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인간관계의 중요성(사회적,개인적,조직적측면)

인간관계론주 제인간관계의 중요성제출일2008.4.15성 명김 천 지인관관계론 과제 “김천지”우리 모두는 어떠한 형태이든지 인간관계를 맺고 있다. 어떤 사람들은 많은 사람과 인간관계를 맺고 있으며, 어떤 사람들은 극히 소수의 사람과 인간관계를 맺고 있다. 어떤 사람들은 원만하고 즐거우며 사랑과 신뢰에 가득 찬 인간관계를 맺고 있는 반면, 어떤 사람들은 외로움과 허무를 느끼는 인간관계를 맺고 있다.인간관계는 한 개인이 느끼는 행복의 정도에 많은 영향을 미치기도 하지만 일에 있어서의 즐거움과 성취에도 많은 영향을 미치기도 한다. 인간관계는 우리가 살아가는데 많은 영향을 주고 우리의 인생에서 삶의 척도가 될 만큼 정말 중요한 것이다.우리는 현대 사회를 네트워크 사회라고 한다. 이때 네트워크는 흔히 컴퓨터 네트워크를 의미하지만 성공을 위해서는 또 하나의 네트워크를 개발 할 수 있어야 한다.그것은 바로 ‘휴먼 네트워크’이다. 인간과 인간의 관계에서 성공의 기회가 발생하고 비즈니스도 생기기 때문이다. 인맥이 비즈니스라는 말은 바로 휴먼 네트워크의 중요성을 강조한 것이다. 업무상 한 번 만난 사람을 좋은 인적 자산으로 바꿀 수 있는 사람이라면 틀림없이 성공한다고 할 수 있다. 그러나 인맥은 급할 때 만들려고 하면 소용이 없다. 꾸준한 노력으로 인맥을 형성하고 관리해야 할 것이다.1. 개인적 중요성인간은 세상을 혼자 살아갈 수 없다. 인간은 사회적 동물이기 때문이다. 인간이라는 말의 한자의 뜻을 풀이하면『사람 사이』라는 뜻이다. 즉 인간을 인간답게 하는 것은 타인과의 관계 속에서만 가능하다고 볼 수 있다. 우리 모두는 어떠한 형태이든지 인간 관계를 맺고 있다. 어떤 사람들은 보다 많은 사람과 인간 관계를 맺고 있으며, 어떤 사람들은 극히 소수의 사람과 인간 관계를 맺고 있다. 어떤 사람들은 원만하고 즐거우며 사랑과 신뢰에 가득찬 인간 관계를 맺고 있는 반면, 어떤 사람들은 외로움과 허무를 느끼는 인간 관계를 맺고 있다.갓 태어난 어린 아기는 맨 먼저 어머니의 젖꼭지를 빨면서 따사로운 피부와의 접촉을 통해서 기본적인 성격이 형성되고, 차츰차츰 아버지와 형제 자매와의 사귐을 통하여 인간을 배우고 사회에 적응해 나가고, 나아가 '자아'를 성숙시켜 가는 것이다. 이러한 일련의 사실을 '관계'라고 부르며 또한 타인과의 관계 없이는 자기 인격을 바르게 성장시킬 수 없다는 이러한 특징을 일컬어 '인격적 상호 의존성'이라고 부른다. 이는 인격과 인격의 만남이 없거나 또한 상호 관계가 없는 것이라면 그것은 한 개인이 인간으로서 인격적으로 성장할 수 없다는 인간의 본연적 특징을 지적하는 것이다. 즉 사람이란 반드시 다른 사람과 서로간의 인간관계의 경험을 통해서 한 인간으로서 바람직한 성장, 발달을 하게 된다는 말이다. 그러므로 인간은 원래 그 출발부터가 서로간의 의존관계에 있으니 만큼 이 인격적 상호관계는 가장 중요한 요소로서 인식되어야 한다. 우리들이 경험하게 될 여러 가지 인간관계의 질과 양에 따라 각 사람 나름대로의 독특한 '나'가 형성·발달되고, 한 개인의 독립된 건전한 인격발달에 크게 영향을 받기 때문이다.2. 조직적 중요성후배나 동료, 상사와의 관계 역시 사업성패의 중요한 요인이된다.인간관계를 원만하게 유지하지 못하는 사람은 설사 높은 학식과 특별한 능력을 지녔다하더라도 이것을 마음껏 발휘 할 기회와 공간이 주어지지 않는다. 뢰스리스버거(F.J Roethlisberger)는 인간관계를 협동행위의 사실을 취급하는 적절한 방법과 기술이라고 정의하고 있으며, 미이(J.F. Mee)는 경영관리측면에서의 인간관계는 종업원의 근로의욕을 향상시킬 목적으로 종업원의 높은 사기와 협동심을 갖고 있는 경우 기업전체의 근로의욕이 향상되고, 협력체계가 확립된다고 정의했다.

