
RT-PCR 실험 및 결과 분석
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[예방약학실험6] RT-PCR
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2023.06.23
문서 내 토픽
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1. RT-PCRRT-PCR은 RNA를 추출하고 cDNA를 합성하여 PCR로 증폭하는 기술입니다. 이 실험에서는 Labozol을 이용한 RNA 추출, cDNA 합성, GAPDH와 Twist1 유전자의 RT-PCR 증폭을 진행했습니다. RNA 추출 과정에서 chloroform으로 수용성층과 지용성층을 분리하고, isopropanol로 RNA를 침전시켰습니다. 이후 ethanol로 세척하고 DEPC 처리된 물에 재용해하여 RNA 농도와 순도를 확인했습니다. RT-PCR 결과 GAPDH는 일정한 발현을 보였고, Twist1은 chemical A 농도 의존적으로 발현이 증가했습니다. 이를 통해 chemical A가 암 전이 관련 유전자 Twist1의 발현을 유도할 수 있음을 확인했습니다.
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1. RT-PCRRT-PCR(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction)은 COVID-19 진단에 가장 널리 사용되는 검사 방법입니다. RT-PCR은 SARS-CoV-2 바이러스의 유전자를 증폭하여 감염 여부를 확인하는 방식으로, 높은 정확성과 민감도를 가지고 있습니다. 이 검사법은 초기 감염 단계에서도 바이러스를 검출할 수 있어 COVID-19 확진 진단에 매우 유용합니다. 또한 RT-PCR은 무증상 감염자 발견에도 효과적이며, 감염 경로 추적에도 활용됩니다. 하지만 검체 채취와 검사 과정이 복잡하고 시간이 오래 걸리는 단점이 있습니다. 또한 검사 시약과 장비의 가용성에 따라 검사 역량이 제한될 수 있습니다. 따라서 RT-PCR 외에도 신속항원검사, 항체검사 등 다양한 진단 방법을 함께 활용하여 COVID-19 대응에 활용할 필요가 있습니다.
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식품 생화학 실험 real time qPCR과정과 결과값1. GAPDH GAPDH 유전자는 glyceraldehyde-3-phosphate 탈수소효소 단백질 계열의 구성원을 암호화한다. 암호화된 단백질은 기계적으로 구별되는 능력을 기반으로 월광 단백질로 확인되었다. 이 유전자의 산물은 무기 인산염과 nicotinamide adenine dinucleotide (NAD)의 존재 하에서 glyceraldehyde-...2025.01.14 · 자연과학
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식물분자생물학실험 Real-time PCR (Quantitative RT-PCR) 결과보고서1. RT-PCR RT-PCR은 RNA 서열을 DNA로 역전사하여 PCR을 통해 증폭하는 기술이다. 이는 RNA 기반 생명체의 유전자 발현 분석에 활용되며, COVID-19 팬데믹 당시 SARS-CoV-2 바이러스 검출에 중요하게 사용되었다. 2. Quantitative RT-PCR Quantitative RT-PCR은 유전자 발현량을 정량화하는 기술로, ...2025.01.18 · 자연과학
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생물공정실험 결과보고서 - Gene Expression Analysis by RT-PCR1. Reverse Transcription PCR (RT-PCR) 이 실험의 목적은 reverse transcription PCR을 통해 얻은 cDNA 샘플을 real-time PCR로 증폭시키는 것입니다. 다양한 시약을 사용하여 cancer cell과 ADSC cell의 유전자 발현, 특히 housekeeping gene인 GAPDH와 target ge...2025.01.04 · 의학/약학
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구강상피로부터 유전자의 추출 (HKG 이용 PCR & 전기영동) 실험 보고서1. PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR은 DNA를 증폭하는 기술로, 3단계(Denaturation, Annealing, Extension)로 구성되어 있다. Denaturation 단계에서는 dsDNA가 ssDNA로 분리되고, Annealing 단계에서는 Primer가 ssDNA에 결합한다. Extension 단계에서는 Taq...2025.05.14 · 자연과학
