약의 선택 : 알카리성 물질을 선택한다.5. 헤마톡실린 분별제문제점(1) 과도한 탈색의 원인 : ① 산의 농도가 너무 높았을 때② 물의 함량이 너무 많을 때③ 탈색 시간이 너무 길 경우④ 분별제가 완전히 제거되지 않을 때(2) 불충분한 탈색의 원인 : ① 산의 농도가 낮을 때② 알코올 농도가 높을 때③ 탈색 시간의 불충분④ 슬라이드 위에 접착제가 많을 때6. 에오신: 에오신을 사용하면 정확하게 3가지 다른 색상을 얻을수 있어 조직성분을 감별하는데 사용1) 문제점(1) 에오신 염색성이 약한 원인① 에오신의 pH가 너무 높을 경우② 알콜에 너무오래 행구거나 알콜의 농도가 낮을 경우③ 염색 후 사용하는 알콜 헹굼액이 오염되었을 경우④ 과다한 사용으로 에오신의 작용이 저하되었을 경우⑤ 너무 얇은 조직 절편을 사용⑥ 짧은 염색시간(2) 에오신 염색성이 지나치게 강한 경우① 용매의 증발로 인해 염료 농도가 높아질 경우② 염색 후 에탄올이 아닌 이소프로필 알콜로 헹군 경우③ 두꺼운 조직 절편④ 과도한 염색시간⑤ 에오신의 pH가 낮을 경우(3) 에오신 염색성이 한가지 색으로만 나타날 때① 고정불량② 과염색?. 봉입 Mounting: 염색이 완료된 조직 표본에 봉입제(점도가 높은 용액)가 묻은 cover glass를 덮어 밀폐하는 과정봉입시 커버글라스의 두께는 0.2mm이하를 사용한다.1. 봉입제의 종류① 수용성 봉입제 : 지방염색, 변색성 염색, 면역 형광염색, 면역효소염색, 조직효소염색에 사용ⅰ. Glycerinⅱ. Glycerin-jellyⅲ. Crystal mountⅳ. Apathy gum syrup② 비수용성 봉입제 (탈수, 투명을 거쳐야 함)ⅰ. canada balsam (Xylene으로 동량혼합해서 사용, 천연수지)ⅱ. Permountⅲ HSR(Histoclard)ⅳ. Ceder wood oil(immersion oil)ⅴ. Enkitt2. 봉입의 목적① 절편의 손상 방지② 부패(습기, 세균) 방지③ 퇴색방지3. 봉입제의 조 좋다
★ 선배의 한마디 : 임상화학은 3학년이 되면서 공부해야 할 량이 너무 많아서 힘들어하는 과목입니다. 분량은 많지만 대부분 외워야 할 것들 이기 때문에 하루하루 그날의 수업을 복습하여 반복적으로 보는 것이 주요합니다. 물론 원리를 이해하며 배운다면 더 좋습니다. 국가고시에서 가장 많은 비중을 차지하기 때문에 늦어도 3하견 1학기까지는 모두 이해하고 그 후로 계속되는 학교의 모의고사에 출제되는 문제 중에서 중요한 문제를 금파의 빈칸에 적어가며 오답노트와 함께 병행하며 공부하셨으면 합니다.★ 국가시험 : 1교시, 총 40문제 중 26문제Ⅰ. 임상화학의 정의1. 임상검사의 시료1. 임상검사의 재료는 거의 혈액과 요로 제한★★★(혈액 중에서도 대부분 Serum을 사용)2. 혈액화학 성분의 항상성1) 항상성의 개념- 체액의 화학조성은 정상시에는 거의 일정한 치를 유지한다. 병적일 때 그 농도의 변동이 일어난다.2) 전형적으로 항상성을 보이는 것★★★(인체는 항상성을 항상 유지함으로서 생명을 유지한다.)(1) 혈청 전해질(2) 삼투압(3) pH3) 혈청화학 성분 중에서 건강할 때 그 농도변화가 극히 큰 것(1) 혈청 Cortisol : 일내변동이 5배(2) Aldosterone : 체위의 차이만으로 10배의 차이를 보여준다.★★★2. 검체의 선택1) 혈액 : 혈구성분과 혈액성분으로 구성2) 혈장(Plasma)과 혈청(Serum)의 차이점★★★★★혈 장 (Plasma)혈 청 (Serum)항 응 고 제첨 가없 다Fibrinogen함 유없 다비 고★ 생체정보를 가장 정확히 알 수 있다.★ 임상화학에서 피검재료로 사용하는 것이 원칙★ 응고인자가 함유되어 있기 때문에 응고 factor 검사에 사용★ 임상화학적 검사에 가장 많이 사용되는 검체이다. ★★★3) 항응고제의 단점(1) Ca이온제거(2) 혈액에 anticoagulant(항응고제)를 첨가함으로써 혈액오렴 (Na, K, Ammonium 등의 오염)가능성이 있다.(3) 임상화학적(혈장 및 혈청학적) 분석에 간섭(4) 혈액의 pST, ALT, LDH감 소↓Glucose, TG실온에서안정한효 소LDH, ACP, Amylase, Alk-P, ICD지 방Lipoprotein, NEFA♂ > ♀17KS, 170HCS, Fe, Hb, Uric acid성 별★★★♂ < ♀Creatine, Cholesterol, TIBC, UIBC성인 > 유아Creatine, Bilirubin연 령성인 < 유아Creatine, ALP(100배이상 높다), LDH, AST, ALT, P일내변동아침, 낮증가↑, 밤에 감소↓Uric acid, Protein, NEFA, Hb, Cortisol, Fe, ACTH낮에감소↓밤에증가↑ALP, TG, P, BUN, Amylase혈 액방치시증 가↑Ammonia, pH,CO _{2}, Met-Hb,HCO _{3}, Lactic acid, 유기인감 소↓O _{2}, Bilirubin, Glucose직사광선에 불안정한 것Bilirubin, Porphyrin, Urobilinogen서 있을 때 > 누워 있을 때Total Proten, Albumin, Ca, LDH, Cholesterol, ALP, TTT, 황달지수정맥혈액 > 동맥혈액CO _{2}, Lactic, acid, Pyruvic acid정맥혈액 < 동맥혈액O _{2}, Lactic acid, Pyruvic acid5. 요의 임상화학1) 신장은 혈액의 여과와 재흡수, 농축의 과정을 통하여 잉여의 혈장성분을 요로 옮기고 부족한 것을 혈액 중에 머물게 하여 체액의 항상성을 유지시킨다.2) 요는 혈액의 항상성과 불가분의 관계가 있어서 외계나 생체 내의 변호에 대해서 시시각각 그 배설량과 조성이 변한다. 따라서 부분 요의 농도가 임상적 의미를 갖는 것은 적고 정량적인 관찰을 하기 위해서는 24시간 또는 일정 조건하의 단위시간당 배설량을 측정하지 않으면 안 된다.3) 신배설의 역치 (Renal Threshold)(1) 일정한 정상치를 유지하다가 조금 증가하여도 소변으로 배설되지 않는 여유를 갖고 있는 양(2) Glucose의 신역치 : nel, Filtering flask, Aspirator10. 저울- 질량은 천칭에 의해 측정되는데 천평은 모든 측정기계 중에서 최고의 정도를 가지고 있다.- 분동은 저울에 오른쪽에 놓는다.1) 천평의 정도 = 감량/평량(1) 감량 : 정확히 달 수 있는 최소의 질량***(2) 평량 : 안전하고 정확하게 평량할 수 있는 최대의 질량***2) 화학천평(Analytical balance)(1) 정량분석시 사용(표준액,규정액 등의 정확한 용액제조사)(2) Readability, 정밀도, 정확도가 월등(3) 0.1mg까지 정확하게 평량할수 있다.3) 저울 청량법(1) 평량접시에 아무것도 올려놓지않고 진동을 주어 지침이 정지했을 때 눈금이 중앙에오는가를 검사(2) 밸런스 암의 나사로 지침을 조정하여 0에 맞춘다.