인문/어학| 2008.05.01| 3페이지| 1,000원| 조회(6,696)

사회적, 인간관계, 인맥, 개인적, 조직적

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상가권리금에 영향요인

부동산투자론주 제상가 권리금의 영향 요인제출일2008.4.9성 명김 천 지(과제) 상가권리금 영향 요인 “김천지”☆ 목 차 ☆Ⅰ. 서론Ⅱ. 본론1. 권리금의 정의2. 권리금과 상권3. 상가 권리금의 미치는 영향 요인Ⅲ. 결론 및 고찰Ⅳ. 참고문헌Ⅰ. 서 론부동산 경기 및 국내경기와 아주 밀접한 관계가 있는 상가의 경우 부동산 경기의 하락이 상권의 하락으로 이어지고 이러한 경제약세가 계속될 때 서민경제는 직접적인 영향을 받아 상가의 타격은 상당할 것으로 예상된다.그런데 이러한 경제 상황에서도 우리는 길거리를 걷다보면 가끔 공통된 경험을 하게 된다. 어려울수록 장사가 잘 되는 점포가 있는가 하면 동일지역 내 어떤 점포에는 사람들이 많이 몰리는 곳이 있고, 그렇지 않는 점포들이 있음을 발견하게 된다. 물론 점포를 운영하는 사람의 능력에 따라 또는 점포의 위치에 따라 다른 모양으로 나타날 수 있겠지만 어찌되었든지 좋은 점포는 경기의 영향을 타지 않는다는 것과 이러한 상권은 몇 가지 핵심요소에 따라 결정된다는 사실을 알 수 있다.따라서 상권을 지배하는 핵심요소들을 알게 된다면 상권의 본질을 알게 될 것이고 상권의 본질을 알면 이것은 바로 돈이라는 사실도 바로 이해할 수 있다.우리는 이것을 쉽게 말해 권리금이라고 말한다.권리금은 1년치 이익금을 말하는데 점포 크기는 1층, 10평을 기준으로 한다. 다시 말해서 권리금이 6,000만원이라고 하면 월 500만원의 이익금이 있어야 한다. 여기서 이익금이라고 하면 감가상각이나 제세공과금을 제외한 것으로 순수 권리금과 구별해야 한다. 구체적인 내용은 추후에 논하기로 하자.따라서 권리금이 많고 적음에 따라 상권의 성황여부를 알 수 있는데 잘나가는 강남의 15평내외 조그만 상가 하나의 권리금이 원만한 25평 아파트가격과 비슷하다면 권리금을 결정하는 상권의 파악이야말로 돈을 버는 지름길임을 알 수 있다.Ⅱ. 본 론1. 권리금의 정의 ?일반적으로 용익권(用益權)·임차권(賃借權) 등의 권리를 양도하는 대가로 주고받는 금전이라 한다. 예를 들면 택지(宅地)나 건물의 임대차(賃貸借)에서 임대료나 보증금 외에 별도로 주고받는 금전을 말한다.