PrImaryLymphoIdorganT cellTymus①막 태어나서 puberty까지가 가장 크고 그 이후로는 위축(artophy)② 피질에 Lymphocyte가 많다.③ Thymus education(negative selection)- 골수에서 유래된 전구세포는 피질로 들어와 수질로 이동하는 동안 자신이 말초혈액에서 상호작용할 세포들이 가지고 있는 MHC에 대하여 배우게 된다.- 이 과정동안 자신의 MHC를 인식하지 못하거나 과다하게 인식하는 흉선세포들은 모두 죽어나가게 된다.- 이 흉선에서의 교육과정을 통하여 외부 항원만을 잘 인식하는 T lymphocytes가 성숙되어 말초혈액으로 방출되게 된다.- 약 50x106 thymocytes 중 단지 1x106개의 흉선세포만이 말초혈액의 T cell로 성숙된다.④ Thymulin이라는 호르몬은 zinc를 함유하고 있는데, 이 zinc는 T cell development에 있어 필수적이다.B cellBursa offabricius① 위치 : above the cloaca② 알에서 깬지 1-2주 째에 제일 큰 사이즈 이다.③ cotex에 lymphocytes, plasma cells, macrophages가 있다.④ 기능- B cell의 성숙(maturation)과 분화(differentiation)- Immune complex를 trap한다.- Bursin이라는 호르몬을 분비하여 B cell을 activate 시킨Peyer'spatches- 소장에 있는 림프구 창고다 정도만- M cell : antigen을 take up 해서 dendritic cell에줌SecondaryLymphoIdorganprimary lymphoidorgan과 차이점- Arise late in fetal life and persist through adult life- Antigen이 들어오면 enlarged- Macrophage와 dendritic cell이 많다.(antigen presenting이 잘됨)Lymph nodesMedullaB lymphocytes, reticulum cells, plasma cells / macrophageParacortexT cell / DCCotexB cell / DCGerminal center(antigen stimulation 후에 형성)> Dark zone : B cell proliferate(maturation)> Light zone : 수명을 다한 B cell과 macrohage apoptosis, immunoglobulin class switching, memory B cell formationHEVslymphocytes의 출입구, paracortex에 위치, spot-welded junction을 가지고 있다.SpleenLymph node는 lymph에 있는 antigen 밖에 못 거름. spleen이 blood에 있는 antigen을 잡아줌. (오래된 blood cell들을 파괴함)White pulprich lymphocyte, B cell이 뭉쳐있는 primary follicle이 존재
Chapter 8. The organs of immune system1. Introduction@ Lymphoid organs 이란?① Lymphocytes와 APC 및 외부항원이 서로 만나서 항원이 서로 만나서 면역 반응을 하는 곳② Such as spleen, lymph node, thymus③ Lymphocytes(T cells, B cells) are mainly in lymphoid organ2. Primary lymphoid organs and secondary lymphoid organs(table 8-1)(1) Primary lymphoid organLymphocyte의 성숙(mature)가 일어나는 곳① T cells- Thymus② B cells- Bursa of fabricius → birds- Bone marrow → primates and rodents- Peyer's patches(not major) → ruminants, pigs, rabbitsThymus① 흉강에 심장 앞쪽 약간 아랫 부분에 위치② 막 태어나서 puberty까지가 가장 크고 그 이후로는 위축(artophy)③ 피질에 Lymphocyte가 많다.