응집반응(Agglutination reactions)1. 실험 목적항원과 항체의 결함 반응을 이용하여 많은 가검물을 손쉽고 빠른 시간 내에 검사한다.2. 실험의 원리항원-항체 반응은 항원이나 항체를 붙인 입자가 서로 엉기게 하는 반응으로 특이성을 추적하는 방법이다. 사용하는 입자는 세균 자체를 사용하는 경우도 있고, 정제된 항원을 적혈구나 라텍스 비드에 붙여 항체와 반응을 시켜 응집 반응을 시도할 수 있다.1)응집반응응집반응은 개개의 항원이 항체에 결합한 결과 형성된다. 항원으로 코팅한 라텍스 입자와 환자의 혈청과 응집은 환자의 혈청 속에 항체가 존재하고 있음을 의미한다 또한 항체가 덮인 라텍스 알갱이를 적은 양의 미생물 현탁액과 혼합 하므로써 미생물의 표면항원을 검출하는데 사용할 수 있다. 비록 다른 면역검사에비해 민감도가 떨어지기는 하지만 응집반응은 저비용과 높은 특이성 그리고 신속한 면역검사로서 임상 진단에 유용하다.2.충분한 크기의 세균이나 적혈구가 항체와 반응하여 응집하는 것을 말하며 이때 항원은 항체와 결합하는 많은 장소를 가져야한다 대부분의 응집항체는 IgM 종류가 많다. 이러한 응집반응은 slide 위에서 이루어질 수 있으며 환자의 혈청에서 항체를 증명하는 것으로서 Widal 반응을 들 수 있다. 세균 응집 반응은 이미 알고 있는 항체와 세균 부유액을 slide위에서 섞어 본다. 이 때 세균 부유액은 너무 진하지 않도록 한다. 반드시 식염수 대조용액을 같이 시행하여 비특이적인 응집인지를 확인해야 한다. Latex입자를 이용한 latex응집반응이 있고, coagglutination은 latex와 비슷하나 latex대신 Staphylococcus항체를 운반체로 사용하였다.많은 S.aureus는 표면에 protein A를 가지는데, 이것은 항체의 Fc부분과 결합하고 Fab부분은 유리된 채로 남아 있다. 항체가 해당하는 항원과 만나게 되면 Staphylococcus의 응집이 생긴다.Hemagglutination (HAT)은 적혈구가 해당하는 항체와 만나면 응집한다. 직접혈구응집법은 항원이 적혈구막 자체에 있는 경우, 적혈구가 다른 항원으로 감작되었을 때는 간접 혈구반응이라고 하며, 예로서 Treponema pallidum hemagglutinaion (TPHA)검사 등이 있다.여러 가지 바이러스에는 적혈구 응집소가 있다. 항체가 있는 환자의 혈청과 바이러스를 혼합하면 바이러스 입자의 응집소는 혈청 내 항체와 결합하여 불활화 되고 적혈구의 수용체와는 결합할 수 없다. 이런 반응을 적혈구 응집 억제시험(hemagglutination inhibition test)이라고 한다.2)침강반응항체분자들은 일반적으로 2개의 결합위치를 가지므로 각각의 위치에서 독립적인 항원분자들과 결합할 수 있다. 만약 항원 역시 1개 이상 항원 결정기를 가지고 있을 경우 항원-항체분자들이 엉켜 모인 침강물이 생길 수 있는데 이를 침강반응이라 한다.이들 침강물은 시험관내에서도 쉽게 관찰되므로 침강반응은 혈청학 실험에서, 특히 항체농도의 정량적 측정에 있어서 매우 유용하다. 침강반응은 두 반응 물질간에 최적의 비율이 존재할 때 최대로 일어나는데 어느쪽이든 과량으로 존재하면 커다란 항원-항체간에 군집형성이 불가능하기 때문이다.3)추백리1.정의어린 병아리에서 높은 폐사율과 백색의 설사를 특징으로하는 소화기계의 전염병으로 성계에서는 임상증상 없이 보균계가 되거나 난소에 병변이 형성되어 산란저하를 나타내며 또한 계란을 통하여 후대 병아리에 균을 전염시키는 난계대 전염병의 대표적인 질병으로서 종계 및 부화위생이 중요하게 취급되는 법정전염병이다.2.발생현황1900년대 전세계적으로 발생하여 큰 피해를 주었으며 유럽이나 미국등 선진국에서는 이미 박멸되었으나 남미,아프리카,중동 및 동남아등지에서는 아직도 빈발하고 있다. 우리나라에서는 1925년 Konno에 의해서 처음 발생이 확인되었으며, 1960년대에 피해가 많았으나 그 이후 국가적인 정책차원에서 검색에 의한 양성계를 도태시킴으로써 70년 및 80년대에는 그 발생이 미미하였다. 