권리금이라는 말은 여러 가지 경우에 쓰이며, 그 양도되는 권리와 이익의 종류가 다양하기 때문에 그 법률적 성질도 여러 가지로 다르다.2. 권리금과 상권도심과 부도심 그리고 지역 지구로 나뉜다. 도심은 도시의 핵으로서 서울로 말하면 4대문안을 말하지만 지금은 삼성동 무역센타를 중심으로 제2도심이 탄생하였다. 여기서 주목해야 하는 것이 역세권을 중심으로 이루어지고 있는 지역,지구이다. 지역,지구는 부도심과 같은 역세권을 중심으로 그 해당지역의 근린생활시설의 중심이 되는 곳으로 상가의 경우 권리금에 미치는 영향은 매우 크다.이러한 권리금을 파악하기 위해서는 기본적인 해당지역의 상권지도를 이해해야 한다.3. 상가 권리금에 미치는 요인첫째, 실질적 교통량이다.이는 상권의 기본적인 요소이다. 교통량이 있는 곳에 상권은 형성되는 것이다. 그러나 단순한 교통량은 상권과 아무 연관이 없다. 고속도로의 교통량이 이와 같다. 상권이 왕성하려면 실질적으로 상권에 영향을 미치는 교통량이 있어야 한다. 도심과 부도심을 연결하는 경우 그 중심축에 있는 지역은 교통량의 영향으로 상권의 출발점이 된다. 상권에서 혈관과도 같은 게 교통량이다.둘째, 실질적 유동인구다.인구, 특히 유동인구야 말로 상권에서 혈액과도 같다. 신도시 개발 순서를 보면 유동인구가 상권에 미치는 영향을 알 수 있다. 먼저 교통이나 개발계획에 따라 사업이 진행되지 않아도 시범단지의 경우 사람의 흐름에 따라 바로 상권이 형성된다.이 중심상권은 유동인구가 변하지 않는 이상 그대로 굳어지게 되고 더 큰 유입요소가 발생하기 전에는 상권 발달의 중심이 되는 습성이 있다. 그러나 지하철 개통으로 유동인구의 흐름이 변하게 된다면 상권의 중심축도 이동하게 된다. 따라서 실질적 유동인구는 상권에서 기초적인 요소 중의 하나이다.셋째, 도심과 부도심의 중심에서 외곽방향으로 진행하다 만나는 큰 사거리의 오른쪽 방향과 대각선 방향은 상권이 왕성하다.도심이나 부도심에서 외곽으로 나가서 만나는 큰 사거리는 상권이 충돌하는 지역이다. 따라서 충돌 상권의 경우 중심축이 어디이냐에 따라 상권의 발생도 영향을 받게 된다. 대부분의 상권은 중심으로부터 외곽으로 나가는 오른쪽 지역에 중심축이 일어나는데 도로, 자동차 움직임, 유동인구의 방향등이 영향을 끼치게 되고, 그 대각선 방향도 반대유입 현상으로 상권이 발달하게 되는 것이다.