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Real-time PCR을 이용한 유전자 발현 분석1. 전사(Transcription) 수준에서의 유전자 발현 분석 기법들 유전자 발현 분석 기법에는 Single gene analysis와 Whole genome analysis가 있다. Single gene analysis는 개별 유전자의 발현량을 확인하는 실험 기법으로 Northern Blotting과 Real-time PCR이 있다. Whole gen...2025.01.23 · 의학/약학
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[생화학실험] RT-PCR을 통한 간암 세포주에 대한 약물 효능 평가1. RT-PCR RT-PCR은 역전사 반응과 PCR 반응을 이용하여 원하는 주형 mRNA의 상보적 염기쌍인 cDNA를 합성, 증폭시키는 분자생물학적 기술이다. 본 실험에서는 RT-PCR을 통해 간암 세포주 HepG2 cell에 처리한 Salsolinol이 Cyclin D1 경로에서 암세포 사멸에 유의미한 결과를 보이는지 관찰하였다. 2. Cyclin D1...2025.01.29 · 의학/약학
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wound healing assay, RT-PCR 교차검증 10페이지
약품 생화학 실습 리포트약품 생화학 실습 리포트과목명 약품 생화학실습담당 교수님제출일실험제목: wound healing assay, RT-PCR 교차검증1. 실험 목적암세포의 일종인 시료를 이용하여 Wound healing assay를 진행하고 이때, 적절한 환경을 조성하여 용액 A와 B가 해당 암세포의 증식을 통한 집단 세포이동에 미치는 영향을 알아본다. 또한, RT-PCR을 이용하여 용액 A와 B가 암세포인 해당 시료를 억제하는 경우가 발생할 시, Housekeeping gene인 GAPDH와 암세포의 이탈을 가능하게 해주는 M...2022.03.03· 10페이지 -
RT-PCR - 예비실험보고서 7페이지
실험 제목RT-PCR실험 목적지난주에 isolation 했던 RNA를 이용하여 cDNA를 만드는 역전사 과정을 수행하여 원하는 target의 양을 PCR로 확인한다.실험 원리RT-PCRDNA 에서는 exon과 intron이 있으므로 DNA를 template로 하는 경우에는 exon과 intron이 모두 증폭될 수 있다. 하지만 intron은 exon에 비해서 매우 크기 때문에 exon 중에 몇 개를 한꺼번에 증폭하려면 DNA로는 힘들다. 더구나 intron sequence는 일부를 제외하고는 중요성이 떨어진다고 인식되어 밝히지 않은...2022.06.13· 7페이지 -
바이러스학 실험 결과보고서 RT-PCR 4페이지
바이러스학 실험 1. Title : RT-PCR2. Objective : poliovirus의 RNA를 RT-PCR을 이용해 cDNA로 만든 뒤, PCR을 이용해 증폭시킨 후 전기 영동하여 크기를 관찰한다.3. Principle : poliovirus의 RNA에 특이적으로 결합하는 프라이머를 이용하여 poliovirus의 cDNA만을 만들 수 있으며 전기영동으로 밴드를 관찰한다.4. Method1) RT-PCR : cDNA생성RT-PCR은 혼합시킨 premix를 사용. premix에는 taq pol, dNTP, PCR 최적의 buf...2021.02.24· 4페이지 -
[분자생물학실험]Quantitative Real Time Polymerase Chain Reaction(qRT-PCR) 3페이지
Quantitative Real Time Polymerase Chain Reaction(qRT-PCR)1. 실험 목적가. 추출된 RNA로 합성한 cDNA를 이용하여 RT-PCR을 진행하고, 특정 유전자의 mRNA 발현량을 비교하여 sample을 평가한다.2. 실험 이론 및 원리가. Housekeeping gene의 이용housekeeping gene이란 세포에서 높은 수준으로 항상 발현되어 유지되는, 세포 생명활동에 필수적인 기능을 수행하는 유전자의 총칭이다. 외부 자극에 의해 발현이 크게 변하지 않는 특성이 있으며 대표적으로 액틴...2021.11.18· 3페이지 -
식품 생화학 실험 real time qPCR과정과 결과값 4페이지
1. Title : RT-qPCR2. Date : 2023.05.313. Objective: 합성한 cDNA로 Real-time qPCR을 수행한다.4. Introduction(1) GADPHGAPDH 유전자는 glyceraldehyde-3-phosphate 탈수소효소 단백질 계열의 구성원을 암호화한다. 암호화된 단백질은 기계적으로 구별되는 능력을 기반으로 월광 단백질로 확인되었다. 이 유전자의 산물은 무기 인산염과 nicotinamide adenine dinucleotide (NAD)의 존재 하에서 glyceraldehyde- 3...2024.04.25· 4페이지