그러나 1990년대에 들어오면서 다시 발생이 크게 증가하고 있는 실정이다.3.증상어린 병아리의 백색설사와 높은 폐사가 특징이며 난계대에 의한 감염의 경우 부화율이 크게 떨어지고 부화된 병아리는 허약하며 부화직후 폐사되는 수가 많다. 이환율과 폐사율은 일령, 품종 및 사용한 약제, 감염정도에 따라 다양하며 백색설사증 이외도 호흡기증상, 절룩거림이나 신경증상도 나타날 수 있다.일반적으로 성계에서는 준임상형으로 내과하나, 난소에 침입하여 산란율과 부화율을 떨어뜨린다.4.진단시험관내 응집반응(Tube agglutination test)맥파랜드 스케일(MacFarland nephelometer scale) 0.75∼1.00에 해당하는 농도의 균부유액을 항원으로 사용한다.시험방법은 항원 1㏄에 1:25로 희석된 가검혈청 1.0㏄를 혼합하고 37℃에서 20시간 작용시킨다.혈청 희석도 1:25 또는 그 이상에서 응집반응이 있으면 양성으로 판정한다.혈액평판응집반응(Stained-antigen, whole-blood plate agglutination test)일종의 급속평판응집반응(Rapid plate agglutination test).진단액(Diagnostic antigen)은 Crystal-violet으로 염색된 추백리균의 부유액.진단액을 만들기 위한 추백리균은 교질-유황배지(Colloidal-sulfur medium) 일명 K배지에서 배양하며 K배지에 배양하여 만든 항원(Antigen)을 K항원(K antigen)이라고 칭한다.시험방법은 가검혈액 0.02㏄에 진단액 0.05㏄를 혼합한다.1 분 안에 응집반응이 일어나면 양성 2 분내에 일어나면 의양성으로 판정한다5.예방어미닭으로부터 난계대전염이 중요하므로 전염경로를 차단하는 것이 효과적이다.혈증항체가 출현하는 40-70일령부터 종란 채취전까지 종계를 검사하여 양성계를 검색 도태하는 것이 유효하다.어미닭의 뱃속에서 난황속으로 추백리균이 이행되어 감염되는 경우와 난각에 오염되어 난각을 뚫고 감염되는 경우가 있으므로 종란소독을 철저히 하여야 한다. 분변이나 오염된 기구에 추백리균이 오랫동안 생존하므로 사육환경 및 계사의 철저한 소독으로 전염을 막고, 기타 야생조류 및 쥐의 침입을 막아야한다.6.치료항생제나 설파제를 치료하기 위하여 투약해도 추백리균이 보균계의 난소에 잠입하고 있으므로 균을 완전히 제거할 수 없다. 즉, 근본적인 치료는 안되 므로 혈청반응에 의하여 보균계를 철저히 도태하여야 한다.항생제 타이로프러스, 지마이신콤비, 에리·콜리, 엔로틸수용액,겐타마이신 주사, 닥터진 수용액생균제 디·에스 클리너,아비락-ABS소독제 부롬·셉트(축체소독, 음수소독) 브롬가드(출입구,발판, 계분야적장, 계사주변소독)가이드킬(축사내외부,축체,축산기구,차량소독3)가금티프스(Fowl Typhoid)패혈증을 일으키는 닭과 칠면조의 급, 만성전염병이다. 병아리에서는 추백리와 증상이 유사하며 성계에서는 패혈증을 주증으로 하고 있는 소화기전염병으로서 난계대전염을 한다.1.원인체Salmonella gallinarum이고 혈청학적으로 추백리균의 표준형과 구분이 불가능하므로 혈청검사만으로는 추백리와 티푸스의 구별은 불가능하다. 따라서 균을 분리하여 여러 가지 생화학검사를 실시하여야 한다. 열에 대한 저항성이 약하고 일반 소독제에도 쉽게 사멸한다.2. 발생상황1900년대 초기에 전세계적으로 발생하여 가금산업에 막대한 손실을 주었다. 국내에서의 발생은 1992년 처음 보고 되었고 1994년 이후 전국적으로 발병하여 최근 양계농가에 막대한 경제적 손실을 주고 있다. 백색계보다 갈색계에서 발병률이 더 높아 갈색계가 주종을 이루는 우리나라에서는 그 피해가 크다.
