Polar lipid extraction & TLC

소개

Polar lipid extraction & TLC 실험 결과레포트입니다.

목차

1. 제목
2. 실험날짜
3. 이름
4. 실험목적
5. 실험재료
6. 실험방법
7. 실험결과
8. 고찰
9. 참고문헌

본문내용

<Polar lipids Ⅰ>
① 15㎖ conical tube1에 methanol-water 2㎖ adding & loop으로 균 긁어서 풀어줌
② 15㎖ conical tube1에 petroleum ether 2㎖ adding & vortexing & rotate 20min
③ Cfg 10,000rpm, 4min (tube 무게가 다르면 petroleum ether로 balancing)
④ 3개의 층이 형성되면 맨 위층을 pipette로 여유 있게 제거
⑤ Petroleum ether 1㎖ adding & vortexing & 15min rotate
⑥ Cfg 10,000rpm, 7min (Cfg 동안 물 boiling) (petroleum ether로 balancing)
⑦ 맨 위층을 pipette으로 제거 (최대한 제거해야 끓일 때 넘치지 않음)
⑧ 제거 후 loop 끝 needle로 벽에 붙은 균을 긁어준 후 섞어줌 & vortexing
⑨ 끓는 물에 lipid residue (second layer + pellet)를 5min boiling
뚜껑 오픈 시 콜라 김 빼듯이 천천히 오픈
⑩ 흐르는 물에서 37℃ 정도로 식혀줌
⑪ 15㎖ conical tube1에 CHCl3 + MtOH + 3dH2O 용액 2.3ml adding
⑫ Loop 끝 needle로 벽에 붙은 균을 긁어준 후 섞어줌 & vortexing
균 용액이 찰랑거리지 않는다면 CHCl3 + MtOH + 3dH2O 용액 1ml adding
⑬ 15㎖ conical tube1 뚜껑을 뚜껑 닫는 방향으로 wrapping & 1hr ~ 1hr 30min rotate
⑭ 새로운 15㎖ conical tube에 옮겨 담아서 진행 (장기간 rotate로 tube 끝이 휘기 때문)
⑮ Wrap을 벗기고 cfg 10,000rpm, 7min (petroleum ether로 balancing)
⑯ 층이 3개가 나왔는지 확인하고 supernatant를 새 conical tube에 옮겨줌

참고자료

· Brock의 미생물학 12판, 오계현, 바이오사이언스, 2011, p 95, 169~171
· 임상 미생물학 실습, 전국임상병리학과교수 협의회, 고려의학, 2010, P 178, 179
· 생명 생물의 과학 9판, 강해묵, 라이프사이언스, 2012, p 32
· 일반화학실험, 동국대학교화학과 화학실험실, 녹문당, 2016, p 91~94