(3) 평량할 물체를 왼편, 분동은 오른편에 놓는다.(4) 분동은 무거운것부터 올리기 시작해서 평행하게 될 때까지 잰다(지침이 중앙에 올때 까지)4) 천평 사용할 때 주의사항(1) 온도변화가 적은 방에 설치(2) 진동이 없는 수평대위에 설치(3) 직사일광, 약품의 증기로부터 보호(4) 사용전 손을 잘 씻는 습관을 갖는다(5) 천평은 항상 청결히 보존(6) 정지시에는 모든 손잡이를 0에 맞춘다(7) 시약은 접시에 직접 놓지말고 약포지를 이용한다.※ 화학천평의 지침이 정지점에서 서서히 오른쪽으로 이동할 때 가장 큰 원인?* 시료에 습기가 차온다.(시료쪽이 무거워지므로)※ 도가니* 건조와 회화* 고온에서 견딜 수 있는 유일한 접시※ 냉각기* 농축과 합성에 이용* Uric acid 측정시 Phosphotungstate 농축시약 제조에 이용* DW농축에 이용※ Column Chromatography로 모든지 측정 할 수 있으나 안되는 것? CCF, TTT, ZTT※ Refractometer (TS Meter)로 측정하는 것?* Uric SG* Urine 총 고형성분의 함량측정* 굴절용* Protein* 표준물질 - DW11.사용목적에 따라* 표준액 제조시 온도 : 20도(8) 105~110도 정도에서 건조가 잘되어야 하며, 성분의 변화가 없어야 한다.4) 1차 표준물질의 종류***(1) Boiling HCl (2) Potassium biphthalate(3) Potassium iodide (4) Potassium dichromate(5) Sulfamic acid (6) Sod. chloride(7) Sodium citrate (8) Sod. oxalate(9) Sodium tetraborate (10) Tishydroxy methyl aminomethane5) 표준물질의 분류***산성표준물질① Constant baling HCL② Oxalic acid(수산)③ Potassium biphtalate④ Succinic⑤ Porassium Iodate염기성 표준물질① Sodium terta-borate(붕사)② Tris(hydroxymethyl) methylamine③ Sodium carbonate(Na _{ 2}CO _{ 3})중성 표준물질① NaCl② Potassium iodate(KlO _{ 3})③ Potassium dichromate4. 2차 표준물질 : 액체로 되어 있다.1) 정의- 용질을 저울로 달아서 알고있는 부피의 용액에 녹여도 정확한 농도를 알수 없는 것.정확한 농도를 결정하는데 1차표준물질오 적정된 것.- 직접 칭량한 후 용액화하여 사용할 수 없으며 1차 표준물질에 대하여 표준한 후 사용 할 수 있다.2) 2차 표준물질의 종류***(1) HCl(2) Sod. thiosulfate(3)H_{ 2}SO _{ 4}5. 참조용 표준물질 (Reference Standars)- 신용 있는 검사실에서 농도를 결정한 것. 정도관리에 사용한다.6. 물의 정체Type1 (3차)Type2 (2차)Type3 (1차)저 항10 ^{ M Ω }0.5 ^{ MΩ}0.1 ^{ MΩ}전도도 Ig 단백분자의 일부가 불완전 과잉생산되어 Ig 합성에 이용되지 못하고 혈장중에 존재하는 L-Chain 분자 량이 작기 때문에 사구체를 통과하여 요중에 는 것을 이용한 검사이다.- 시 약 : CuSO4, sod.citrate, sod.carbonate, 무수 Na2CO3- 결 과 : 청색(-) -- (1+) : 녹색 -- (2+) : 황색 -- (3+) : 황갈 -- 적색(4+)- 특 징 : 이 검사법에서 양성이면 당 감별 시험이 필요하다.★ glucose 이외의 다fms 환원당 (fructose, lactose, galactose, pentose 등)도 검출가능★ sucrose는 환원당이 아님으로 환원반응에서 음성이다.★★!!Benedict 법시험지법Glucose++Lactose+-Sucrose- ★-< 요당 검사법에서 환원당의 반응 >▶ 요당 정량검사 (종류만 알아두세요 ★)? Benedict 법- 원리 : CuSO4 시약에 의한 환원작용 + CNS염시약 => 백색침전- 결과 : 시약 5ml + glucose 10mg? O-Toluidine 법(OTB)- 원리 : 요의 포도당은 빙초산을 함유하는 O-Toluidine 용액과 반응을 하면 glucosylamine을 형성하며 이것 을 비색한다.- 요당측정 전에 제단백을 해주어야 한다.? 기타 측정법 : Folin-Wu, Somogyi-Nelson, GOD, Hexokinase* 각종 환원당의 동정검사종 류측 정 법판 정질 환 명Osazone 결정형태LactoseMalfatti 법Rubner 법적색임신말기, 산후, 모유아밤송이모양FructoseSeliwanoff 법오렌지, 적색다량의 과일섬취, 간장애솔잎모양PentoseBial orcinol 법녹색체리, 복숭아과량섭취, 당뇨병 선천성대사이상가는 털모양GalactoseMucic법, Tollen 법백색침전간기능이상,갑상선기능항진증굵은뿌리모양6. Ketone body★★ - 건강인에게서 나오지 않는다. 산중독시 나타남.★★ 요당 양성시 케톤체 검사★ Ketone체는 탄수화물(glucose)대사에 이상이 있고, 다량의 지방대사가 이루어졌을 때 형성된다.ex)당뇨병, 기아상태(심각한 다이어트)시★ Ketone 체란 지방의
의료법규제1장 의료기사법★ 업무범위★ 업무한계 : 의료기사는 의사 또는 치과의사의 지도를 받아 그 업무를 행한다① 임상병리사 : 검사용 시약의 조제, 가검물의 채취, 검사, 혈액의 채혈?조제?조작?보존?공급 ★(혈액의 조제는 가능하지만 수혈은 간호사) 혈액의 사용은 아니다.② 방사선사 : 핵의학적 검사, 초음파진단기의 취급, 방사선 관련 부속기자재의 선택 및 관리③물리치료사 : 재활훈련에 필요한 기기?약품의 관리★④작업치료사 : 신체부분의 기능장애를 원활하게 회복시킴★(물리치료사와 비교구분!!)⑤치과기공사 : 치과기공소 개설 가능(치과의사, 치기공사)⑥치과위생사 : 치설제거 및 치아우식증, 구강질환 예방, 구내 진단용 방사선촬영가능⑦의무기록사 : 기록 및 정보를 유지?관리하고 이를 확인하는 업무⑧안경사 : 시력보정용 안경의 조제(단, 콘택트렌즈는 조제 못함★★★) 및 판매업무Ⅱ 의료기사등의 자격과 면허1. 