간줄기세포의 동정과 증식개요간의 거대한 재생능력이 알려졌다해도 간의 재생역할에 대한 기작에 대해서는 거의 알려지지 않았다.간줄기세포 존재의 근거를 제공하기위해서 FACS나 단일세포근원검사법을 사용하여 세포의 다계통분화능력 그리고 자기재생능력을 예견적으로 확인할수있다.원시줄기세포가 보존되는 기간의 자손들처럼 이들 세포들은 간세포나 담즙세포가 계속적으로 생산되는 배지에서 무성번식적의 증식한다. 이들 세포가 마우스에 이식되어 큰론원성으로 증대되어 갈때 그들은 형태학적으로나 기능적으로 간세포나 담관세포에서 분화되어간다그러므로 이들 세포는 십이지장이나 췌장에서 이식된 췌장 관상세포나 장 상피세포로 분화되어진다간 줄기세포의 자기재생 조작법은 소화기계의 질병에 새로운 치료법으로 제공될 수 있다성숙조직에서 체강 줄기세포의 존재줄기세포는 일반적으로 자기재생능력과 다가계분화능력을 가진 클론원서성 세포로 정의할 수 있다출생후 각 줄기세포들은 그 자손에게 항상성적이나 재생적인 신호들에 반응하여 기여할 수 있는 조직에서 보존, 수선, 복원등의 중심적 역할을 한다이들의 특이한 속성 때문에 줄기세포는 쇄약한 조직의 치료로서 이식이나 인공장기 보다 더 새롭고 흥미로운 복원사용능력을 가진다그리고 최근의 연구에서 자기재생능력이나 다능력의 줄기세포가 심지어 절대 재생을 고려할 수 없는 신경조직에서 발견 되어지고있다이러한 일련의 연구결과는 이종간의 장기이식의 문제점들을 해결하는 데 중요한 역활을 기대할 수 있다줄기세포를 치료법으로 사용하기 위해서는 우선 그들이 어떠한 방식으로 증식, 분화해 가는지 그리고 휴지기의 생물학적 특성, 수명에 대한 이해가 필수적이다그러나 줄기세포는 매우 희귀하고 매우 많은 형식과 매우 많은 다른 계통을 가졌기에 연구하기에 너무나 어렵다혈구 계산적 유입의 세포분류에 의한 조혈세포의 정제는 혈액계의 전체적인 재생능력을 평가할 수 있다단일 조혈세포의 이식은 실험관이나 생체내에서 자신의 세포형식의 자기재생능력분화적인 소집단을 생산가능하는 세포로 분명히 증명하였다이러 사실들로 줄기세포의 생물학적 발전 을 위해 장래의 동정에 비평적으로 요구될 수 있을 것이다성숙 그리고 발달중인 간에서 줄기세포부분적인 절개나 화학적 상해로 인한 간의 거대한 재생능력은 잘 알려져 있다. 이는 간 줄기세포가 간의 재생 과 분화, 증식에 기여하는것을 간주할 수 있다Overturfets는 전제적인 간세포의 분화기전에 간세포이식의 분화능력과 복원능력을 증명하였다간의 증식과정의 가장 중요한 이해는 전체적인 간세포의 분화과정의 자기 성장능력과 줄기세포가 간 재생에 요구되지 않는다는 것이다 간 발생과정에서 간세포와 담낭세포는 간모세포에서 공통적인 간분화요소로서 보고되었다Sigal은 첫째로 panning을 통해서 간줄기세포와 원종세포간에 선별을 시도하였다최근에는 FACS(형광활성세포분류)그리고 실험관내 클론 분석으로 이능성 간원 종세포를 배양 , 분리 할 수 있다Crosby는 역시 간줄기세포와 비슷한 세포로 배양한 집단에서 인간의 간세포를 분리할 수 있는 방법을 보고하였다정확한 간세포의 분리를 위해서는 가능성 있는 줄기세포의 선별 ,정밀한 특징적 사용법 실험관내나 생체내의 클론 분석법 등의 비판적요구가 필요하다자기 재생적 다능력의 간줄기세포의 정제와 증식태아의 간에서 간줄기세포의 정제와 증식의 전략1.ED13.5 태생기의 쥐2.태생기 간세포간 줄기세포 ,원종세포 ,분화된세포 , 조혈계통줄기세포3.FACS(형광활성세포분류)에 의한 세포분류c-Met+ CD49f+/low c-kit-CD45-TER119 세포4.단일세포배양줄기세포(H-CFU-C,간 집락형성 단위)는 계통표시자발현, 알부민과 시토케라틴119의 포함에 음성이다5.집락형성높은 증식환경다계통의 분화6.줄기세포의 복제성 증식높은 증식환경다계통의 분화자기재생능력의 세포분화생체나 실험관에서의 간조직 복원자기재생적 간줄기세포는 발달중인 간의 희귀한 집단을 구성한다c-Met+ CD49f+/low c-kit-CD45-TER119 세포는 발달되는 간에서 상대적으로 느린 주기의 세포집락을 포함한다 분류된세포는 propidium iodide 그리고 FACS에의한 분석으로 다룰 수 있다c-Met+ CD49f+/low c-kit-CD45-TER119세포는 아무런 통로가 없는 세포나 발달된간에서의 다른 소집락보다 좀거 느리게 증식한다전체적인 자료를 통해서 조혈모세포와 유사하게 ,유사분열 휴지기의 간 줄기세포는 발달하는간에서 매우 희귀한 집락을 보여주는 것을 분명히 증명할 수 있다우리의 data는 H-CFU-C는 이능선 간원종세포,다르며 또 여러가계의 표시자들이 발달된간에서 매우넓은 점유를나타내어 H-CFU-C와는다른 모습을 나타낸다내배엽유래의 조직간의 적응성
