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[생명공학] RNA extraction, cDNA synthesis, qRT PCR2025.05.031. RNA extraction RNA를 분리하는 과정에서 가장먼저 첨가해주는 물질이 Trizol이다. Trizol은 phenol과 guanidinium thiocyanate라는 두가지 중요한 성분으로 이루어져있고 이들이 cell을 lysis하고 RNA를 안정화시키는 역할을 한다. 추가적으로 chloroform을 첨가하여 RNA와 다른 물질들을 분리한다. 2. cDNA synthesis cDNA 합성 과정에서는 reverse transcriptase 효소가 핵심적인 역할을 한다. 이 효소는 RNA를 DNA로 역전사하는 기능을 가지고...2025.05.03
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생화학 실험 보고서 - PCR2025.01.271. PCR(Polymerase Chain Reaction) PCR은 중합효소 연쇄반응으로, 열을 가하여 DNA의 특정 부분을 증폭시키는 기술이다. reverse transcription PCR은 mRNA에 대해 PCR을 적용하기 위한 방법으로, mRNA를 역전사시켜 cDNA를 합성하고 primer와 DNA polymerase를 이용해 DNA의 일부분을 복제, 증폭시킨다. PCR은 Denaturation, Annealing, Extension의 3단계로 진행되며, 주형 DNA, primer, dNTP, DNA polymerase가 ...2025.01.27
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RT-reaction & qPCR을 이용한 p21 단백질 발현 분석2025.11.171. 역전사 반응(RT-reaction)과 cDNA 합성 역전사효소는 RNA를 주형으로 하여 DNA를 합성하는 효소이며, 결과물인 cDNA는 mRNA의 상보적 DNA이다. cDNA는 전사 가능한 엑손 영역만 포함하고 인트론이 제거되어 있어 genomic DNA와 다르다. RT-reaction에서는 Random Hexamer, dNTPs, RNase inhibitor, Reverse transcriptase 등을 사용하여 mRNA로부터 cDNA를 합성한다. 이 기술은 cDNA 라이브러리 제작과 RT-PCR 등 분자생물학의 핵심 기술에...2025.11.17