적극적 요건 : 국가고시에 합격하여 보건복지부장관의 면허를 받는 것 ★★★- 국가고시응시자격① 취득하고자 하는 면허에 상응하는 전문대학이상의 졸업한 자② 보건복지부장관이 인정하는 외국에서의 국내전문대학 동등이상의 학교 졸업 후 외국의 해당 면허 취득한 자2. ★★ 소극적 요건 (결격사유) ★★① 정신질환자.② 마약?대마?향정신성의약품 중독자③ 금치산자, 한정치산자, 파산선고를 받고 복권되지 않은 자④ 국민건강보험법에 위반하여 금고(벌금, 구류X) 이상의 실형의 선고를 받고 그 집행이 종료되지 아니하거나 면제되지 아니한 자 - 단, 정신지체인, 맹자, 농자, 아자는 국가고시 응시 가능★3. 국가시험★★① 대통령령이 정하는바에 의하여 매년 1회 이상 보건복지부장관이 이를 시행한다.★② 보건복지부장관은 국가고시의 관리를 관계전문기관 국가시험관리기관이 대행하게 한다.③ 국시원은 정부가 설립, 비영리법인, 국가시험에 관한 전문적인 능력이 있을 것을 전제한다.④ 국가시험관리기관의 장은 국가시험위원을 위촉할 수 있다.⑤ 국가시험관리기관의 장은 시험의 실시에 관하여 시험실고 안경업소를 개설한 자④ 영리를 목적으로 특정 안경업소 또는 안경사에게 고객을 알선?소개?유인한 자3. 과태료★★ -보건복지부령1) 다음에 해당하는 사람은 100만원이하의 과태료① 실태와 취업사항의 신고를 하지 아니한 자② 폐업 신고를 하지 아니하거나 등록사항의 변경신고를 하지 아니한 안경업소 개설자③ 보고를 하지 아니하거나 검사를 거부 기피 또는 방해한 자2) 부과권자보건복지부장관, 시?도지사 또는 시장?군수?구청장★ 부과권자 및 벌금관련- 벌금 및 과태료를 부과할 수 있는 자 : 보건복지부장관, 시?도지사, 시장?군수?구청장★★★- 과태료 처분에 불복이 있는 자는 그 처분의 고지를 받은 날부터 30일 이내에 부과권자에게 의의제기가능★★★제2장 의료법(전문개정공포일 : 1973. 2. 16.)Ⅰ 총설1. 목적★★★① 국민의료에 관하여 필요한 사항을 규정함으로써② 의료기 적정을 기하여③ 국민의 건강을 보호증진함2. 의료관계인의 이해보건복지부장관의 면허를받은 자★① 의료인② 약사③ 의료기사등④ 영양사해당국가시험에 합격하여 보건복지부장관의 면허를 받은 자의사, 치과의사, 한의사, 조산사, 간호사★약사국가고시시험에 합격한 후 보건복지부장관의 면허를 받은 자해당국가시험에 합격한 후 면허를 보건복지부장관의 면허를 받은 의료기사 (임상병리사, 방사선사, 물리치료사, 작업치료사, 치기공사, 치위생사) , 의료기사 등 (의무기록사, 안경사)영양국가고시시험에 합격한 후 보건복지부장관의 면허를 받은자시?도지사 의자격인정을받은 자★간호조무사의료유사업자안마사고등학교 이상의 학교 졸업자 또는 졸업예정자로 간호조무사양성소에서 소정의 훈련과정을 이수하여 시?도지사의 자격인정을 받은 자시?도지사의 자격인정을 받은 침사, 구사, 접골사★앞을 보디 못하는 자로서 소정의 교육을 받아 시?도지사의 자격인정을 받은 자보건복지부장관의자격인정을받은 자★사회복지사응급구조사보건복지부장관의 자격인정을 받은 자보건복지부장관이 실시하는 응급구조사시험의 합격한 후 보건복지부장관의 자격인정을 받은 자Ⅱ 의료인의사 ? 조산사는 출생 ? 사망 ? 사산의 증명서의 교부를 의뢰받을 때 정당한 이유 없이 거부 못한다.2) 소극적 의무 ★★① 의료업에 종사하고 자신이 진찰 ? 검안한 의사 ? 치과의사 ? 한의사가 아니면 진단서 ? 검안서 ? 증명서 또는 처방전을 작성하여 환자에게 교부하거나 전자처방전을 발송하지 못한다.② 진료 중이던 환자가 최종진료 시부터 48시간 이내★에 사망한 경우, 다시 진찰하지 않더라도 진단서 ? 검안서의 교부가 가능하다.③ 환자를 직접 진찰 ? 검안한 의사 ? 치과의사 ? 한의사가 부득이한 사유로 진단서 ? 검안서 ? 증명서를 교부할 수 없을 때에는 같은 의료기관에 종사하는 다른 의사 ? 치과의사 ? 한의사가 교부가 가능하다.(5) 처방전의 작성 ?교부 (한의사, 수의사는 교부 x)① 의사 ? 치과의사 는 환자에게 의약품을 투여할 필요가 있다고 인정하는 때에는 약사법에 의하여 자신이 직접 의약품을 조제할 수 있는 경우를 제외하고 보건복지부령이 정하는 바에 의하여 처방전을 작성하여 환자에게 2부 교부하거나 전자처방전을 발송하여야 한다.★★★② 처방전 기재사항★★? 환자의 성명 및 주민등록 번호? 의료기관의 명칭 및 전화번호? 한국표준질병사인분류에 다른 질병분류기호? 의료인의 성명 ? 면허종별 및 번호? 처방 의약품의 명칭 ? 분량 ? 용법 및 용량? 처방전의 교부연월일 및 사용기간? 의약품 조제시 참고사항(6) 비밀준수의무 ( = 비밀누설의금지)① 의료인은 의료법 또는 다른 법령에서 특히 규정된 경우를 제외하고는 의료 ? 조산 ? 간호에 있어서 지득한 타인의 비밀을 누설하거나 발표하지 못한다.★★(의료법 또는 다른법령에서 특별히 규정되었을 경우 비밀누설가능)② 공소는 고소가 있어야 한다.(친고죄)★★ 벌금 : 3년이하의 징역 또는 1천만원이하의 벌금★★(7) 기록등에 관한 의무★★① 기록을 열람시키지 않을 의무(비밀준수) →업무상 비밀누설죄와 같음② 환자의 기록열람등(환자의 알 권리) : 환자, 그 배우자, 그 직계존비속 열람을 요구할 때 이에 응해야을 개설할 수 없는 자가 소속직원, 종업원, 가족 등의 건강관리를 위해서 의료기관 개설하는 것- 병원급 이상일 때는 시 ? 도지사에게 허가를 받아야 한다.★- 의원급 일 경우, 관할 시장 ? 군수 ? 구청장에게 신고해야한다.★(6) 의료기관의 시설기준, 규격, 정원- 입원실① 지하, 지상3층이상 설치안한다. (내화구조인 경우는 3층이상 가능)② 면적 : 환자1인 6.3m^{ 2}이상, 2인이상- 4.3m^{ 2} x 인원수: 소아 - 성인환자 1인면적의 ⅔이상(7) 의료인의 정원★★★(계산 문제)- 의사 ? 치과의사 ? 한의사 : 연평균 1일 입원환자 20명에 대해서 1명 (ex, 환자 41명이면 의사 3명)외래환자 3명은 입원환자 1명으로 환산하여 계산요양병원에 있어서는 입원환자 40명 : 의사 1명으로 계산- 조산사 : 간호사 정원의 3분의 1 이상이 있어야 함- 간호사 : 연평균 1일 입원환자 5명에 대해서 2명 (ex, 11명이면 간호사 3명)외래환자 12명을 입원환자 1명으로 환산하여 계산간호조무사는 간호사 정원의 3분의 2 이내요양병원에 있어서는 입원환자 6명 : 간호사 1명(8) 요양병원의 운영노인성질환자, 만성질환자 외과적 수술 후 또는 상해후의 회복기간에 있는 자로서 주로 요양을 필요로 하는 자로 한다. 다만, 정신질환자(노인성치매환자를 제외한다) 및 전염성 질환자는 입원대상 x ★★(9) 진단용방사선 발생장치진단용 방사선 발상장치를 설치 ? 운영하고자 하는 의료기관은 시장 ? 군수 ? 구청장에게 신고하여야 한다.