항생제 감수성 검사1.실험목적사람 도는 동물의 질병의 원인이 되는 세균의 항생제 감수성 검사를 실시하여 가장 효과 적인 항생제 선택할 수 있는 방법을 익힌다2. 실험의 원리항생제에 대한 감수성.세균은 어떤 항생제에 대하여는 처음부터 내성을 지니기도 하고 감수성이던 세균이 내성을 획득하기도 한다. 획득된 내성 에 대하여는 감수성 검사를 하기 전에는 알 수가 없어 치료에 지장을 준 다. 감수성 검사에는 디스크 확산법(disk-diffusion test)과 희석법 (dilution test)이 있는데, 디스크 확산법은 감수성, 중등도 감수성, 내성 등의 항균력의 여부만 알수 있으며, 희석법은 최저저지농도(minimal inhibitory concentration, MIC)와 최저살균농도(minimal bactericidal concentration, MBC)를 알 수 있다. 디스크 확산법은 간단하여 임상에서 많이 사용되나, 심내막염 등의 중증감염에서는 희석법으로 MIC,MBC 등을 아는 것이 도움이 된다.감수성(Susceptible)- 일반적으로 그 균종의 감염에 추천되는 항균제를 보통 용량 투여했을 때 치료될 수 있을 것임을 뜻한다.중간(Intermediate)- 기술적인 오차발생으로 인하여 결과를 잘못 판단하는 일이 없도록 완충구역을 만든 것이다. 검사한 약제들 중에서 감수성을 보인 항균제가 있으면 그 약제를 사용하고 중간으로 보고된 항균제는 사용하지 않는다. 감수성인 약제가 없는 경우에는 중간인 항균제의 최소억제농도를 측정한 후 사용한다.내성(Resistant)- 일반적으로 그 균종 감염에 권장되는 항균제를 보통 용량을 투여해서는 치료되지 않을 것임을 뜻한다.디스크 확산법디스크 확산법은 검사에 사용되는 배지와 시약 등이 제조회사마다 다르고 같은 회사의 제품이라도 lot에 따라 다소의 차이가 있을 뿐 아니라 시험과정이 수작업에 의존할 수밖에 없어서 검체채취부터 결과판독까지의 전과정에 걸쳐 표준화된 방법의 적용과 이에 대한 정도관리가 이루어져야 하며 최종적인 디스크 확산법의 정도관리는 표준균주 억제대가 허용범위에 드는 가를 측정함으로써 이루어진다. 디스크 확산법의 종류는 나라와 지역에 따라 다르나 가장 널리 이용하는 것은 NCCLS에서 권장하는 방법이다.항균제 디스크직경이 6 mm인 종이 디스크에 항균제가 함유되어 있다. 디스크의 항균제 함량은 NCCLS에서 추천한 것을 사용하며 여러 회사의 상품화된 제품이 있다. 항균제 디스크 보관통은 8℃이하에 보관하거나 -14℃이하로 얼려 보관한다. β-lactam 항균제 디스크는 온도가 일정하게 유지되는 냉동고에 보관한다. 1주일내에 사용하는 항균제 디스크는 냉장보관할 수 있다. 새로 디스크 보관통을 꺼낼 때에는 사용하기 한두 시간 전에 실온에 꺼내어 응축(凝縮)을 방지한다. 디스크 보관통을 개봉한 후에는 건조자기(Desiccator)에 넣어 보관한다. 건조자기는 사용전에 실온에 꺼내 놓고 유효기간이 지난 디스크는 폐기한다. 개봉한 후 사용하지 않는 항균제 디스크는 냉장 보관한다. 장구균의 gentamicin 고도내성을 시험하는 120 μg의 gentamicin 디스크는 자가제조하거나 상품화된 제품을 사용할 수 있으며 시험할 때마다 또는 Lot. No.가 바꿔거나 새로 제조할 때 ATCC 29212 Enterococcus faecalis로 정도관리를 시행한 후 허용범위를 만족할 때 사용한다.Escherichia coli항원구조에 의해 구별하면, O항원에서 1∼136, K항원에서 1∼78, H항원에서 1∼40으로 분류된다. 