*병* 스토어

*병*

개인

팔로워0 팔로우

소개

등록된 소개글이 없습니다.

전문분야 등록된 전문분야가 없습니다.

판매자 정보

학교정보

입력된 정보가 없습니다.

직장정보

입력된 정보가 없습니다.

자격증

입력된 정보가 없습니다.

판매지수

판매중 자료수

1개
전체 판매량

3개
최근 3개월 판매량

0개
자료후기 점수

-
자료문의 응답률

-

전체자료 1개

hplc

HPLC (High Performance Liquid Chromatography) 신라대학교 제약공학과 D 조 장 효 정 윤 경 호 예 병 혁 정 영 태 목 차 분리의 기본 원리 HPLC 기기 장치 Chromatography 의 종류 Chromato graphy TLC GSC - adsorption LSC - adsorption PC Column method Plane method GC LC GLC - partition LLC - partition IEC – ion exchange EC AC - affinity GPC gel permeation GFC gel filtration HPLC 흡착 크로마토 그래피 겔침투 크로마토 그래피 이온교환크로마토그래피 분배 크로마토 그래피 H P L C 역상 크로마토 그래피 정상 크로마토 그래피 분리의 기본 원리 K = Cs / Cm 정지상에 용해된 용질 농도 이동상에 용해된 용질의 농도 분배 계수가 높으면 정지상의 농도가 높다 . 분배 계수가 낮으면 이동상의 농도가 높다 . 분배 계수 S(mobile phase) = S(stationary phase) R= t M /t R R= t M /(t s +t M ) =1/{1+(t s +t M )} v s =0×t s /(t s /t m )+v m ×t m /(t s + t m) =v m t m /(t s +t m ) =v m R t s /t m =C S V S /C M V M =KV S /V M R=1/{1+(KV S /V M )} =V M /(V M +KV S ) (2) 머무른 시간 t R 과 머무른 비 R (3) 머무른 부피 (V R ) V R =V M /R R=V M /V R =V M /(V M +KV S ) V R =V M +KV S R=1/{1+(KV S /V M )} =V M /(V M +KV S ) (4) 용량 계수 (k’) k’=KV S /V M V R =V M (1+k’) t R =t M (1+k’) k’=(t R -t M )/t M =t R ’/t M t R =(5 σ 25 5 σ법 W tan 16 접선법 (7) 분리능 R S R S=0.05 R S=1.00 R S=0.75 R S=1.50 16% 23% 0.1% 분리능은 이론단 수의 제곱근에 비례한다 . HPLC 기기 장치 칼 럼 검출기 펌프 Solvent 샘플 주입구 Solvent 1) 이동상의 조건 ① 분석 목적 성분을 녹일 수 있는 용매로서 분리하고자 하는 성분마다 용해도가 서로 다른 것 . ② 작동 온도에서 휘발성이 적은 것 . ③ 정지상을 변질시키지 않는 것 . ④ 순도가 높고 불순물이 적은 chromatographic grade 용매를 쓴다 . ⑤ 점도가 0.5 centipoise 이하로 낮은 것 . ⑥ UV cut-off(nm) 와 굴절률이 낮은 것 . ⑦ 극성과 용매 세기가 분석 목적에 적합할 것 . ⑧ 독성과 인화성이 없는 것 . ⑨ 완전 탈기 되고 입자가 적어야 한다 . 2) 용매 세기 S T = ∑ S i q i 3) 용매 pH 4) 반대 이온과 이온쌍 크로마토 그래피 RP-HPLC 에서는 극성이 강한 수용성 용매를 사용하기 때문에 pH 에 따라서 k’( 용량 계수 ) 이 크게 변동한다 . 해리 하기 쉬운 이온성 화합물은 극성에 의해 정지상에 분배되기 어렵다 . 이동상 용매속에 적당한 반대이온을 첨가 용질성분이온과 반대이온이 이온쌍을 형성하여 소수성이 커진다 . 비극성 정지상에 잘 분배되므로 분리를 개선 시킬수 있다 . 단일한 조성을 갖는 용매를 이동상으로 하는 용리 - 용매의 세기는 분리 도중에변하지 않고 일정하다 . 등용매 용리 (ioscratic elution) 5) 등용매 용리와 기울기 용리 분리 도중에 이동상 용매의 조성 ( 농도 pH) 을 변화 시키면서 하는 용리 - 용리 시간도 단축되며 띠넓이도 좁으면서 높고 뾰족한 피크가 얻어져 감도가 높아지고 분리능이 훨씬 개선된다 . 기울기 용리 (gradient elution) 볼록형 기울기 (convex gradient) 오목형 기울기 (concave gradient) 6) 용매의 재순환 - enzene porous polymer 가 정지상에 이용 8) 이동상의 준비 및 탈기 모든 이동상의 용매는 0.2~0.8 micrometer 의 florocarbon membrane filter 및 sintered glass filter 로 감압여과한 다음 부피 백분율로 혼합하고 탈기 시켜야 한다 . 고압하에서 용매 , 분석 목석 성분 컬럼 정지상 등의 변질을 일으키게 한다 . 산 소 이동상 중에 녹으 면 pH 변화를 일 으켜 분리조건의 변화를 일으킨다 . 이산화 탄소 기포를 발생 시켜 컬럼 효율을 떨어 뜨리고 검출기 ( 특 히 굴절률검출기 ) 잡음의 원인이 된다 . 질 소 Pump 일정 압력형 (constant pressire models) - 기체 치환형 (gas dosplacement pumps) - 공기 압축형 (pneumatic amplifier pumps) 2) 일정 부피형 (constant volume medels) - 왕복 운동형 (recoprocating pumps) ~ 단일 구동형 다중 구동형 주사기형 (syring pump) 펌프의 조건 1) 일정한 유속과 압력으로 용매를 밀어 줄 것 . 2) 고압 작동이 가능해야 한다 . 3) 가동이 쉽고 다양한 용매를 사용할 수 있어야 한다 . 4) 경제성이 있어야 한다 . 5) 재현성이 있는 Retenition Time 을 얻을 수 있어야 한다 . 6) 대부분의 용매에 대해 화학적으로 불활성이어야 한다 . Injector 판막형 (sptum injector) 밸브형 (valve injector) 무판막형 가동정지 주입형 (septimless stop-flow injector) Injection 시 유의 사항 시료 주입시 타 물지에 의한 오염이 없도록 잘 세척해야 한다 . 시료 주입 시 기포를 완전히 제거한후 주입한다 . 시료 주입량의 조정이 용이해야한다 . 분석이 끝난 후 System 세척시 injector 를 Load 위치에 놓고 세척하고 앞부분은 cap 으로 막아둔다 . Injector 와 colu

공학/기술| 2008.11.28| 35페이지| 1,500원| 조회(466)

크로마토그래피, Chromatography, HPLC

미리보기

닫기