★★(10) 시설의 공동이용- 의료인은 다른 의료기관의 장의 동의를 얻어 그 의료기관의 시설 ? 장비 ? 인력 등을 이용하여 진료할 수 있다.- 이 때 의료사고에 대한 책임은 이를 제공한 의료기관의 개설자에게 각각 책임이 있다.(11) 의료기관의 명칭- 의료기관이 아니면 의료기관의 명칭, 이와 유사한 명칭을 사용할 수 없다.(1000만원이하 과태료)★★★- 의료기관의 종별에 따르는 명칭을 제외한 다른 명칭을 사용할 수 없다.(3000만 수 있다.5년이하의 징역 또는 2천만원이하의 벌금면허증을 대여한 자의료기관의 의료용 시설, 기재 ? 약품 기타의 기물등을 파괴 ? 손상하거나 의료기관을 점거하여 진료를 방해한 자 및 이를 교사 또는 방조한 자무면허의료행위를 한 자의료기관을 개설할 수 없는 자가 의료기관을 개설한 때정당한 사유없이 전자처방전에 저장되 개인정보를 탐지하거나 누출 ? 변조 ? 훼손한자3년이하의 징역 또는 1천만원이하의 벌금업무상 지독한 타인의 비밀을 누설한 의료인의료인으로서 태아의 성감별을 목적으로 임부를 진찰, 검사 또는 검사를 통하여 알게 된 태아의 성별을 임부와 관계된 자가 알도록 한 자정당한 이유 없이 환자에 관한 기록을 열람하게 된 경우영리를 목적으로 환자를 소개 ? 알선한 자1년이하의 징역 또는 300만원이하의 벌금진료 ? 조산의 요구를 받고 정당한 이유없이 이를 거절한 자진단서등의 교부의 소극적 의무를 위반한 자제3장 지역보건법(전문개정고포일 : 1995 ? 12 ? 29)1. 목적★★★- 보건소등 지역보건의료기관의 설치 ? 운영- 지역보건의료사업의 연계성 확보에 필요한 사항을 규정★- 보건행정을 합리적으로 조짓 ? 운영★- 보건시책을 효율적으로 추진★- 국민보건의 향상에 이바지함★ (의료향상에 이바지함을 목적→의료기사등에 관한법률) 구별하세요!!!2. 국가와 지방자치단체의 의무★★★★★국 가지역보건의료에 관한 조사연구, 정보의 수집정리 및 활용, 인력의 양성★ 및 자질향상(동통된 사항)에 노력지방자치단체의 보건시책의 수립, 시행에 필요한 기술적, 재정적 지원시책★을 강구시 ? 도당 해 시 ? 도의 보건시책의 추진을 위한 조사 ? 연구, 인력확보, 자질향상 등에 노력시 ? 군 ? 구의 보건시책의 수립 ? 시행에 필요한 기술적 ? 재정적 지원, 인력의확보★, 자질향상의 노력시 ? 군 ? 구보건소등 지역보건의료기관의 설치운영, 인력확보★, 자질향상 등에 노력3. 지역보건의료계획의 수립? 계획수립제출순서 : 시장 ? 군수 ? 구청장 → 시 ? 도지사 → 보건복지부장관★★★?.★
수혈학수혈학★ 선배의 한마디 : 배우는 것에 비하면 몇 문에 출제되지 않지만 몇 가지 중요한 검사법만 외우면 무난히 국가시험을 준비할 수 있는 과목입니다. 임상에서 혈액은 사람의 목숨과 직결되기 때문에 임상병리사가 꼭 알아야 합니다.국가시험을 준비하면서 수혈의학에 대해 폭넓게 공부를 한다면 임상에 나가서 별 문제 없이 임상병리사의 업무를 수행할 수 있을 것입니다. (특강 위주의 정리이므로 실제 특강을 들을 때 참고 하시면 좋을꺼란 생각이 듭니다.)★ 국가시험 : 2교시 총 25문제 중 5문제 출제. 2차 문제 3~4문제 출제★ 채혈금지 대상자(공통기준)1. 전염병예방법 제2조 제1항의 규정에 의한 전염병 환자2. 체중이 남자 50kg, 여자 45kg 미만인 자3. 구강 체온이 섭씨 37.5도 이상인자4. 수축기 혈압이 90mmHg 이하 또는 180mmHg 이상인 자5. 이완기 혈압이 100mmHg 이상인 자6. 맥박이 1분 간에 50회 이하 또는 100회 이상인 자7. 임신중인 자 또는 분만 후 6월 이내인 자8. 외과 수술 6개월이 경과하지 아니한 자9. 수혈 수 1년이 경과한지 아니한 자10. 광견병 예방접종 후 1년이 경과하지 아니한 자11. 콜레라, 장티프스, 또는 렙토스피라증의 예방접종 후 24시간이 경과하지 아니한 자12. 호흡기질환자, 심장병환자, 당뇨병환자, 알콜, 마약중독자 등 정상이 아닌자13. 심신상실자14. 문진 결과 헌혈불가로 판정된 자15. 기타 의사의 진단에 의하여 건강상태가 불량하거나 채혈이 부적당하다고 인정되는 자★ 채혈금지 대상자(개별기준)채혈의 종류기준320mL 전혈채혈400mL 전혈채혈1. 16세 미만인자 또는 65세 이상인자2. 혈액의 비중 1.053 미만인자, 혈액 100mL 혈색소량이 12.5g/dL 미만 또는 적혈구 용적률이 38%미만인 자3. 전혈 채혈일로부터 2월, 성분 채혈일로부터 14일이 경과하지 아니 한자4. 과거 1년 이내에 전혈 채혈 횟수가 5회 이상인 자1. 17세 미만인자 또는 65세 이상인자2. 체중포들은 많은 양의 H항원을 가진다.15. Bombay형표현형이 h/h인 사람은 Bombay형이라고 한다. Bombay를 Oh 또는 ABHnull로 표현하는 것이 적합.16. ABO 혈액형의 구분ABOAB응집원ABA , B응집소Anti - BAnti - AAnti ? A, B(1) ABO 불일치 현상1) 적혈구 측원인①ABO아형, 변이형으로 인해 항원성이 약한 경우②질병으로 인한 항원성의 변화 (후천성)③키메라현상 ? 적혈구 혼합④다응집반응⑤획득 B형⑥적혈구에 항체가 부착되어 있는 경우⑦Cis-AB형인 경우(혈구측, 혈청측 모두의 원인)⑧비특이적 응집2) 혈청측 원인①비예기 항체 존재시②Anti-A, anti-B 항체의 증명이 어려운 경우③기술적원인에 의한 위음성, 위양성④ABO 아형★ Anti-A1 Lectin : 식물응집소Anti-A1 Lectin는 Dolichos biflorus라는 식물의 씨앗에서 추출하여 만든 것.사람의 적혈구를 특이적으로 응집시킴.A1형과 A2형을 구별할 때 사용★★ Anti-H LectinAnti-H Lectin은 Ulex europaeus 라는 식물의 씨앗에서 추출한 것이며, 타액과 적혈구에서 H물질을 검출할 때 사용.(2)Cell typing1. Slide glass 법 ★★★★★★i.Slide glass에 wax pencil로 A와 B를 표기ii.Anti-A, anti-B 혈청을 각각 1 drop씩 적하시킨다iii.소량의 피검혈액(항혈청의 1/2량)을 항혈청에 각각 적하 후 applicator로 섞는다.iv.Slide를 전후좌우로 기울여 반응을 촉진시킨 후 2분 이내에 판독한다.2. Tube법 ★★★★i.4부 tube에 anti-A, anti-B 혈청을 1drop씩 적하ii.2~5% 혈구부유액을 각각에 1drop씩 적하iii.혼합하여 5℃℃ 실온에 방치iv.