대장균은 장 속에서는 병원성을 나타내지 않는 것이 보통이지만, 장 이외의 부위에 들어가면 방광염 ·신우염 ·복막염 ·패혈증 등을 일으키고, 또한 장 속에서도 O의 26, O의 55, O의 111 등과 같은 항원형 대장균은 젖먹이에서 성인에 이르기까지 전염성 설사를 일으키는 경우가 있으므로 특히 병원성대장균이라고 한다. 대장균은 열에 대한 저항성이 약하여 60℃에서 약 20분간 가열하면 멸균된다. 그러므로 여름철에 물을 끓여 마시면 설사를 예방할 수 있다. 대장균은 양쪽 끝이 둥글고 길이 2∼4μm, 나비 0.4∼0.7μm의 간균으로 편모를 가지고 있어 운동성이 있다. 포자를 만들지 않으며, 그람음성균이다. 형태학적으로 적리균과 구별하기 어렵지만, 생물학적으로 대장균은 젖당 및 포도당을 분해하여 산과 가스를 생성시키고 우유를 응고시켜 인돌(indole)을 만든다. 또한, 대장균의 존재 여부는 분변에 의한 오염 유무가 지표가 되며, 수질검사 등에 종종 응용되는 수단으로 위생학상 중요하다.Salmonella살모넬라는 장내세균과의 정의에 나타난 성상을 갖는 그람음성 간균으로 주모성, 구연산을 탄소원으로 이용, 포도당으로부터 가스를 생산하는 주된 생화학성을 나타낸다.균체항원(O) 및 편모항원(H)이 진단에 사용된다. O항원은 세포벽에 존재하는 내열성의 단백－다당질－지질복합체로서, 항원특이성은 다당질에 존재한다. 또 편모항원은 이열성(易熱性) 단백이다. O항원에 의하여 O군으로 대별하고 다시 H항원과의 짜맞춤에 의하여 혈청형으로 세분된다. 이와 같은 분류양식에 의한 살모넬라의 혈청형의 기재를 Kaufman－White의 항원구조표라고 한다. 혈청형 구조는 우선 O항원, 제1상 H항원 및 제2상 H항원의 순으로 기재한다. 예를 들면, 혈청형 Typhimurium은 1, 4, 5, 12 : i :1, 2의 항원식이다. 살모넬라의 각 혈청형은 아종1에서는 원칙으로 그 균이 최초에 발견된 지명을 붙이도록 되어 있다. 예를 들면 일본에서는 S. Mikawasima이다.살모넬라에 의한 질환의 2/3에서 장염이 인정된다. 혈청형에 의하여 특징이 있는 증상이 보인다. 예를 들면 Typhi, Paratyphi A에서는 고열, 균혈증이지만 다른 식중독의 혈청형에서는 급성위장염이 통상이다.Listeria monocytogenes식중독 발생 원인균의 하나로 물이나 토양, 목초,동물의 배설물 등에 흔히 존재하며소나 돼지, 양 등에 감염되는 병원균. 정식 의학명은 분열균류 진정세균목 코리네박테륨과의 한 속으로 Listeria병을 일으키는 Listeria monocytogenes(리스테리아 모노키토게네스) 1종만이 알려져 있다. 인체의 유산을 일으키는 병원균으로 자연계에 광범위하게 분포하며 세균체는 작은 간균으로 주위에 생긴 섬모로 운동한다. 특히, 가공 육류 뿐만 아니라 salad, chocolate, milk 및 cheese 등 식품에 잠복하는 Listeriagerms는 주로 어린이, 노약자, 임산부 및 면역체계가 약한 사람들이 감염돼 처음에는감기증상을 보이다가 고열과 구토 등의 증상을 일으키며 심한 경우 사망까지 초래하는것으로 알려져 있다. 참고로 미 질병통제예방센터의 최근 자료에 따르면 미국에서는매년 약 2,500명이 Listeria germ에 감염돼 이중 약 5분의 1이 목숨을 잃고 있는 것으로 보고 된 바 있다.Staphylococcus aureus포도상구균(Staphylococcus)은 Micrococcaceae과에 속하며, 현미경으로 보면 포도송이와 같이 연속된 균괴를 형성하는 그람양성 통성혐기성 구균(직경 0.8∼1.0㎛)으로 현재 23종 4아종으로 분류되어 있다. 이중에서 황색포도상구균(Staphylococcus aureus)은 식중독을 포함하여 여러 가지 감염증을 일으키는 가장 중요한 균종이며, 다른 균종은 기회감염균이다황색 포도상구균은 보통한천배지나 혈액한천배지 등의 고형배지에서 배양할 때, 포도송이 모양을 보이나, 액체배지에서는 균이 하나, 2개∼수 개의 불규칙하게 연결된 상태가 된다. 10∼40℃(최적 발육 온도는 30∼37℃), pH 4.2∼9.3(최적pH 7.0∼7.5)에서 증식한다. 