경영/경제| 2008.05.01| 4페이지| 1,000원| 조회(1,196)

부동산, 상권, 권리금, 상가권리금

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한국 대운하사업의 관광학적 효과

관광학개론주 제한반도 대운하가 관광산업의 미치는 효과제출일2008.4.13성 명관광학개론 과제 “김천지”김 천 지☆ 목 차 ☆Ⅰ. 서론 “한반도 대운하 사업의 개요”Ⅱ. 본론1. 대운하 사업의 관광학적 가치2. 외국의 사례3. 대운하 사업의 관광학적인 긍정적 효과4. 대운하 사업의 관광학적인 부정적 효과Ⅲ. 결론 및 고찰 “한국관광의 문제와 대운하의 방향”Ⅳ. 참고문헌Ⅰ. 서 론이명박정부의 가장 이슈는 "대운하 건설"이다. 이 대운하 건설은 사실상 현대출신의 정치인들만이 생각해 낼수 있는 거시적 국가산업 발전전략으로서, 지하 대동맥인 태백산맥이 아닌, 지표 대동맥이 되는 "강"을 남북으로 연결시킴으로서, 관광산업적 부가가치를 노리고 있다는 점을 알수 있다. 실질적으로 운하가 차지하는 물류산업에서의 부가가치는 그리 크지않다는것이 일발적인 인식이다. 그러나 내륙에 대외적으로 내놓을만한 이렇다할 수변관광시설이 없는 한국으로서, 대운하 자체와 운하외적 자원인 수변관광공간 개발을 통한 지역간, 자원간, 인적 물적 교류는 남북관광산업에 일대 변혁을 일으킬 잠재력을 충분히 가지고 있으며, 동으로는 금강산 관광, 서로는 남북 공단건설사업, 국토의 중간으로는 대운하를 건설하여, 동시에 만들어질 횡적 인프라등과 유기적으로 연결된 통합적 관광부가가치를 만들어 나가겠다는 발상을 현실화시켜 나간다는 방침이다.Ⅱ. 본 론1. 대운하 사업의 관광학적 가치수출 의존도가 높은 우리나라에서 고부가가치 창출효과가 높은 관광서비스산업이 미래성장을 가속화할 수 있을 것으로 보고 있다. 또 관광산업은 석유, 자동차 산업과 함께 세계 3대 산업으로 성장할 수 있다는 전망이 제기되고 있어, ‘고용 없는 성장 시대’의 고용유발산업이 될 것이며, 더욱이 관광산업은 생산의 지역분산이 아닌 소비의 지역분산을 통해 지역생산 및 고용을 유도하고 자연스럽게 지역발전과 국가균형발전을 촉진할 것으로 내다보고 있다.현재 관광산업의 상황이 “각종 규제가 많아 경쟁력이 약화되고 외국자본 투자 유치도 어려운 상황으로 이와 함께 국제적 수준의 관광인프라 및 관광자원이 부족하다”고 분석하고 있다. 즉 외국관광객의 한국방문을 유도할 수 있는 숙박시설, 테마파크 등 인프라가 매우 열악하다는 평가다. 지난해 세계경제포럼에서는 한국의 국가관광경쟁력이 124개국 중 42위로 평가된 바 있지만 향후 한국관광의 잠재력은 충분한 것으로 전망하고 있다.2. 외국의 사례유럽에서는 마르코폴로플랜으로 운송체계를 다양화하려는 노력을 하고 있습니다. 철도, 운하, 항공 등의 운송수단을 효과적으로 연계하는데, 운하가 중요한 역할을 차지하고 있습니다. 유럽은 운하를 중심으로 도로, 철도가 발전되었기 때문에, 운하의 중요성은 이미 오래전부터 인식되어 왔습니다. 도로나 철도의 효율성에 밀려 운하의 가치가 관광산업으로 밀려간 느낌이 있지만, 다시 운하의 경제적 가치와 미래적 가치에 대해 관심이 일어나고 있습니다.중국은 진시황제때부터 이용한 대운하를 이번에 다시 확장 및 정비를 위한 투자를 결정했습니다. 늘어나는 물동량에 대비하고, 관광 및 비즈니스의 중심으로 운하의 물길을 경제적, 산업적으로 그 부가가치를 높이려는 시도라고 볼 수 있습니다.중앙아시아의 카자흐스탄 대통령 나자바에르는 아시와와 유럽의 무역을 확대하기 위해 카스피해와 흑해를 잇는 운하를 제안했습니다. 