응집력을 높이기 위해 1000rpm/1’ 원심분리v.Tube를 tapping시켜 솟아오르는 혈구의 응집여부 관찰(3) Back typing① 가검혈청 2 drop씩을 각각의 HLA-DB 항원 검사와 HLA-crossmatching 검사는 기본적으로 실시HLA-C와 HLA-DQ는 routine으로 실시하지 않는다.2) 친자 감별 검사의 항목? HLA-A, HLA-BEMD HLA 항원검사? ABO, Rh 혈액형 검사?VNTR (variable numbers of repeats): non-HLA의 유전부위 다형성 검사? RFLP검사 : DNA유전자 분석법20. 적합성 검사 (Determination of compatibility)* 적합성 검사란 ?→ 환자에게 안전하게 수혈시키기 위해 혈액은행에서 실시하는 모든 것을 총칭★★★(1)ABO typing test 실시(2)Rh typing test 실시 → 음성일 경우 D test 실시(3)Cross matching 실시① 시험관에 주시험, 부시험을 각각 표시② 주시험관에는 환자혈청 2 drop과 공혈자혈구 1 drop을 넣는다.③ 부시험관에는 환자혈구 1 drop과 공혈자혈청 1 drop을 넣는다.④ 두 시험관에 식염수 2 dropTlr을 넣고, 15‘ 방치 후 1000rpm/1' 원심침전 후 판독⑤ 두 시험관에 bovine albumin 2 dropTlr을 넣고 10‘ 방치 후 2000rpm/1' 원심침전 후 판독⑥ 두 시험관을 37℃ water bath에 15‘incubation 후 1000rpm/1' 원심침전 후 판독→ 여기서 응집이 생기면 온항체에 의한 수혈부적합이다.⑦ 응집이 없었다면 주교차시험관만을 선택하여 생리식염수로 3회 세척 후 상층액 제거⑧ 남은 혈구에 AHG 2 drop을 가하여 1000rpm/1' 원심침전 후 판독* Cross matching *방법1type and screen 법 → Immediate spin 법방법2실온식염수법 → 37℃ 알부민법 → 항글로불린법방법3LISS 법(저이온강도용액법) → 37℃ 식염수법 → 항글로불린법이온력을 낮추어 항원반응시간 단축☆ 환자가 A, B, 뮤 형일 시 O형을 수혈하면..주시험 : 비응집부시험 : 응집☆ 환자가 O 형일 시)★★★① 항원-항체 결합물에 의해서만 활성화★★★★★② 활성화 항체 - IgM, IgG③ 2가 이온 Mg++, Ca++ 필요④ Clq, C4b, C2a 관여가 필수적2) 제 2 경로 (부경로, alternative pathway)★★★① 자연계에 존재하는 물질에 의해서도 활성화★★★(뱀독에 의해서 활성화 가능)② 이물침입 초기에 작용 → 생체방어에 중요한 역할 담당③ 활성화 - 변성단백, Lipo polysaccharide(LPS), Zymosan④ 2가이온 Mg++ 필요⑤ C1q, C4b, C2a 관여 없음(4) 항원항체 반응1. 항원과 항체의 결합★★★(종류)1) 정전력(인력, Electrostatic); 서로 반대의 하전이온, 서로 당기는 힘, 거리(d)의 제곱에 반비례 (F ∝ 1/d2)2) 수소결합; 친수성기(-OH,-NH2,-COOH)-본래 정전력을 가지 있어 서로 접근할수록 강한 힘이 생김3) 소수성(Hydrophobic); 소수성기가 접근하면 그 사이의 분자는 배제되고 소수성에 의해 결합4) Van der Waals힘; 분자간에 생기는 인력, 서로 접근할수록 당기는 힘은 강해짐2. 항원항체 반응의 종류1) 침강반응; 항원 입자의 크기에 따라 구분, 적혈구나 세균 정도의 크기이면 응집★★★(침강과 응집의 차이)2) 응집반응; 입자의 크기가 적혈구나 세균 정도, 진탕?교반 ? 원심침전 ? 37℃ → 왕성한 반응3) 보체결합반응; 항원 과잉시 보체 결합이 억제, 항원 강량법, 항체 감량법, 보체 증량법4) 항원항체 억제(저지) 반응Influenza virus - O형 혈구 ? 조류 혈구 응집 항체 존재시 응집반응Myxo virus - 조류 혈구 응집 -----------? 억제5) 표지항원항체 반응형광항체법(형광색소), 방사면역 측정법(동위원소), 효소면역 측정법(효소)6) 항원항체 중화반응독소의 무독화(중화)?미생물의 감염력 중화 검사 → 효소의 불활성화 (중화반응)(5) 면역(Immunity)1. 면역이란생체의 저항성, 자기(self)와 비자기(ation)1. VDRL(Veneral Disease Research Laboratory)★★★★★1) 의의 - 간접 응집, 침강반응Cardiolipin, Lecithin, Cholesterol → Kaolin or Carbonate 입자에 흡착한 지질항원 이용2) 원리지질항원 조성 - Cardiolipin 0.03%, Lecithin 0.18~0.3%, Cholesterol 0.9%지질항원 + 환자 혈정(비동화) → 응집(감염) / 비응집(비감염)★★★3) 결과① 정성법? Non-Reactive(N) - No clumping(-)? Weakly Reactive(WR) - Small clumping(±, 1+)★★★? Reactive(R) - Medium or Large clumping(2+, 3+, 4+)★★★② 정량법(역가)? 정성검사 결과 Weakly Reactive 혹은 Reactive경우에 대해 행한다.? 응집 중 2+인 혈청의 희석배수를 역가로 한다.2. RPR(Rapid Plasma Reagin) Circle 반응★★★★★1) 의의 - 혈청과 혈장 모두 사용 (비동화 안함)2) 원리 - 지질항원 + 환자 혈청(항체) → 응집(감염)★★★? 지질항원 조성 - Cardiolipin 0.003%, Lecithin 0.02~0.022%, Cholesterol 0.09%★★★3. 매독 형광항체 반응(FTA)★★★1) 의의 - 형광색소, 특이적 검사2) 원리 - 비병원 균주(Nichol's) 부유액, 형광 표지한 항 Human γ-globulin? 간접법 - 항원 + 혈청(항체) → 항원-항체 복합물 + 형광 표지항 Human globulin →형광? 직접법 - 항원 + 형광 표지 항 Human globulin 혈청(항체) → 형광★★★3) 결과? BV filter(Yellow)와 UV filter(무색)를 사용하여 형광현미경으로 관찰판정BV(Yellow) & UV(무색) filter비 고4+극히 강한 형광 인정BV filter 사용형광 현미경2+ 이상 양성an)