식염 10% 농도에서도 충분히 자라며, 15%에서도 약간 자란다.황색포도상구균을 토끼나 면양 혈액 한천 배지에 배양하면 집락 주변에 용혈대를 형성한다. 이 용혈은 용혈소(용혈독)에 의해 일어나며, 병원인자 중의 하나이며 현재 용혈소에는 4종가 있다. 이외에도 여러 가지 균체외 물질을 생산하며, 이들은 모두 병원인자로 볼 수 있다. 주된 것으로는 표피박탈독소(유아의 열상양피부증후군의 원인 독소), TSST1(독소성중독성독소), 류코시딘, 코아굴라제, 내열성DNase, 스타필로키나제(피브리노리신), 히알루노니다제, 단백질 A, 균응괴 인자(Clumping factor), 리파제 및 단백분해효소(프로테아제, 젤라티나제) 등의 독소나 효소이다3.실험방법3-1 Escherchia coli, staphlococcus areus, listeria manocytogenes, salmonella enteritidis, Bordetella bronchiseptica3-2 배지 Muller-Hinton broth and agar3-3 항생제 disc &멸균된 면봉등4.방법1)Muller-Hinton broth에 시험 균주를 37 ,24시간 배양한다2)면봉을 이용하여 시험 균액을 Muller-Hinton agar의 표면에 접종한 후 건조시킨다3)항생제 disc를 시험균주를 접종한 배지의 표면에 잘 올려 놓는다4)37 , 24시간 배양한다5)Disc에 의하여 증식이 억제된 영역의 지름을 측정한다6)판정기준표에 의하여 감수성 여부를 결정한다
발생학 topic 발표20034753 김성태제대혈제대혈에는 골수처럼 2종류의 줄기세포(stem cell)가 풍부하다. 줄기세포 중 혈액을 만드는 ‘조혈모세포’를 이식하면 백혈병·폐암·유방암 및 소아암, 재생불량성 빈혈, 선천성 면역결핍증, 류머티스 등을 치료할 수 있다. 관절·뼈·각종 장기·신경·근육을 만들어내는 ‘간엽줄기세포’로는 당뇨병·뇌졸중 등 신경계 질환·심근경색증·간 질환 등의 세포치료제를 개발중이다.제대혈은 조직적합성 항원 6개 가운데 최소 3~4개만 맞아도 이식이 가능하다. 조직적합성 항원이 하나만 안맞아도 이식이 불가능한 골수와 비교된다.추출하기 힘들고 기증자를 찾기 힘든 골수에 비해 제대혈은 얻기도 간편하다. 다만 골수는 보름이면 생착이 되는 데 비해 제대혈은 대개 3~4주일로 늦다. 일단 생착하면 제대혈이 골수보다 이식 거부반응 등 부작용은 적다.국내에서는 수만명이 ‘가족 제대혈’을 보관중인 것으로 추산된다. 이에 비해 삼성서울병원 등 공여 제대혈은행에는 불과 1만4천여개만 있다. 올해부터 의료보험이 적용돼 이식 건수가 크게 증가할 것으로 기대된다.탯줄 피 뽑으실래요？[한계레21, 주간지] 2003년 07월 31일 (목) 14:51젊은 부부 사이에 부는 제대혈 보관 열풍…과연 업체들의 홍보를 믿어도 되는 것일까임신 3개월인 김영숙(30·서울 중랑구 면목동)씨는 최근 산부인과 의원에 갔다가 의사로부터 제대혈은행에 대한 이야기를 들었다. “진료를 마친 뒤 의사가 ‘출산 뒤 제대혈을 보관할 거냐’고 묻더군요. ‘제대혈이 뭐예요’라고 되물었다가 졸지에 시대흐름에 뒤떨어진 한심한 엄마가 됐어요. 병원 문을 나서는데 간호사가 ‘엄마들 중에 제대혈을 모르는 사람이 없다’며 제대혈 안내 책자를 건네주더군요. ”15년 보관에 100만~130만원첫아이 출산을 두달 앞둔 회사원 이찬희(31)씨도 제대혈 때문에 아내와 말싸움을 벌였다. “아내가 100만원이 넘는 돈을 주고 제대혈은행에 제대혈 보관신청을 했다고 하기에 ‘꼭 해야 하느냐’고 한마디 했지요. 아내는 ‘. 최근 분위기는 마치 제대혈을 보관하는게 아기에 대한 부모의 의무나 사랑의 징표처럼 되고 있다. 제대혈은 보통 15년 동안 보관하는데 비용은 대략 100만∼130만원 선이다. 