④ Thymus education(negative selection)- 골수에서 유래된 전구세포는 피질로 들어와 수질로 이동하는 동안 자신이 말초혈액에서 상호작용할 세포들이 가지고 잇는 MHC에 대하여 배우게 된다.- 이 과정동안 자신의 MHC를 인식하지 못하거나 과다하게 인식하는 흉선세포들은 모두 죽어나가게 된다.- 이 흉선에서의 교육과정을 통하여 외부 항원만을 잘 인식하는 T lymphocytes가 성숙되어 말초혈액으로 방출되게 된다.- 약 50x106 thymocytes 중 단지 1x106개의 흉선세포만이 말초혈액의 T cell로 성숙된다.⑤ Thymulin이라는 호르몬은 zinc를 함유하고 있는데, 이 zinc는 T cell development에 있어 필수적이다.Bursa of fabricius① 위치 : above the cloaca② 알에서 깬지 1-2주 째에 제일 큰 사이즈 이다.③ cotex에 lymphocytes, plasma cells, macrophages가 있다.④ 기능- B cell의 성숙(maturation)과 분화(differentiation)- Immune complex를 trap한다.- Bursin이라는 호르몬을 분비하여 B cell을 activate 시킨다.Peyer's patches- 소장에 있는 림프구 장고다 정도만- M cell : antigen을 take up 해서 dendritic cell에 줌(2) Secondary lymphoid organprimary lymphoid organ과 차이점- Arise late in fetal life and persist through adult life- Antigen이 들어오면 enlarged- Macrophage와 dendritic cell이 많다.(antigen presenting이 잘됨)Lymph nodes① Lymphoid node는 lymphocytes, macrophages, dendritic cells로 구성 되어 있다.② Medulla : B lymphocytes, macrophages, reticulum cells, plasma cells / macrophage③ Paracortex : T cell / DC④ Cotex- B cell / DC- Germinal center(antigen stimulation 후에 형성)> Dark zone : B cell proliferate(maturation)> Light zone : 수명을 다한 B cell과 macrohage apoptosis, immunoglobulin class switching, memory B cell formation- High endothelial venules(HEVs) : lymphocytes의 출입구, paracortex에 위치, spot-welded junction을 가지고 있다.Spleen① Intro- Lymph node는 lymph에 있는 antigen 밖에 못 거름. spleen이 blood에 있는 antigen을 잡아줌. (오래된 blood cell들을 파괴함)- White pulp : rich lymphocyte, B cell이 뭉쳐있는 primary follicle이 존재- Red pulp : red cells storage- Marginal zone : red pulp와 white pulp경계에 있음, B cell과 DC 풍부② Response to antigens- Red pulp와 marginal zone에 잇는 DC가 antigen을 take up 해서 white pulp(정확히 말하면 primary follicle)로 들어감