즉 유라시아운하는 러시아 북부 코커서스의 산악지대를 650KM를 통과하여 두 바다를 잇는 계획으로 나자바에르 대통령은 러시아가 외국기업들이 5년간 약 60억 달러의 예산이 소요되는 이 프로젝트 개발에 참여하도록 지원하도록 촉구했다고 합니다.만약 운하가 투자자를 끌어들인다면, 이 운하는 수에즈 운하보다 4배다 긴 운하가 될 것이고, 파나마 운하의 8배 길이가 될 것이며, 운하가 카자흐스탄을 해양으로 진출하여 중앙아시아의 다른 나라들에게 이익을 가져줄 것이라 주장하고 있습니다.한편 러시아는 기존의 볼가-돈 운하를 확장하는 계획을 추진하고 있습니다. 101KM로 연결된 이 운하는 1952년에 수천명의 죄수들에 의해 완공되었으나, 운하를 통한 다양한 가치를 창출하기 위해 확장계획을 구체화하고 있는 것입니다.파나마운하는 이미 세계 물동량의 폭증으로 최대의 성수기를 맞고 있으며, 그에 따른 운하 확장계획을 차분하게 진행하고 있습니다. 수에즈 운하 또한 이집트 외화수입의 3대 수입원으로 자리 잡으면서, 중요성이 더욱 커지고 있습니다.최근 캐나다의 리도운하가 세계문화유산으로 지정되었습니다. 우리나라의 제주의 화산섬과 용암굴도 문화유산으로 지정되었는데, 운하의 역사적 가치도 함께 평가가 되기도 했으며, 훌륭한 관광자원으로 운하가 각광을 받고 있습니다.3. 대운하사업의 관광학적인 긍정적 효과관광은 고부가가치 서비스산업으로서 외화획득, 고용창출, 투자촉진을 통한 삶의 질 향상, 인적교류와 문화교류를 통한 세계화, 지방화 촉진, 국제적 이해관계 증진 등 다양한 파급효과를 유발함으로써 세계 각국은 국가발전을 위한 수단으로서 관광산업의 육성에 노력을 경주하고 있다. 그러나 우리나라의 관광 유인력이 저하되고 인프라가 부실하여 외국관광객 유치뿐만 아니라 국민관광수요에도 적절히 대응하지 못하여 관광수지가 악화되고 있으며, 관광산업은 경쟁력과 자생력을 상실하고 지방관광은 자율적 성장역량이 부족하여 발전의 한계상황에 와 있다.540Km의 운하가 만들어지면 1,000여Km의 수변 관광권이 생겨난다. 운하관광이야말로 국민소득 3만불 시대에 적합한 개념이 아닐 수 없다. 경부운하는 배가 산으로 가는 기적을 통해 다양한 꿈과 볼거리를 제공한다. 80여m의 리프트, 10여개의 갑문들, 천혜의 자연환경과 어우러진 운하, 그 운하를 유유히 운행하는 크루즈선, 운하 주변의 수많은 볼거리, 즐길 거리, 이런 것들이 동북아시대의 국제관광을 선도할 것이 틀림없다. 한반도대운하는 대한민국의 새로운 이미지를 창출해 나갈 것이며 관광을 체험 형태로 고급화시킬 것이다. 운하권역의 관광 네트워크를 테마 화하여 운하주변 지역의 경제 축을 바꾸고 관광소득을 증가시키는 21세기형 SOC 것이다. 우리는 청계천에서 기적을 목격했다. 콘크리트 숲이었던 청계천에 연간 수천만 명의 내외국인이 몰려들고 있다. 그 청계천의 감격보다 수백 배, 수천 배의 감동이 한반도대운하를 통해 이루어질 것이다.4. 대운하사업의 관광학전인 부정적 효과한반도 대운하에서 주장하는 관광산업 발전의 논리는 그동안 우리에게는 매력있는 관광자원이 많이 없었는데, 운하라는 큰 매력요소를 통해 외래관광객을 유입할 수 있다는 것이다. 그러면서 대운하의 가상 셀프가이드 스케줄로 1일차에 여의도 여객터미널에서 출발하여 충주에 도착하여 정부추진중인 동양의학단지에 입촌하여 숙박하고, 2일차에 보트리프트에서 영상관람 후 3시간 후 문경에 도착하여 조수미 공연을 보고 저녁 10시에 대구에 도착하며, 3일차, 4일차에는 요트 및 크루즈를 이용하여 구미 박정희 기념관, 고령 가야고분, 창녕 우포늪, 함안 및 의령의 3대재벌 창업주 생가 방문 등 각종 주변 관광지를 둘러볼 수 있다는 것이다(“한반도대운하는 부강한 나라를 만드는 물길이다”, 566p).