서울 강남지역 산부인과의 경우 지난해까지 20%가량의 산모들이 제대혈 보관을 신청했는데 올 들어 30~40% 안팎으로 늘어나고 있는 것으로 알려졌다.제대혈은 주사기로 태반과 탯줄의 혈관에서 뽑는다. 제대혈 보관신청을 하면 분만 뒤 의사가 제대혈 채취를 한다. 일부에서는 제대혈은행 직원이 혈액을 채취하는 것으로 알고 있지만 분만을 맡은 산부인과 의사가 직접 한다. 의사가 탯줄을 소독한 다음 산모의 혈액이 제대혈과 섞이지 않게 조심하면서 중력에 의해 흘러내리는 탯줄의 혈액을 채취하거나 항응고제가 처리된 주사기로 탯줄 정맥을 찔러 제대혈을 뽑는다. 다음으로 태반이 산모의 몸 밖으로 나오면 태반에 남아 있는 혈액까지 채취한다. 이때 세균감염을 막기 위해 소독을 하고 태반 정맥을 통해 혈액을 뽑는다. 이렇게 얻은 제대혈을 제대혈은행에 가져가 냉동보관한다. 이런 방식으로 갓난아기나 산모에게 거의 영향을 미치지 않고 대략 5분 안에 제대혈을 채취할 수 있다.이영호 동아대학 의과대 소아과학교실 교수는 “산모의 탯줄과 태반에서 약 100㎖ 정도의 혈액이 나오는데 이 속에 들어 있는 조혈모세포의 숫자나 기능이 골수 500~1000㎖ 속에 들어 있는 것과 비슷하기 때문에 제대혈을 냉동보관해뒀다가 필요한 때에 녹여서 이식에 이용할 수 있다”고 말했다. 제대혈은행쪽은 백혈병이나 재생불량성 빈혈, 악성종양, 유전성 질환의 치료를 위해 골수이식을 하는데 골수의 조혈모세포를 이용하는 골수이식과 같은 치료방법으로 제대혈의 조혈모세포를 이용할 수 있다고 주장한다. 이들은 제대혈 이식의 장점으로 △제대혈의 조혈모세포는 골수의 조혈모세포보다 미성숙한 상태라 타인에게 이식했을 때도 거부반응이 적고 △골수은행을 통해 골수를 이식하는 데 평균 6개월이 걸리지만 제대혈은행을 이용하면 빠르면 10일에서 한달 정도면 이식받을 수 있유전적 결함에 의해 발생되는 중증질환인 선천성 면역결핍증의 치료 등에도 응용 가능하다”고 주장했다. 채취한 제대혈을 어떻게 보관하는지를 확인하기 위해 7월24일 오전 서울의 한 종합병원 제대혈은행을 찾았다. 제대혈이 보관된 곳으로 들어가기 위해 살균 처리된 모자·장갑·신발을 신고 멸균복으로 갈아입었다. 옷을 갈아입고도 보관장소로 들어가기 전에 자외선과 바람 등으로 전신 소독을 했다.연구실에서는 멸균복을 입은 연구원들이 병원에서 가져온 제대혈을 검사하고 조혈모세포를 분리하고 있었다. 여기서는 바이러스, 미생물, 조직적합성검사, 매독감염 여부 등 냉동보관의 적합성 여부를 검사하고 조혈모세포의 분리·정제 과정을 거친다. 이런 과정을 통해 보관적합성 판정을 내린다.보관접합 판정을 받은 제대혈에서 종이컵 5분의 1가량인 25cc의 조혈모세포만을 분리해 디스켓 같은 키트에 담는다. 키트를 2시간가량 얼린 뒤 고유번호를 매겨 냉동저장고에 보관한다. 산소통처럼 생긴 저장고의 뚜껑을 열자 물안개 같은 연기가 피어올랐다. 섭씨 영하 196도로 보관하기 위해 액화질소를 기체 상태로 유지하고 있기 때문이다. 이 제대혈은행에서는 김치냉장고 1.5배가량 크기의 냉동저장고에 제대혈 5500개를 보관할 수 있다고 한다.제대혈에 관심이 있는 부부라면 막상 어떤 업체에 맡겨야 할지 혼란스럽다. 각종 인터넷 포털 사이트에서 검색어로 ‘제대혈’을 입력하면 운영 중인 제대혈은행들이 나온다. 일단 각 제대혈은행 인터넷 사이트에 들어가 내용을 훑어보고 제대혈은행 비교사이트(http://cafe.daum.net/cordblood) 등에서 각 업체별 가격·보관방법 등을 참고할 수 있다. 한 제대혈은행 관계자는 “제대혈 냉동보관 기술이 업체마다 다르긴 하지만 상당 부분 공개되어 있고 나름대로 국제기준에 맞추려고 노력해 보관기술의 차이는 그리 크지 않을 것”이라고 말했다.제대혈은행들은 ‘부모가 아이에게 해주는 사랑의 선물’이라며 만의 하나 내 아이가 크면서 백혈병에 걸렸을 때를 생각해보라며 제대혈 보관을 권포 양이 충분하지 않아 15살 이하(50kg)에 주로 사용된다.