@동맥과 정맥의 발달● 동맥1. 동맥계 발달(그림 11-6번 참고)- 대동맥활(aortic arch ateries)등쪽대동맥(dorsal aortae)와 심장 속막 대롱(endocardial tube)이 융합하여 첫 번째 대동맥 활이 만들어짐. 인두 굽이를 둘러싸는 형식으로 1st부터 6th까지 총 6 쌍의 대동맥 활이 만들어 진다.대동맥활은 인두 굽이의 형성에 동반 하여 순차적으로 생성 됨.cf) 인두굽이(pharyngeal arch) (그림 7-2번 참고)포유류에서는 대개 6 개이나 사람에서는 5 개임신 4주와 5주에 형성되는 중간엽의 신경능선세포가 이동해 들어와 이 부위의 뼈, 연골, 인대, 진피 등등 의 형성에 기여함- 대동맥주머니(aortic sac)동맥줄기(truncus arteriosus)와 대동맥활동맥의 연결부위가 팽창 되면서 만들어 진다.2. Derivatives of the aortic arch arteries(1)대동맥활의 분화(그림 11-16,17)-첫째대동맥활 : 대부분 사라지고 일부가 남아 위턱동맥(maxillary arteries, pair)이 됨.-둘째대동맥활 : 대부분 사라지고 일부가 남아 등자뼈동맥(stapedial arteries, pair)이됨.-셋째대동맥활 : 그림 A . 목동맥(carotid arteries) → 그림 B . 온목동맥(common carotid arteries)를 형성하고 속목동맥(internal carotid arteries), 바깥목동맥(external carotid arteries)를 형성-넷째대동맥활오른쪽: 오른 쪽 빗장밑동맥(subclavian a.) 일부가 됨왼쪽 : (영구) 대동맥활(Arch of aorta)의 일부가 된다.-다섯째대동맥활: 퇴화-여섯째대동맥활: 폐동맥과 연결됨. 왼쪽 여섯째대동맥활의 일부(원위부분)가 동맥관이 된다.동맥관 : 태반에서 온, 산소가 풍부한 혈액을 폐로 가지 않도록 우회 시킨다.(manual 12-34, 뒤)(2) 팔머리동맥 (brachiocephalic trunk)과 빗장밑동맥(subclavin a.)- 팔머리동맥 : 대동맥 주머니와 셋째, 넷째대동맥활이 융합되어 발달함. 최종 형태로 보면 (영구)대동맥활에서 나오는 형태- 빗장밑동맥 : 일곱째 등쪽마디사이동맥에서 유래(뒤에 다시 한 번 언급됨)(그림 11.18)- 개: 팔머리동맥은 왼온목동맥, 오른온목동맥을 분지. 오른온목동맥에서 오른 빗장밑동맥 나옴.(왼빗장밑동맥은 (영구)대동맥활에서)- 소, 말 : 팔머리동맥에서 우선 오른, 왼 빗장밑동맥이 나옴. 그 뒤에 왼,오른 온목동맥이 나옴- 돼지 : 팔머리동맥에서 오른 빗장밑동맥이 나옴. 그 뒤에 왼, 오른 온목동맥이 나옴. (왼빗장밑동맥은 (영구)대동맥활에서)(3)미주신경의 되돌이 후두가지 (recurrent laryngeal branch of vagus n.)(그림 11. 19)미주신경의 되돌이 후두가지 - 여섯째 인두굽이(sixth pharyngeal arch)의 근육조직을 지배.처음에는 왼쪽, 오른쪽 둘다 여섯째동맥활동맥에 걸침- 오른쪽되돌이후두신경 :(6번째 일부와 5번째가 퇴화함으로) 오른쪽 빗장 동맥에 걸쳐짐.- 왼쪽되돌이후두신경: (6번째 → 동맥관 →동맥관인대) 동맥관인대에 걸침.※ 말의 경우에 후두의 왼쪽 마비 잘일어남이유 : 말은 목이 길어 목을 움직일 때 되돌이후두 신경이 같이 움직이는 데, 오른 쪽 같은 경우는 오른빗장밑동맥에 걸쳐있어 신경이 움직일 때 동맥도 유동적 움직여서 신경의 이동에 크게 문제가 되지 않는다. 하지만 왼쪽의 경우에는 견고한 대동맥활에 붙어 잇는 동맥관 인대에 걸쳐 있기 때문에 신경이 움직일 때, 장애가 있어서 마비가 오게 된다.3. 대동맥가지들(그림 11-20)(1) 마디사이동맥 : 몸분절(somites)사이를 지난다.longitudinal anastomoses : 마디 사이 동맥에서의 일련의 세로축 문합.(2) 등쪽마디사이동맥- 목부위 : 일곱째 마디사이 동맥에서 척추 동맥(vertebral a., pair)와 빗장밑동맥(subclavian a., pair)이 만들어짐- 가슴부위 : anastomoses은 속가슴동맥(internal thoracic a., pair)이 됨, 마디사이동맥은 갈비사이동맥(intercostal arteries)이 됨.- 허리부위 : 앞쪽은 허리동맥(lumbar arteries)이 됨. 뒤쪽은 바깥엉덩동맥(external iliac arteries)(3) 배쪽마디사이동맥배꼽동맥(umbilical arteries) : 속엉덩동맥(internal iliac arteris)가 됨.