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재조합 플라스미드 DNA 클로닝 예비2025.05.011. 플라스미드 DNA 플라스미드는 주 염색체와 분리되어 있어 독자적으로 복제가 가능한 환형 DNA이다. 대부분은 세균에 존재하며 생존에 필수적이진 않지만 특정 상황에 유용한 유전자를 포함한다. 플라스미드는 클로닝 벡터로 많이 이용되며 재조합된 플라스미드를 세균에 유입 후 증식시켜 DNA양을 늘린다. 또는 발현벡터로 세포내의 전사,번역기구를 이용해 재조합 유전자를 발현시켜 단백질을 대량 생산시킬 때도 이용 가능하다. 2. 클로닝 생명공학에서 cloning은 세포나 DNA조각을 복제하는 과정이다. 목적DNA조각을 다량 생산하거나 DN...2025.05.01
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분자생물학 실험 (A+) DNA ligation and transformation 예비보고서2025.01.041. DNA ligation DNA ligation은 DNA 단편을 연결하는 과정으로, 제한효소로 절단된 DNA 단편을 연결하여 재조합 DNA를 만드는 데 사용됩니다. 이 과정에서 DNA ligase 효소가 사용되며, 이를 통해 DNA 단편의 인접한 3' 수산기와 5' 인산기 사이의 공유 결합이 형성됩니다. DNA ligation은 유전자 클로닝, 유전자 조작, 유전체 연구 등 다양한 분자생물학 실험에서 중요한 기술입니다. 2. DNA transformation DNA transformation은 외부 DNA를 세포 내로 도입하는 ...2025.01.04
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DNA Ligation & Transformation, Mini-scale preparation of plasmid DNA Restriction enzyme & Gel electrophoresis2025.01.181. DNA Ligation & Transformation 제한효소를 처리하여 얻어낸 insert DNA를 T4 DNA ligase를 이용하여 vector에 삽입한다. DNA strand의 5'에 존재하는 인산기와 3'에 존재하는 OH기 사이에 phosphodiester bond를 형성하여 ligation하고, ligation product를 competent cell에 형질전환한 다음 plate에 ampicillin resistance에 의해 생성된 colony를 selection한다. 2. Mini-scale preparatio...2025.01.18
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DNA ligation, Transformation, Mini-scale preparation of plasmid DNA2025.01.221. DNA ligation DNA ligation은 T4 DNA ligase 효소를 이용하여 DNA 말단을 phosphodiester 결합으로 연결하는 과정이다. 이 과정에서 vector와 insert의 ligation, vector의 self-ligation, insert의 self-ligation 등 세 가지 형태가 나타날 수 있다. 본 실험에서는 HindⅢ와 NdeⅠ로 double-digestion한 vector와 insert를 T4 DNA ligase로 ligation하였다. 2. Transformation ligation...2025.01.22
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DNA Ligation 실험 결과 및 이론 분석2025.11.141. DNA Ligation의 원리 및 과정 Ligation은 DNA나 RNA의 말단을 연결하는 과정으로, 재조합 DNA를 만들기 위해 Insert DNA 단편과 vector를 연결한다. 제한효소로 DNA를 자르면 상보적인 말단이 생성되며, ligase 효소가 수소결합을 더 강한 공유결합으로 전환하여 두 DNA 가닥을 연결한다. 제한효소는 가위 역할, ligase는 풀 역할을 수행한다. 2. Ligation에 영향을 미치는 요인 DNA 농도, ligase 농도, 온도, buffer 구성이 ligation 효율에 영향을 미친다. DN...2025.11.14