취재 과정에서 제대혈은행과 직접 이해관계가 없는 의료인 5명에게 ‘만약 아이를 낳는다면 제대혈을 보관할 거냐’고 물었더니 3명은 보관하겠다고 하고 2명은 보관하지 않겠다고 했다. 보관하지 않겠다는 의료인들도 가족 중에 혈액질환을 앓았거나 앓고 있는 사람이 있을 경우 보관하는 것도 필요하다고 말했다. 한 의료인은 “제대혈 보관의활성화는 바람직하나 업체끼리의 과당경쟁으로 제대혈 보관이 부풀려진 측면도 있다. 미국에서는 소수인종이나 가족 중에 혈액질환이 있는 경우를 제외하고는 개인이 제대혈을 보관하는 것을 권장하지 않는다”고 말했다.의사 채취비 두고 리베이트 논란도하지만 부모 입장에서는 아무리 확률이 낮아도 내 아이가 혈액질환에 걸리지 않는다는 보장이 없기 때문에 불안하다. 출산을 다섯달 앞둔 김인영(31·서울 마포구 신수동)씨는 제대혈을 보관할 예정이다. “차를 가진 사람들이 자동차보험료를 내지만 교통사고가 안 나는 게 제일 좋은 것 아니냐. 마찬가지로 제대혈도 ‘아기보험’으로 생각한다. 백혈병 같은 난치병에 걸릴 가능성이 아무리 낮아도 막상 내 아이가 걸린다면 어떻게 하냐. 나쁜 일이 일어나지 않는 게 최상이지만 만약 나쁜 일이 생기면 도움을 받는 게 보험이다. 제대혈 보관도 보험과 비슷하게 생각한다”고 말했다.올 들어 종합병원, 벤처기업 등이 제대혈보관 사업에 뛰어들어 현재 10여곳에서 제대혈은행을 운영하고 있다. 한 제대혈 보관업체의 매출액은 2001년 15억원, 2002년 140억원, 2003년 500억원(예상) 등으로 급증했다. 해마다 2배 이상씩 커지는 제대혈 시장을 두고 업체끼리의 경쟁이 치열하다. 각 업체들은 채시라·이재룡·남희석·이을용 등 유명 연예인과 스포츠 스타를 통한 홍보와 각종 이벤트, 보관비용 깎아주기 등에 나서고 있다.그러다보니 업체들 사이에서는 “치료·연구 기능은 없고 보관만 하는 일부 벤처 제대혈은행은 신뢰성이 떨어진다. 제대혈은 냉동생선이 아니다”, “검사를 제대로 하지 부모들만 피해를 볼 가능성이 높다”고 지적하고 있다. 이윤극대화를 추구하는 기업의 속성상 제대혈 보관료가 아닌 다른 분야 사업비용으로 투자될 수도 있고, 벤처기업의 특성상 안정성은 떨어진다는 것이다. 이에 대해 벤처기업쪽 제대혈은행은 “코스닥 상장을 준비하는 업체라면 과도한 리베이트를 주고 주먹구구식으로 경영을 하지 않는다”고 반박한다.효과에 비해 사회적 비용 너무 많이 들어국내 제대혈 보관시장 확대 추세로 볼 때 2~3년 뒤 12만명의 신생아가 제대혈을 보관한다면, 제대혈 보관시장 규모가 1조2천억원이다. 이 중 1년에 10명 안팎의 어린이가 제대혈 치료 혜택을 받는다면, 사회 전체적으로 볼 때 효과에 비해 비용이 너무 많이 든다.전문가들은 현재 상황에서는 제대혈이 백혈병 등 특정 질환에 제한적으로 효과가 있으며, 제대혈은행들이 주장하는 것처럼 제대혈에서 뼈·연골까지 만드는 일은 불가능하지는 않지만 실용화되려면 상당 기간이 걸릴 것으로 보고 있다. 제대혈의 효능을 강조하던 제대혈은행 관계자들도 “일부에서는 제대혈을 만병통치약으로 여기기도 한다”는 질문에 하나같이 신중한 입장이거나 물음표를 달았다. 생명과 직결된 제대혈시장이 상업주의에 휘말려 돈벌이 수단으로 왜곡되지 않게 정부나 관계기관의 교통정리가 필요한 때다.권혁철 기자 nura@hani.co.kr제대혈 남 주자! 주게 하자![속보, 주간지] 2003년 07월 31일 (목) 14:39공여 제대혈은행 활성화는 불가능한가… 환자들이 쉽게 기회 얻을 수 있도록 네트워크 조직해야“지난달 서울의 한 대학병원에서 아기를 낳았다. 출산 전, 의사에게 제대혈을 기증하겠다고 하자 병원 차원에서는 그런 제도나 절차가 없으니 제대혈 보관업체에 알아보라고 했다. 보관업체에 문의하니 ‘아기가 자라면서 어떻게 될지 모르는데 가족이 보관을 하지 왜 남에게 주느냐’며 의아해했다. 출산 전, 의사에게 제대혈을 기증할 것이라고 하자 정말 기증이 되느냐고 되물었다. 제대혈을 보관하면 우리 가족밖에 쓸 수 없지만 기증하면 많은 사람에게 도