난황동맥(Vitelline arteries)+Left - DegenerationRight - 앞쪽창자간막동맥 (Cranial mesenteric artery)뒤쪽창자간막동맥 (Caudal mesenteric artery)복강동맥(Celiac artery)기관식도동맥(brancho-esophageal a.)(4) 가쪽마디사이동맥 : 신장동맥, 가로막배동맥, 부신동맥, 생식샘동맥, 깊은휘돌이동맥(5) 심장혈관(coronary vessels) : anastomoses이 시작되는 부분에서 일어나는 내피싹(endothelial sprout)은 심장혈관을 형성한다.● 정맥1. 정맥계 발달발생생 초기에 난황정맥 배꼽정맥, 기본정맥이 형성된다.2.동맥 및 정맥의 분화(그림11.21)- 내피세포들은 궁극적으로 정맥으로 발달할 수 있는 고유 능력을 지닌다. 동맥은 VEGF(vascular endothelial growth factor)와 Notch signaling에 의해 촉진된다.- 동맥계의 내피세포 : ephrin-B2라는 막전위 단백질이 있음.- 정맥계의 내피세포 : ephrin-B2의 수용체인 Eph-B4가 있다.- +동정맥 문합이 되면서 ephrin-B2와 Eph-b4가 만나게 되면 end to end fusion은 촉진 되게 되고 lateral fusion은 억제되게 된다.3. 난황 정맥(vitelline veins, pair)(그림 1.22)- 난황주머니로부터 심장으로 혈액을 운반. (산소 별로 없음)- 배꼽을 경유해서 가로사이막(septum transcersum)을 경유하여 정맥굴로 들어간다.cf) 가로사이막 : 중배엽 집단으로 나중에 가로막이 된다.- 중간 부분 : (그림 A, B) 간에서 간 굴모세혈관(hepatic sinusoids)를 만든다.- 앞쪽 부분 : 왼쪽 난황정맥의 앞쪽부분 퇴화, 오른쪽 난황정맥의 앞쪽 부분은 아래대정맥(inferior vena cava)의 일부분이 된다.- 뒤쪽 부분 : anastomoses가 중간창자를 사이로 앞뒤로 해서 생긴다. 최종적으로는 문맥 (portal vein)이 된다.4. 배꼽 정맥(umbilical vein, pair)- 요막(태반)으로부터 탯줄을 통해서 혈액을 운반 (산소 풍부),- 요막에사 가로사이막을 지나 정맥굴로 들어 간다. 앞쪽, 중간, 뒤쪽 부분으로 분류 됨.- 배꼽 있는데서 왼쪽 배꼽 정맥과 오른쪽 배꼽 정맥이 합쳐짐- 중간 부분 : (그림 B, C) hepatic sinusoids 형성에 기여- 앞쪽 부분 : 퇴화- 뒤쪽 부분 : 왼배꼽정맥이 정맥관(ductus venosus)의 일부가 된다.
Rat를 이용한 Ethylene glycol의 급성 경구독성 및 중독 처치효과 연구전남대학교 수의학과 61171 장일(제출일 : 2009년 6월 9일)서 론Ethylene glycol(EG)은 가장 간단한 2가 알코올의 하나로 dihydric alcohol, ethylene alcohol, 또는 glycol이라고도 한다(1,2-Dihydroxyethane, C2H6O2). 이것은 단맛이 나고 구강점막에 대한 자극감이 없어 외국에서는 “sweet killer"라고 불리기도 한다. EG는 주로 개와 고양이에게 중독을 일으키며 돼지와 조류도 중독된다. 계절적으로는 부동액 교환시기인 늦가을과 초봄에 거리나 쓰레기통 등에 버려진 부동액을 동물이 우연히 섭식하여 중독되는 경우가 많다.EG 중독으로 나타난 임상 양상은 대개 세단계로 구분하는데, ethylene glycol 섭취 후 30분에서 12시간 내에 나타나는 초기 신경계 증상은 술취한 듯한 상태, 실조증, 혼수, 발작 등이고, 중간 단계인 섭취 후 12시간에서 48시간 동안은 청색증, 빈호흡, 폐부종, 기관지폐렴의 심폐 기능부전이나 나타난다. 대부분의 경우 이 단계에서 죽음을 맞이하게 된다. 마지막 단계인 섭취 후 24시간에서 72시간 동안 대사성 산혈증과 신부전이 나타나며, 때때로 crystal oxaluria를 동반한다. 여기에 ‘후기 신경병증’을 네 번째 단계로 추가하여 보고하기도 하는데 이는 뇌신경의 결손을 포함한다.1)치료법은 구토나 위세척으로 섭취한 물질을 제거하고, EG의 대사를 막는 에탄올이나 4-methylprazole(4-MP)를 해독제로 사용한다. 우리는 이중에서 ethanol이 EG를 대사시키는 alcohol dehydrogenase에 경쟁적으로 작용하여 독성을 약화시킨다는 점에 착안 하여서, 20% ethanol을 복강 투여하였다. 