Carcinoembrionic Antigen(CEA) 검출대장암 및 악성종양 진단1. EIA(Enzyme Immunossay)★★★★★1) 원리 - 고상법(B/F 분리 필요), 항원 검출항 CEA 항체 bead + 혈청 → 미반앙 물질 세척 → peroxidase 표지 항 CEA 항체(2 차반응)→ 비반응 peroxidase 세척 → OPD(orthphenylenediamine) → bead(yellow-orange 색깔)→ 발색 정도를 492nm에서 측정2) 결과 - 표준용액으로 만든 표준곡선과 조합해서 검체 중의 농도를 산출한다.★★★면역학적 임신진단임산부 뇨 - HCG호르몬, 임신 후 40~60일 사이 최고도, 정상분만 후 1주일 이후로 소실임신 중 음성 - 태아 사망 / 분만 후 - 2~3주간 양성 → 융모상피종, 기태(mole)1. Immuno-plate pregnancy test - 임신 5주째부터 양성1) 원리 - 한천평판 + 농축 가검뇨 → 둥근 환 또는 침강(호르몬 존재)2) 결과 - 양성(양성 대조보다 약간 크거나 작은 침강환)2. Pregnancy Slide test★★★ Latex응집 억제 반응(Hl test)1) 원리 - 항 HCG 혈청 + 환자 요(HCG) + 감작혈구(HCG) → 응집(비임신)/비응집(임신)2) 결과 및 해석 - 양성-응집(비임신) / 음성 - 비응집(임신) / 임신 5주째부터 양성γ-globulin & fibrinogen 검출1. Latex 응집반응을 이용한 γ-globulin의 반정량1) 원리 - 계대 희석한 3개의 혈청 검사latex 입자(항 human γ-globulin 흡착) +가검혈청 → 응집(일정량 이상)2) 결과 및 해석 : 양성 - 응집(일정량 이상) / 음성 - 비응집(일정량 이하)1번2번3번판 정○○○무 γ-globulin(25mg/ml 이하)●○○저 γ-globulin(50~2000mg/ml)●●○정상(600~1200mg/ml)●●●고 γ-globulin(3000mg/ml 이상)○●●2. 일원면역-, CD33+/-(3) AML, M7GPⅢ a +/-, myeloid marker -/+(4) CML blast crisis- myeloid (>1/2) : AML (myeloid marker)mixed (myeloid + platelet or erythroid marker)- lymphoid (1/3) : B-ilneage ALL (Common, pre-B, Null), T-ALL (rare)- unclassifiable- mixed myeloid & lymphoid(5) CLL- B-CLL (95%) : Smlg + (Weak +)- T-CLL (5%) : Mature T4 + or T8 phenotype4. HLA (human leukocyte antigen)1) HLA 항원계(1) 특징① 6번 염색체 단완에 위치한 MHC 유전자에서 생성되는 산물.② 인체 세표의 표면에 존재하는 세포막 당단백 분자.③ 다형성(polymorphism)의 특성을 가짐(별도 도표 참고)④ 임상적 중요성 :* 장시이식시 환자와 장기 공여자간의 형별 불일치에 의해 이식장기의 거부분응 및 이식편 대 숙주반응(GVHD) 발생의 원인이 됨.* 여러 가지 질환 감수성 및 저항성과의 관련성(2) 기능세포내의 항원파편과 결합하여 복합체를 형성한 후, 복합체를 세포표면으로 표출시켜 T-림프구가 인지하도록 함으로써 특이항원에 대한 면역반응 유발 → 면역조절 기능① HLA + foreign Ag fragment → T 림프구 인식 및 활성화 → 정상면역 반응② HLA + alloAg fragment → T 림프구 인식 및 활성화 → 이식장기 거부반응③ HLA + autoAg fragment → T 림프구 인식 및 활성화 → 자가면역 질환- Class Ⅰ : ① HLA-A, HLA-B, HLA-C② 거의 모든 조직의 유핵세포 표면애 존재③ 분자량 56Kd, heterodimer (heavy chain & β2-microglobulin)④ 세포내에서 생성되는 외부항원(바이러스 항원, 종양 항원)을) HLA 검사의 이용분야★★★① 장기 이식 ② 질병 연관성 연구③ 부친시험(친자감별) ④ 법의학적 이용 : 범인 검색⑤ 유전학적 연구 : 인류학 연구 ⑥ 면역학 연구3) 장기이식을 위한 검사이식을 받을 환자와 장기 공여자간의 면역학적 적합성을 평가하는 검사로서, 이식 전에 실시하는 기본검사와 이식 후에 환자의 면역학적 상태의 변화를 검사하여 이식 장기 생 존율간의 상관관계를 보는 검사가 있다.※ 이식장기별 환자/공여자간의 matching 우선 순위- 고형장기 이식 : ABO match → HLA crossmatch → HLA type match- 골수 이식 : HLA type match → HLA crossmatch → ABO match(1) ABO 혈액형환자와 공여자는 ABO형이 적합하여야 하며 적합성 여부는 수혈 시와 같은 원칙으로 판 정. 골수이식의 경우에는 ABO 혈액형이 부적합 시 이식 전에 혈장분반술 (plasmapheresis)에 의해 환자의 혈장 내 동종항체를 제거하거나 공여골수의 적혈구를 제거하고 유핵세포만 이식하는 방법을 이용한다.(2) HLA-A, B, DR 형별검사골수이식의 경우 이식의 성공을 좌우하는 가장 중요한 요소로 꼽고 있으며, 고형장기의 경우 HLA 일치도는 이식된 장기의 생존율과 비례한다고 한다.(3) HLA 교차시험고형장기(특히, 신장이식)의 경우, 교차시험 결과 양성은 이식 불가능을 의미하며 골수 이식의 경우에는 교차시험 결과 양성 시 이식 전에 혈장분반술(plasmapheresis)에 의 해 환자의 혈장 내 동종 항체를 제거한 후 이식하는 방법을 이용한다.(4) 혼합 림프구 배양검사장기이식(특히, 골수이식) 전에 반드시 실시해야할 검사종목이었으나 HLA 형별검사로 써 분자생물학 검사가 활용되기 시작한 1994년 이후부터 실시하지 않는 성향이 짙다.5. 생체 외 림프구 자극(in vitro lymphocyte stimulation)- 원리림프구를 세포분열물질(mitogen) 또는 이미 노출된 적이 있는 항원, 또는 HLA r giant cell 형성③ cytomegalovirus : 올빼미 모양의 핵봉입체 (CIB : cytomegalic inclusion body)★★★④ EB virus : Epsterin 과 Barr의 발견. 상인두암과 전염성단핵구증의 원인체 ★★★3) Adenoviridae - 급성상기도 감염, 결막염, 인두염★★ 각막염, 폐염, 급성출혈성 방광염4) Papovaviridae - 동물의 종양 virus, 유두종 및 chondyloma 일으킴.5) Parvoviridae - virus 중 가장 작다. rotavirus와 함께 유행성 설사. ★★★외피 비보유 DNA외피 보유 DNAParvoviridaeHepadnaviridaePapovaviridaeHerpesvridaeAdenoviridaePoxviridae2) RNA virus1) Orthomyxoviridae① influenza virus : 1-2일간 잠복 후 두통, 근육통, 관절통, 전신권태 일으킴크기는 80-120nm, envelope 있다.2) Paramyxoviridae : 150-300 nm 의 single stranded RNA① Parainfluenzae : 소아의 호흡기 질환의 원인, 발열과 기침② Respiriatony syncytial virus : 하부기도염③ measles virus : 발진성 질환, 홍역, 감염성 강함④ Mumps virus : 유행성 이하선염의 원인3) Rhabdoviridae : 60×80 nm 의 포탄형, envelope 가진 RNA 파견① Rabies virus (광견병)- 포유류에 널리 분포, 절족동물 매개 virus.