경영/경제| 2008.05.01| 5페이지| 1,000원| 조회(351)

관광산업, 대운하, 이명박, 관광학개론, 외국 대운하

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Flow cytometry의 임상적 응용(PPT)

Sample SampleLaserCell Analysis and Cell sortingFlow Cytometry intro김천지, 송현창, 윤정아, 박정오, 김진욱*Clinical Application of Flow CytometryFlow Cytometry Introduction, History, Principle, Composition, Clinical Application and RemarkBLSBiomedical Laboratory SciencePULSE서울보건대학 임상병리과, 서울남부적십자혈액원*김천지, 송현창, 윤정아, 김진욱, 박정오Clinical Application of Flow CytometryFlow Cytometry Introduction, History, Principle, Composition, Clinical Application and Remark결 론서 론본 론HistoryPrincipleClinical applicationCompositionResult analysisBack Pain서 론서 론Phase 1Phase 2Phase 3빛의 산란을 의 원리를 이용 자료를 분석 또는 Cell sort세포 내 분석 및 다양한 분야에서 임상 적으로 적용임상적 진단 의 중요성이 높아져 수요 는 더욱 증대Flow CytometryBack Pain본 론본 론Flow CytometerHistoryPrincipleApplicationCompositionHistoryPrincipleApplicationCompositionFlow Cytometer본 론History*************9601970현 재microspectrophotometer를 개발한 것이 시초 (Caspersson)빛의 산란이용 전기신호 검출, 최초 Flow Cytometry (Gucker)형광 항체 개발, Hematology counter 도입 시기형광 측정이 Cytometry에 도입Cell sorting법이 개발, 연구에 사용 (Herzenberg) )History*************9601970microspectrophotometer를 개발한 것이 시초 (Caspersson)빛의 산란이용 전기신호 검출, 최초 Flow Cytometry (Gucker)형광 항체 개발, Hematology counter 도입 시기형광 측정이 Cytometry에 도입Cell sorting법이 개발, 연구에 사용 (Herzenberg)현 재초당 10만개 분석 속도100만개 중 하나의 세포 검출1% 이내의 정밀도로 형광 측정수백 개 분자의 형광 항체 검출PrincipleHistoryApplicationCompositionFlow Cytometer본 론PrincipleFITCFITCFITCAntibodiesPEPEPEAntibodiesPIPIPIAntibodies형광염색 및 FlowSheathSheathSheathPrincipleParameterPEFITCPILaminar Fluidic SheathLaserFSCSSCPrincipleSortingLaser의 자극+++dropletCell+--++-(-)(+)wastePrincipleHistoryApplicationCompositionFlow Cytometer본 론CompositionFluidic systemOptical systemElectronic systemCell sorterFluidic systemOptical systemElectronic systemCell sorterCompositionCell sorterApplicationPrincipleHistoryCompositionFlow Cytometer본 론Application1. Special type cell countHematopoietic stem cells countsCD4 absolute countsReticulocyte countsResidual WBC detectionBasophil counts sorting2. 특이 항원에 대한 항체를 이용한 분석ApplicationCellAgAntibodiesLeukemiaLymphoma immunophenotypinganalysis3. Cellular function 분석ApplicationActivated T helper cell counts = CD3(+) CD4(+) CD25(+) countsActivated T-CellCD25IL-2 recopterActivated T-helper Cell CountCD3CD44. Flow cytoenzymologyApplicationCellEnzyme합성된기질형광세포 내 효소 활성도 검출분해5. Apoptosis AssayApplication빛의산란+Propodium Iondine (PI)객 관 적 정 량 분 석Necrotic cell 과 Apototic cell 감별6. DNA content analysisApplicationTumor CellIndividualizePI stainCell size computer analysisMost NK cells and some T lymphocytesCD56NK lymphocytes and neutrophilsCD16B lymphocyteCD19cytotoxin / supressor T lymphocytes and some NK cellsCD8helper / inducer T lymphocyte and monocytesCD4T lymphocyteCD3monocyteCD14leukocyteCD45Control, Double negative 대조군CD31 FITC / CD45 PE CD45 (+) LeukocyteCD3 FITC / CD19 PE CD3 (+) T-lymphocyte CD19 (+) B-lymphocyteCD4 FITC / CD8 PE CD4 (+) T-helper CD8 (+) Cytotoxin T-CellCD14 FITC / CD56 PE CD14 (+) Monocyte CD56 (+) NK-CellTube 1Tube 2Tube 3Tube 4Tube 5Result analysisResultsCell surface Ag Dead CellFITCPEPIBack Pain결 론결 론예민한 분석단시간내 세포분석소량의 검체이용이용분야 다양새로운 기술도입임상적 응용도 증 가Credit..(Clinical Application of Flow Cytometer) PULSE Student Choen-ji Kim Hyun-chang Song Jung-A Yoon Proffessor Jin-uk Kim Chung-oh Park Special thanks Jung-hwa YooClinical Application of Flow Cytometry김천지, 송현창, 윤정아, 박정오, 김진욱*PULSE서울보건대학 임상병리과, 서울남부적십자혈액원*{nameOfApplication=Show}

의/약학| 2008.03.29| 29페이지| 2,000원| 조회(1,818)

세포, 면역질환, Flow cytometry, Lymphocyte

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Flowcytometry(유세포분석기)의 임상적 응용