어떻게 보면 술과 마찬가지인 이 용액을 이용하여 랫드에서 해독효과를 보려 한 것이다.재료 및 방법시험계 및 사육환경본 시험에서는 6주령의 특정병원체부재 랫드(Spr1581.085IP(DW)0.86790.80740.72380.63690.5967T3체중151.8146.9130.7116.5107.6130.70경구(E.G)1.15181.4691.3071.1651.076IP(ethanol)0.83490.80790.718850.640750.5918T4체중151.1148.5123.3118.4102.8128.82경구(E.G)1.81321.7821.47961.42081.2336IP(DW)0.8310.81670.67810.65120.5654표 시험군의 구성, 투여량(체중:g, 투여량:ml, Av: 평균 체중)(예. VC의 1st=1번 랫드, T1의 1st=6번 랫드, T2의 3rd=18번 랫드)시험물질 및 부형제독성물질은 ethylene glycol (Sigma Chemical Co.)로 2008년 3월 10일 500㎖을 입수했다. 실온에 보관했으며 투여 직전 멸균 증류수로 희석하여 조제하였다.해독제는 Absolute ethanol (J.T. Baker, Holland)로 멸균 증류수에 희석하여 20%로 조제하였다.시험군의 구성, 투여액량 및 투여량시험군의 구성 및 투여량은 위의 표1과 같다. 이렇게 투여량을 설정한 이유는 EG의 랫드 경구반수치사량은 문헌에 따라 다소 차이가 있으나 5.5~13㎖/㎏ (Encyclopedia of Toxicology)으로 알려져 있다. 상기의 결과를 근거로 저용량군(T1)은 동물이 사망하지 않을 것으로 예상되는 5㎖/㎏, 중간 용량군(T2)은 명백한 독성 소견이 나타나면서 사망률이 낮을 것으로 예상되는 10㎖/㎏, 그리고 해독 처치군(T3)은T2와 똑같은 조건에 복강에 ethanol 5ml를 넣어 주었다. 마지막으로 고용량 군에 사망률이 50% 정도 나타날 것으로 예상되는 12㎖/㎏을 선택하였다.투여 방법EG의 투여는 동물에서 예상되는 노출 경로 중 하나인 경구 투여를 선택하였다. 투여 당일 14:00~16:00 사이에 1회 투여했다. 투여 전 하룻밤 절식시켜 위내를 비게 한 후 경구 투여용 sonde(T128.3NNNNN172.5N18140.4LAT122.5NNNNN155.9N19122.7DL126.9NNNNN149.5N20112.2AT113.3NNNNN136.8NAv137.26127.84157.56T421147.1AT132ATAT, LACNLATDL160.8DL22152.2AT127.8ATNNNN170.2N23121.2AT109.1ATAT, LACAT, LACAT, LACDL121.3DL24117.8AT106DDDDDDD25107.2AT107.7AT, DLNNNN133.5NAv129.1116.52146.45표 2 체중과 증상 (AT=ataxia, N=normal, LAT=less ataxia, LAC=lacrimation, D=death, DL=decreased locomotion, 체중: kg)부검 소견을 관찰한 다음 고환, 부고환, 정낭선, 전립선, 비장, 신장, 부신, 간, 흉선, 심장, 폐, 뇌를 적출하여 습중량을 측정했다. 도중 사망 동물은 가능한 한 즉시 부검을 실시하여 육안적 소견을 관찰하고 위의 장기들을 적출하여 습중량을 측정했다.자료의 정리 및 통계 처리부검 후 측정한 장기별 습중량은 평균을 구한 후 percentage를 구하였다.결 과사망 동물실험 기간 중 사망한 동물을 관찰한 결과 고용량군(T4)의 24번 쥐가 2일째에 죽어 있었다.일반 증상decreased locomotion과 ataxia, lacrimation가 관찰 되었다. (표2)체중실험 기간 중 전 동물에 대한 체중 측정 결과 해독처치군(T3)와 고용량군(T4)에서 Day2에 평균 체중을 보았을 때, 줄어든 것을 알 수 있었다.그러나 그 외 나머지 군에서는 투여 용량에 관계없이 체중이 계속 증가하는 양상을 보였다. 체중 측정 결과는 표2에 정리되어 있다.