- 경련발작 및 뇌염, 혼수상태 주로 동물의 타액을 통해 감염- (공수병)의 원인체.- Negri 소체, 형광항체법, Giemsa 검출★★★② Marburg virus③ Ebola virus4) Picornaviridae : 직경 24-30 nm 의 정사면체로 envelope 없다.① Poliovirus★★★- 인두나 장관점막에 감염되어 편를 터뜨려서 성숙된 virus들을 방출한다.6. 바이러스 감염이란바이러스가 흡착을 통하여 숙주세포 내로 들어가 증식된 상태를 의미한다.7. 호흡기 친화성 바이러스성 질환질환병원체감염장기예방백신인플루엔자Orthomyxo-viridae호흡기계감염위험인자에 유용아데노바이러스 감염Adenoviridae폐, 눈, 수막없음호흡기 합포세포 질환Paramyxo-viridae호흡기계없음라이노바이러스 감염Picornaviridae상기도계없음질환병원체감염장기예방백신단순포진Herpesviridae피부, 인후없음홍역Paramyxoviridae호흡기계, 피부, 혈액약독 생균 백신풍진Togaviridae피부, 혈액약독 생균 백신유행성 이하선염Paramyxoviridae이하선, 혈액약독 생균 백신천연두Poxviridae피부, 혈액Cowpox viruses8. 피부 친화성 바이러스성 질환면역11. 숙주의 방어기전선천면역,유전적 인자획득면역자연면역(감염인자에노출)인위적인백신접종능동면역(고유항체)수동면역자연면역(모체 항체)인위적인 다른 숙주로부터 나온 항체 접종9. 바이러스 감염 결과 → 세포병변효과 발생 → 플라크가장 쉽게 감지 할 수 있는 바이러스 감염 징후는 육안이나 현미경적으로 관찰이 가능한 세포병변효과 이다.육안으로 볼 수 있는 대표적인 세포병변효과는 플라크형성이다.* 플라크 : 바이러스에 감염된 숙주세포가 바이러스 복제증식에 의해 사멸된 흔적을 의미.★ 종양바이러스 (oncogene) ★자연감염이나 실험동물에 접종해서 종양 또는 암을 유발하거나, 시험관 내에서 배양된 세포에 접종하였을 때 세포형질전환을 일으킬 수 있는 바이러스.10. 감염세포의 변화* 감염세포의 변화로 바이러스를 동정해 낼 수 있다.1) cytopathic effect(세포병변효과)★★★2) metamegalocytosis(거대세포증) - CMV3) hemagglutination(혈액응집) - 일본 뇌염 바이러스4) inclusion body(봉입체형성) - 기생충 감염 시면역의 분류★★★ 바이러스의 증식순서 ~ 흡유전
안전관리 조직의 유형라인형 : 100명 이하의 소규모 작업장에 적합하다.안전에 대한 지시나 명령이 신속 정확하게 하달될 수 있다.각 라인의 관리 감독자가 안전에 대한 전문지식이 없기 때문에 적절한 안전대책을강구하기 어렵다.스탭형 : 1000명 미만의 사업장에 적합하다.지식과 기술 축적이 용이하다.생산계통과 스텝과의 마찰이 발생할수 있다.라인 스탭 혼합형 : 1000명이상의 대규모 사업장에 적합하다.전종업원의 안전요원화가 가능한 이상적인 조직이다.안전관리 싸이클의 순서계획(plan) -> 실시(do) -> 검토(check) -> 조치(action)중대재해 발생시 법에 의해 보고해야할 사항 다섯가지.1. 발생개요 및 피해 상황2. 조치 및 전망3. 사업장, 재해유발자, 재해자 개요4. 발생경위5. 기타 재해와 관련되는 주요사항법상 중대재해란?1. 사망자가 1인 이상 발생2. 3개월이상 요양을 요하는 부상자가 동시에 2인 이상 발생3. 직업성 질병 또는 부상자가 동시에 10인 이상 발생하인리히의 사고방지 5단계1.안전관리 조직 2. 사실의 발견 3.분석 4.시정 방법의 선정 5.시정책의 적용안전진단을 받아 안전보건개선계획서를 제출해야 하는 대상 사업장 5가지1.중대 재해 연간 2건이상 발생2.산업 재해 발생률이 동종업종 평균 산업 재해 발생률의 2배이상인 사업장3.직업성 질병자가 연간 2명이상 발생한 사업장.4.작업환경이 현저히 불량한 사업장5.상기 규정에 준하는 사업장으로 노동부장관이 따로 정하는 사업장.작업장에서 통계분석에 의한 재해분석 방법 4가지1. 팔레트도 2. 관리도 3. 특성요인도 4. 클로즈분석사업장에서 안전 보건 관리 책임자가 총괄 관리하는 업무사항1.근로자의 안전 보건 교육에 관한 사항2.산업 재해 예방 계획의 수립에 관한 사항3.산업재해 원인 조사 및 재발 방지 대책의 수립에 관한 사항4.안전 보건 관리 규정의 작성 및 그 변경에 관한 사항5.작업 환경 측정 등 작업환경의 점검 및 개선에 관한 사항안전 보건표지의 종류에 따른 색안내 경고 금지 지육 종류1. 신구 채용시 안전보건교육 - > 1시간이상2. 작업 내용 변경시 안전보건교육 - > 2시간 이상3. 특별 안전보건교육 - > 2시간 이상4. 관리감독자 정기 안전보건교육4. 근로자 정기 안전보건교육 - > 매월2시간이상사업장 안전진단을 실시해야할 시기1. 중대재해 발생시2. 안전 보건 개선계획 수립 시행을 명 받았을 때3. 기타 지방 노동관서장이 안전,보건 진단이 필요하다고 인정할 때산소결핍으로 인한 위험 장소 작업시 안점담당자를 선임하여야 한다. 이때 안전담당자의 직무사항1. 근로자에게 송기 마스크등의 착용을 지도하고 착용 상황을 점검하는일2. 측정장비, 환기 장치 또는 송기 마스크 등을 작업 시작 전에 점검하는 일3. 작업을 행하는 장소의 공기가 적정한지 여부를 작업 시작 전에 확인하는 일4. 산소가 결핍된 공기나 유해가스에 노출되지 않도록 근로자의 작업을 지휘하는일강의식 교육의 장점을 4가지 쓰시오1. 시간 장소 등의 제한이 없다. 2. 강사가 강의의 강도를 조절 가능하고 시간 조절가능하다.3. 보다 많은 수강자를 동시에 굥육할 수 있다. 4. 여러 가지의 수업 매체 및 방법 활용 가능하다.타워 크레인의 설치 해체 작업시 특별 안전 보건 교육의 내용1. 설치 해체 순서 및 안전 작업 방법에 관한 사항2. 부재의 구조 재질 및 특성에 관한 사항3. 부재의 구조 재질 및 특성에 관한 사항4. 이상시 응급 조치에 관한 사항5. 신호 방법 및 요령에 관한 사항유해 위험 방지 계획서의 심사 결과시 판정 구분 3가지1. 