유세포 분석기의 임상적 응용김천지 ? 송현창 ? 윤정아 ? 박정오 ? 김진욱*서울보건대학 임상병리과 ? 서울 남부 적십자 혈액원*Clinical Application of Flow CytometryChoen-ji Kim ? Hyun-chang Song ? Jung-A Yoon ? Chung-oh Park ? Jin-Uk Kim*Department of Biomedical Laboratory Science, Seoul Health CollegeSeoul Nambu Red Cross Blood Center*ABSTRACTFlow cytometry was originally established as an automated method for measuring optical or fluorescence characteristics of cells or particles in suspension. In the meantime, flow cytometers have become user friendlier, less expensive instruments with an increasing importance in clinical diagnostics. Besides the classical fields of application, such as immunophenotyping blood cells or analyzing the cell cycle status by measuring the DNA content, novel flow cytometric methods have been developed to identify and to quantify disease-related gene sequences. Here we give an overview of current and future clinical applications. this article demonstrates flow cytometry as a rapid, sensitive, and reproducible색하므로 다양한 물리적, 화학적 특성을 한 검체에서 측정하여 객관적인 계량화가 가능하다는 장점이 있다. 임상적으로는 림프구 특성 분석, Lymphocyte leukemia와 lymphoma의 성상규명, DNA content 분석, 혈소판 연구 및 각종 면역질환의 진단 및 병인 연구에 널리 사용되며 면역학, 세포생물학 및 발생학 분야 등에서 매우 광범위하게 이용되고 있다. 진단검사학적으로는 혈액학적인 cell counter로 그 원리가 우리에게 익숙하지만 그 적용 범위는 많은 차이를 보인다. 연구소에서 많이 사용되어지던 Flow Cytometry가 임상적 검사에 사용되어진 것은 몇 년이 안 되지만 현재 사용되고 있는 검사 종목의 임상적 중요성과 Flow Cytometry에 대한 진단검사학적 응용의 무한한 가능성에 대해 논하고자 한다.Ⅱ. 본 론1. Flow Cytometry 의 발전 역사1930년 스웨덴 Karolinska Institute의 Caspersson이 세포내 핵산과 단백질 양을 측정하기 위해 microspectrophotometer를 개발한 것이 가장 시초이다. 1947년 Northwestern대학(미국)의 Gucker등에 의해 공기를 빠른 속도로 주입하면서 검체를 실려 보내고 입자가 통과하면 빛이 산란되어 photodetector에서 전기 신호를 검출해낼 수 있는 최초의 Flow cytometer가 개발 되었다. 1950년 형광 항체가 개발되었으며 이즈음 hematology counter가 도입되기 시작하였다. 형광 측정이 cytometry에 도입된 것은 1960년대에 들어서서 DNA content 분석을 시도하고 부터였다. 1970년대에는 Herzenberg 들에 의해 fluorescence flow cytometry 와 cell sorting법이 개발되어 살아있는 세포를 분리하여 연구에 사용할 수 있게 되었다.7) 현재는 초당 10만개의 세포를 분석할 수 있으며, 100만개 중에 하나 섞여있는 드문 세포를 찾아낼 수 있고, 1%이내의 정밀도로 rameter data를 만든 후 photomultiplier tube(PMT)로 모여 자료를 컴퓨터에서 처리한다. (Fig. 2)Fig. 1. Fluidic systemFig. 2. Optical system또한, Cell sorting은 전기적 pulse에 의한 진동은 세포 물줄기가 Laser beam과 만난 다음 세포 한두 개를 포함하는 작은 세포 물방울로 떨어져 나오며, charge 된 작은 물방울이 떨어져 내리면서 양극성을 나타낸다. sorting station을 지나가면서 전기적 성질과반대되는 전기판으로 끌리면서 시험관으로 분리된다. (Fig. 3)Fig. 3. Cell Sorting3. Flow Cytometry 의 구성Cytometry는 크게 3 부분으로 구성되어있다. (Fig. 4)첫째는, Fluidic system(유체공학시스템)으로 cell을 sensing point까지 운반하는 기능을 한다. 입자는 sheath fluid의 유액에 싸여서 단일 입자 상태에서 laminar flow 상태(검체의 흐름은 독립적이지만, sheath stream 내에서는 같은 축으로 흐르게 함) 를 유지한다. 