부검 소견* Day 7까지 살아 남은 랫드의 경우- renal petechia: 14번, 15번, 21번- renal pallor : 25번- hepatic petechia : 9번, 19번- hepatic pallor : 1경구 투여한 후 일반 증상과 체중, 부검 소견 및 장기별 습중량을 측정했다.실험 결과 단 한 마리의 랫드 - 24번(T4-가 죽었다. 우리는 이 랫드가 죽은 시점에 집중할 필요가 있다. 서론에서도 밝혔듯이 EG의 독성에 의해 죽음에 이르기 가장 좋은 단계는 중간 시기인 섭취 후 12시간에서 24시간 동안의 시간이다. 우리는 이쥐의 죽음을 2일째(정확히 말하면 21시간~45시간사이)에 발견하였기 때문에 이론과 비슷한 결과가 나왔다고 할 수 있다.그리고 체중을 측정한 결과에서도 흥미로운 점이 발견 되었다. 각 군의 체중의 평균 값(표2의 Av값 참조)의 변화를 비교해 보았을 때, 다른 군의 경우 체중이 일관성 있게 증가 하였으나, 해독처치군(T3)와 고용량군(T4)에서 Day2에서 체중이 줄어 든 것을 알 수 있다. T4의 경우는 실험군 중 가장 고용량의 EG를 투여하였기 때문에 이러한 결과가 나오는 것은 당연 하다고 볼 수 있다. 하지만 T3의 경우 T2와 동일 한 조건에 해독제인 Ethanol을 넣어 주었지만 T2에서는 Day2에서도 체중이 증가 하였는데 T3는 오히려 체중이 더 감소하였다. 이는 에탄올이 EG를 해독 시키지는 못 할망정 더 안 좋은 영향을 끼친 것으로 해석된다. 실제로 요즘 임상에서는 에탄올에 의해 이차적인 췌장염이나 중추신경계 억제 심혈관계의 허탈의 가능성이 있기 때문에 에탄올을 쓰지 않는 다고 한다.2)우리는 이번 실험에서 실험 후 24시간 간격으로 7일간 쥐의 운동성을 관찰 하였는데(표2 참조), T2-4에서 ataxia와 less ataxia, decreased locomotion이 관찰 되었다. 이는 ethylene glycol의 대사물들(glycoaldehyde, calcium oxalate)에 의한 신경독성의 결과라고 보여 진다. 그리고 시간이 지남에 따라 ataxia는 less ataxia로, less ataxia는 decreased locomotion로, decreased locomotion은 normal 상태로 변하는 것을 볼 수 있었다.VCT112345678910Body weight194.4173.4159.4149.6139.9198.9181.4174.7156142.8ovaryL0.04110.0230.02830.0220.0170.4940.0250.03350.0430.024R0.00340.0250.03150.0220.0250.05930.0190.0430.050.028uterus0.150.240.270.240.150.190.080.30.350.16kidneyL0.730.780.70.940.620.890.70.660.680.62R0.770.820.580.960.690.990.790.760.660.62adrenalL0.02890.0260.02210.0090.0130.5370.0240.0230.041R0.03290.00240.01150.010.0150.2190.0340.0420.024spleen0.380.370.380.530.350.3950.350.420.370.4liver7.927.517.447.727.38.27.58.187.96.03thymus0.430.50.320.640.580.50.530.60.60.61heart0.70.640.610.740.50.760.710.630.660.48lung0.870.950.891.040.951.250.970.920.840.91brain0.731.691.431.781.481.621.811.681.251.6T2T*************17181920Body weight194.9178.8162149.3109.2173.1172.5155.9149.5136.8ovaryL0.0410.0430.0450.0370.0250.0410.0260.0230.0260.012R0.080.0620.0430.0520.030.0180.0320.0220.0210.015uterus0.240.680.270.240.080.111.340.190.830.3kidneyL0.870.890.660.671.11.130.870.660.70.55R0.870.820.680.681.150.990.780.610량(g)