적정 2. 조건부 적정 3. 부적정법상 양도 대여 설치 사용이 제한 되는 기계기구 5가지1. 크리인 2.곤돌라 3. 승강기 4. 압력용기 5.교류 아크용접기설치 이전 변경시 유해 위험 방지 계획서 제출 대상 기계1. 용량 1톤 이상의 금속 기타 광물의 용해로2. 노동부 장관이 정한 화학설비3. 노동부 장관이 정한 건조설비4. 가스집합 용접장치(이동식 제외)5. 분진 작업 관련설비인간 기계의 정보처리 단계1단계 감지기능 2단계 정보저장 기 방호설비4. 작업원의 구성 및 근로자의 역할 범위5. 지지방법승강기 작업시 작업 지휘자의 직무1. 작업방법과 근로자의 배치를 결정하고 당해 작업을 지휘하는일2. 재료의 결함 유무 도는 기구 및 공구의 기능을 점검하고 불량품을 제거하는 일3. 작업중 안전대 등 보호구의 착용상황을 감시하는 일승강기 자체 검사 내용매월 1회이상 정기적으로 실시.1. 브레이크 및 제어장치의 이상유무2. 와이어로프의 손상유무3. 가드레일의 상태달기체인등의 사용 제한 사항1. 달기체인의 길이의 증가가 그 달기 체인이 제조된 때의 길이의 5%를 초과한 것2. 링의 단면 지름의 감소가 그 달기 체인이 제조된 때의 당해 링의 지름의 10%를 초과 하는것3. 균열이 있거나 심하게 변형된 것섬유로프 등의 사용 제한 사항1.꼬임이 끊어진것2.심하게 손상 또는 부식된 것차량계 화역 운반기계의 화물 적재시의 조치 사항1. 편하중이 생기지 아니하도록 적재할 것2. 운전자이 시야를 가리지 않도록 화물을 적재할 것3. 화물의 붕괴 또는 낙하로 인한 사고를 방지 하기위해 로프를 거는등의 필요한 조치를 취할것차량계 건설기계의 작업시작전 점검사항1. 제동장치 및 조종장치 기능의 이상유무2. 차륜의 이상유무3. 전조등, 후미등, 방향지시기 및 경보장치 기능의 이상유무차량계 하역건설기계 지게차등의 경우4. 하역장치 및 유압장치 기능의 이상유무파워셔불 : 작업 위치보다 높은 산이나 절벽의 굴착시 이용백호 : 작업위치보다 낮은곳의 굴착에 용이클램쉘 : 수중 굴착 등 일정한 장소에서의 흙의 굴착드래그라인 : 작업 위치보다 낮은 굴착에 적합 수중 굴착이 가능높이 2m 이상의 작업장소에서 작업시 추락방지1. 작업발판설치2. 안전방망설치3. 근로자로하여금 안전대 착용하도록 조치개구부의 방호조치1. 안전난간 설치2. 울 및 손잡이 설치3. 충분한 강도를 가진 덮개 설치4. 어두운곳에서도 식별이 가능하도록 개구부임을 표시5. 근로자로하여금 안전대 착용하도록 조치지붕위에서의 위험 방지1. 폭 30cm이상의 발판 설치2. 안전방망고한 받침대를 설치할것3. 동바리의 이음은 맞댄이음 또는 장부이음으로 하고 같은 품질의 재료르르 사용 할 것.4. 강재와 강재의 접속부 및 교차부는 볼트 클램프등 전용 철물을 사용하여 단단히 연결할 것.5. 거푸집이 곡면인 때에는 버팀대의 부착 등 그 거푸집의 부상을 방지하기 위한 조치를 할 것.파이어 서포트 사용시 준수사항1. 3본이상 이어서 사용하지 아니하도록 할것2. 파이어 서포트를 이어서 사용할 때에는 4개이상의 볼트및 전용 철물로 단단히 연결할 것3. 높이가 3.5m 초과할 때에는 높이2m 이내마다 수평연결재를 2개 방향으로 만들고 수평연결재의 변위를 방지할것콘크리트 타설 작업시 준수사항1. 작업시작 전 거푸집 동바리등의 변형 변위 및 지반의 침하 유무 등 을 점검하고 이상 발견시 즉시 보수 할것2. 콘크리트 타설 작업시 거푸집 붕괴의 위험이 발생할 우려가 있는 때에는 충분한 보강 조치를 할 것.3. 설계도서상의 콘크리트 양생기간을 준수하여 거푸집 동바리 등을 해체 할 것.4. 작업 중에는 거푸집 동바리 등의 변형 변위 및 침하 유무 등을 감시할 수 잇는 감시자를 배치하여 이상 발견시 작업을 중지시키고 근로자를 대피 시킬 것.콘크리트 펌프 또는 펌프카 사용하여 공구리 타설시 준수사항1. 작업 시작전 콘크리트 펌프용 비계를 점검하고 이상을 발견한 때에는 즉시 보수할 것2. 건축물의 난간 등에서 작업하는 근로자가 호스의 요동,선회로 추락하지 않도록 난간을 설치하는등의필요한 조치를 할 것.3. 콘크리트 펌프카의 붐을 조정할 때에는 주변 전선등에 의한 위험을 예방하기 위한 적절한 조치를할 것4. 작업 중에 지반의 침하 아웃트리거의 손상등으로 인해 펌프카가 넘어질 우려가 있을 땐 이를방지하기 위한 적절한 조치를 할 것거푸집 동바리 조립 또는 해체 작업 시 준수사항1. 당해 작업을 하는 구역에는 과계 근로자외의 출입을 금지 시킬 것2. 날씨가 몹시 나쁠 때에는 해당 작업을 중지 시킬 것3. 재료,기구 또는 공구 등을 올리거나 내릴떼에는 근로자로 하여금 달줄, 달또는 조명 시설을 하는 때에는 그 방법터널 건설 작업시 낙반등의 위험 방지 조치 사항1. 터널 지보공 2. 록볼트 설치 3. 부석 제거터널 지보공의 설치시 수시 점검사항1. 부재의 손상 변형 부식 변위 및 탈락의 유무와 상태2. 부재의 긴압의 정도3. 부재의 접속부 및 교차부의 상태4. 기둥 침하의 유무 및 상태채석 작업 계획서 포함사항1. 암석의 분할 방법2. 암석의 가공 장소3. 토석 또는 암석의 적재 및 운반 방법과 운반 경로4. 갱 내에서의 낙반 및 붕괴 방지의 방법5. 발파 방법잠함 또는 우물통 수직갱 기타 이와 유사한 장소에서 작업시 준수해야할 사항1. 산소결핍의 우려가 있는 때에는 산소의 농도를 측정하는 자를 지명하여 측정하도록 할 것2. 근로자가 안전하게 승강하기 위한 설비를 설치 할 것3. 굴착 깊이가 20m를 초과 하는 때에는 당해 작업 장소와 외부와의 연락을 위한 통신 설비등을 설치 할 것가설도로 설치시 준수사항1. 차량의 속도 제한 표지 부착 할것2. 견고하게 설치할것3. 배수를 위해 경사지게 하거나 배수시설을 설치 할것4. 도로와 작업장이 접할 경우 방책등을 설치 할것높이3m 이상인 장소에서 물체 투하시 위험방지 조치 : 투하 설비 설치 및 감시인 배치작업으로 인하여 물체가 떨어지거나 날아올 위험이 있는 때에 위험 방지 조치1. 낙하물 방지망 설치 2. 방호선반의 설치3. 출입금지구역의 설정 4. 보호구의 착용 5. 수직 보호망 설치낙하물 방지망 또는 방호 선반 설치시 준수사항1. 설치 높이는 10m 이내마다 설치하고 내민 길이는 벽면으로부터 2m이상으로 할 것2. 수평면과의 각도는 20에서30도 를 유지할것법상 철골 작업을 하는 때에 작업을 중지시켜야 되는 경우풍속 10m/s 강우량 1mm/h 강설량 1cm/h해체작업시 작업계획서 포함 사항1. 사업장내 연락방법2. 해체물의 처분계획3. 행체작업용 기계, 기구 등의 작업계획서4. 해체작업용 화약류 등의 사용 계획서5. 해체의 방법 및 해체 순서 도면중량물 취급시 작업계획서에 포함해야 할