둘째는, Optical system(광학시스템)으로 조명시스템과 수집시스템으로 분류할 수 있으며, 조명시스템은 광원으로 Ar Laser(488nm) 와 He-neon Laser(633nm)를 널리 사용한다. Laser를 통과한 입자나 세포들은 각각의 고유의 물리적 성질과 세포성분으로서의 세포막, 세포의 핵, 세포내의 입자, 세포표면의 성질 등의 차이에 의해 산란 정도가 달라 multi-parameter를 이룬다. 이런 parameter는 Froward scatter(1~20의 산란각도, 입자의 크기와 비례), Side scatter(20 이상의 산란각도, 과립정도나 세포 내부 상황과 관련), Fluorescent(20 이상의 산란각도, PE, FITC detector 수집, 입자의 붙은 형광의 강도와 관련)를 나타낸다.셋째는, Electronic system을 결정하고, 골수이식시 투여되는 stem cell 수를 알아본다. 현재는 hematology analyzer로 계수된 leukocyte count에 CD34+ 세포 백분율을 곱해서 CD34+ 세포수를 count 하는 dual platform 방법에서 일정 농도의 fluorescent bead를 sample에 먼저 혼합한 후 직접 CD34+ 세포 수를 count하는 single platform 방법으로 바뀌고 있다.② CD4 absolute countsHIV 감염 환자에서 진단 및 경과 관찰 목적으로 가장 흔히 이용된다.③ Reticulocyte enumerationReticulocyte가 성숙 적혈구에 비해 RNA 함량이 높은 점을 이용 RNA를 형광 염색한 후 계수한다. 염색에 이용되는 형광 염료로는 acridine orange, thiazole orange, auramine O, cyanine dye등이 있다.④ Residual WBC detectionPlatelet이나 packed red blood cell의 QC목적으로 사용한다.⑤ Basophil 수 count 및 sortingbasophil의 새로운 표면 항원 양상인 CD19-CD22+ 이용⑥ Thymic insufficiencyCD3+ cell 수를 count 한다.2) 특이 항원에 대한 항체를 이용한 분석항원들은 주로 세포표면에 표현되며 이들과 결합하는 특이 단 클론 항체를 이용하여 염색하고 형광염료는 이 단 클론 항체에 직접 붙이는 직접법 혹은 이차 항체에 붙여서 간접법으로 염색된다.* Leukemia and lymphoma immunophenotyping을 비롯하여 가장 광범위하게 이용되고 있다.3) Cellular function 분석T cell중 activated T cell은 IL-2 receptor(CD25)를 표현한다. 따라서 활성화된 T helper cell을 count하고자 할 때 CD3+CD4+CD25+ cell을 count한다.4) Flow cytoenzymology세포내 효되고 있다. 원리는 tumor cell을 individualize 시킨 후 DNA 양에 비례하여 염색되는 형광 염료인 propidium iodide 등으로 염색 후 flow cytometer로 각 세포의 형광 크기를 측정 computer program으로 분석한다. 현재까지 여러 가지 목적으로 다양한 형광 염료들을 이용한 cell study 방법이 개발되어 왔다.신선조직은 물론 formalin에 고정 후 paraffin에 포매된 조직도 이용이 가능하다.Ⅲ. 결 론유세포 분석 기술은 어떤 입자나 세포가 유액 상태에서 Sensing point를 지나는 동안 그 입자나 세포의 특징을 분석하는 기술이다. 다시 말해서 입자나 세포는 각각의 크기, 형태, 항원, 또는 성분 등으로 특정 지는데 이 같은 입자의 특성을 2D 또는 3D 평면에 투사하여 각 특징을 가진 입자군의 분포, 빈도를 분석하거나, 어떤 특징을 가진 입자나 세포만을 분류해 내는 기술이다.Flow Cytometry는 단시간에 다량의 세포에 대한 정량적 분석이 가능하며, 형광물질의 분자가 세포 당 2,000개 정도만 존재해도 감지가 가능할 정도로 예민하며 소량의 검체로도 분석이 가능하다는 장점이 있는 반면, 분석하고자 하는 세포가 단세포로 부유되어야만 하고, 설치비용이 고가이며, 고급 운용 인력이 필요하다는 단점이 있다. 하지만, 단점의 보완이 거듭되면서 대다수의 임상에서 이용되어지고 있다.현재 새로 도입되어 이용 분야가 확장될 것으로 예측되는 Cytometric bead array (CBA) 법은 독특한 fluorescent intensities를 가지는 몇 가지의 입자를 이용하여 녹아있는 analytes를 flow cytometry로 측정 하는 방법이다. 각각의 bead는 독특한 fluorescent intensities를 FL3 channel에서 나타내므로 분리 분석이 가능하고 각각의 bead의 크기가 일정하고 분석하고자 하는 물질에 대한 항체가 코팅되어 있다. 따라서 원리는 flow상에서 bead가 E

의/약학| 2008.03.29| 7페이지| 1,500원| 조회(2,227)

세포, 면역질환, Flow cytometry, 유세포분석기, Lymphocyte

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