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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(RNA inteference를 사용한 유전자 억제 발현 시험)2025.01.231. Transformation Transformation은 분자생물학적 현상으로 박테리아 사이에서 외래 DNA 분자를 수평으로 전달하여 세포에 도입시켜 유전자가 재조합되는 현상이다. 실험실에서는 외부 DNA segment를 세포에 삽입하여 원하는 타겟 형질을 발현시키는 방법으로 사용하며, 최근에는 비세균성 세포인 animal/plant cell에 새로운 유전자를 삽입하는 경우까지 포함한다. 형질전환은 자연 상태에서도 일어나고 실험실에서도 유도할 수 있는데, 자연계에서는 starvation이나 cell density와 같은 조건에서...2025.01.23
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호르몬 작용의 메커니즘2025.05.111. 호르몬 작용 메커니즘 호르몬은 표적세포의 수용체 분자에 결합하여 세포기능을 조절한다. 호르몬은 대부분 펩타이드 또는 지질의 두 가지 범주 중 한 가지에 속한다. 표적 세포는 펩타이드 또는 지질로 된 호르몬에 어떻게 반응하는지 설명하고 있다. 수용성 호르몬인 펩타이드 호르몬은 표적 세포의 표면에 있는 수용체에 붙은 후 2차 전달자라는 매개체를 통해 세포질에서의 반응을 촉진한다. 지용성 호르몬인 스테로이드와 갑상샘 호르몬은 원형질막을 통과한 뒤 핵이나 세포질에 존재하는 내부의 수용체와 결합한다. 호르몬의 결합은 수용체를 활성화하고...2025.05.11
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[예방약학실험8] Luciferase assay2025.05.101. Luciferase assay Luciferase assay는 NF-κB promoter와 luciferase reporter gene을 포함하는 plasmid를 HEK293 세포에 transfection하여 luciferase 발현을 통해 염증반응 조절에 중요한 유전자 발현을 확인하는 실험입니다. NF-κB는 염증반응 관련 유전자의 신호전달에 관여하는 전사인자로서 염증반응의 지표로 활용됩니다. 실험 결과, PMA는 염증을 유발하고 추출물 A는 항염증 효과가 있음을 확인할 수 있었습니다. GFP로 normalization을 하...2025.05.10
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겔 전기영동 (agarose gel electrophoresis) 실험 리포트2025.01.141. Agarose gel electrophoresis Agarose gel electrophoresis은 크기에 따라 핵산(DNA 또는 RNA) 조각을 분리하는 데 사용되는 전기영동 종류이다. 음전하를 띤 DNA/RNA는 전류가 가해질 때 agarose gel의 기공을 통해 gel의 양전하 말단으로 이동하고 이때 더 작은 조각이 더 빠르게 이동한다. 결과 밴드는 자외선(UV)을 사용하여 시각화할 수 있다. 2. Taq polymerase Taq polymerase는 호열성 박테리아인 Thermus aquaticus에서 추출한 열 ...2025.01.14
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Barr body 관찰 및 PTC 미맹 테스트2025.01.041. Barr body 관찰 이번 실험에서는 구강상피세포를 채취하여 aceto-orcein 시약으로 염색한 후 광학현미경으로 관찰하여 Barr body의 구조와 특성을 확인했습니다. Barr body는 핵 내에서 핵막에 붙어 있는 응축된 X염색체로, 여성의 체세포에서 한 개의 X염색체가 불활성화되어 나타나는 현상입니다. 실험 결과 대부분의 세포에서 Barr body가 관찰되었으며, 일부 세포에서는 2개 이상의 Barr body가 관찰되기도 했습니다. 이는 세포 분열 과정에서의 이상으로 인한 것으로 추정됩니다. 2. PTC 미맹 테스...2025.01.04
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원핵세포와 진핵세포의 차이점2025.01.061. 원핵세포 원핵세포는 단세포 생물로 약 35억년 전 지구상에 출현한 최초의 세포입니다. 원핵세포는 세포막, 세포질, 리보솜, DNA로 구성되어 있으며, 당질피질, 세포벽, 섬모, 편모, 플라스미드, 봉입, 내생포자와 같은 부속구조를 가지고 있습니다. 원핵세포는 DNA가 세포질 내 뉴클레오이드에 있고 히스톤 단백질과 결합되어 있지 않으며, 구획화가 되어 있지 않아 무작위적인 분자운동을 합니다. 원핵세포는 세포분열 시 이분법이나 단순분열을 하며, 리보솜이 진핵세포보다 약간 작고 다른 RNA와 단백질로 구성되어 있습니다. 2. 진핵세...2025.01.06
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생물공정실험 예비보고서_RNA Extraction and Quantification2025.01.071. 유전자 발현과 조절 유전자 발현 경로는 전사와 번역으로 나뉘며, 전사 개시, 전사 후 가공, 번역 단계에서 조절될 수 있다. 전사 활성은 크로마틴 구조 변화, 전사인자 결합 등으로 조절되며, 전사 후에는 mRNA 가공, 번역에서는 mRNA 사용 속도 조절 등으로 이루어진다. 2. TRIzol을 이용한 RNA 추출 TRIzol 시약은 페놀-구아니딘 이소티오시아네이트로 구성되어 세포막을 파괴하고 RNase를 억제하여 RNA를 선택적으로 추출할 수 있다. 세포 용해액을 원심분리하면 RNA가 수용층에 존재하게 되며, 이후 isopro...2025.01.07
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RT-PCR 실험 및 결과 분석2025.05.101. RT-PCR RT-PCR은 RNA를 추출하고 cDNA를 합성하여 PCR로 증폭하는 기술입니다. 이 실험에서는 Labozol을 이용한 RNA 추출, cDNA 합성, GAPDH와 Twist1 유전자의 RT-PCR 증폭을 진행했습니다. RNA 추출 과정에서 chloroform으로 수용성층과 지용성층을 분리하고, isopropanol로 RNA를 침전시켰습니다. 이후 ethanol로 세척하고 DEPC 처리된 물에 재용해하여 RNA 농도와 순도를 확인했습니다. RT-PCR 결과 GAPDH는 일정한 발현을 보였고, Twist1은 chemi...2025.05.10
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Bacterial Transformation 레포트2025.01.211. Transformation Transformation은 특정 DNA 조각을 생명체의 유전체 내로 삽입하여 새로운 genotype이 발현되도록 하는 방법이다. 박테리아에 plasmid를 통해 gene을 도입하는 기술로 알려져 있지만, 동물이나 식물에서도 transformation 기술이 개발되어 유전자 변형 생물(GMO)을 만드는 기술로 이용되고 있다. Bacterial plasmid는 restriction enzyme이 작용하는 multicloning site와 Selectable Marker로 사용하기 위한 antibioti...2025.01.21
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RNA와 식물 RNA 중합효소2025.01.141. RNA의 구조적 특징 RNA는 DNA와 구조적으로 다른 점이 있는데, 리보오스 탄소 2'에 수산화기가 존재하고 티민 대신 유라실을 이용하는 등의 차이가 있다. 또한 RNA는 단백질과 같이 접힘을 통해 3차원 구조를 형성할 수 있다. 2. RNA의 종류 RNA에는 mRNA, tRNA, rRNA 등 다양한 종류가 있다. mRNA는 DNA의 유전정보를 리보솜에 전달하여 단백질 합성을 돕고, tRNA와 rRNA는 단백질 번역에 관여한다. 또한 miRNA, lncRNA 등 유전자 발현을 조절하는 비번역 RNA도 존재한다. 3. RNA ...2025.01.14
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