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그람염색 실험세미나 ppt

발표순서 실험목 적 이론 실험장치 및 시약 실험방법 Q A 출 처실험목적 그람염색의 원리와 방법을 터득한다 그람염색을 통해 주어진 박테리아를 그람양성과 그람음성으로 구분해본다이론 ◆ 그람염색 Christian Gram 이 고안한 특수한 염색방법 미생물을 관찰하기 위해 사용하는 염색법 미생물분류 가능 보라색으로 염색되는 세균을 그람양성균 (+) 붉은색으로 염색되는 세균을 그람음성균 (-)이론 ◆ 세균의 분류 세포벽은 세포의 크기와 형태를 유지한다 . 삼투압에 의한 세포 파열을 방지한다 . 세포벽에는 펩티도글리칸 이 있기 때문에 단단하다 . 펩티도글리칸의 비율에 따라 두 종류로 나눠지며 이것은 세균을 분류하는 가장 기본적 기준이 되었다 .이론 지질다당류 ( Lipopolysaccharide ) 다당류에 지질성분이 결합된 거대분자이론이론 그람염색의 원리 Crystal Violet 염색을 하면 세포벽에 있는 산성물질과 염기성인 Crystal Violet 이 결합하여 그람양성 그람음성 모두 자주색이론 그람염색의 원리 Crystal Violet 과 요오드가 반응하여 CV-I 복합체 형성 에탄올 그람양성균 : 에탄올이 여러 층의 펩티도글리칸을 탈수시켜 분자간의 공간을 좁히기 때문에 CV-I 복합체가 세포 밖으로 빠져 나오지 못한다 . 자주색이 그대로 남아있다이론 그람염색의 원리 Safrain 그람음성균이 분홍색으로 염색 ( 대조염색 ) 그람음성균 : 대부분 인지질로 구성된 외막과 세포막이 에탄올에 쉽게 용해되며 , 한 겹의 얇은 펩티도글리칸 층은 CV-I 복합체를 막을수 없어 탈색실험장치 및 시약 Crystal Violet (CV) 용액 (1 차 염색약 ) 염기성 시약으로써 염색 시 모든 세포가 일단 보라색으로 염색된다 .실험장치 및 시약 요오드 용액 염색된 세균에 요오드 용액을 처리 크리스탈 바이올렛과 요오드가 반응하여 세포 내에 불용성 복합체 (CV-I) 를 형성실험장치 및 시약 사프라닌 용액 (2 차 염색제 ) 자홍색의 염기성 염료 그람음성균이 분홍색으로 염색 즉 , 사프라닌 대조염색 으로 그람양성균과 그람음성균을 구분실험장치 및 시약 에탄올 탈색제 역할을 한다 . 접종루프 미생물을 옮겨 심는 기구의 일종실험장치 및 시약 슬라이드 글라스 알코올 램프실험장치 및 시약 미생물배양액 증류수 핀셋 현미경현미경 사용방법 상을 확대하는 부분 접안렌즈 눈을 대고 관찰하는 부분으로 , 대물렌즈에 의해 확대된 상을 더욱 확대한다 대물렌즈 물체의 상을 1 차적으로 확대한다 초점을 조절하는 부분 조통나사 재물대를 위아래로 움직여 대강의 상을 찾는다 미동나사 조동나사로 찾은 상의 정확한 초점을 맞춘다 빛의 양을 조절하는 부분 조리개 대물렌즈로 들어가는 빛의 양을 조절한다 광원장치 빛을 공급해준다 . 광원장치 대신 반사경이 붙어 있는 현미경도 있다① 조동나사를 돌려 재물대를 밑으로 내린다 ② 회전판을 돌려 가장 낮은 배율의 대물렌즈가 중앙에 오도록 한다③ 샘플을 재물대에 올려놓고 광원 장치로 밝기를 조절 , 대물렌즈를 저배율 에서 고배율 로 알맞게 맞춘다 . ④ 옆에서 보면서 조동나사를 돌려 샘플이 대물렌즈에 거의 닿을 정도까지 재물대를 올린다⑤ 접안렌즈를 보면서 조동나사로 대강의 상을 찾고 , 미동 나사로 정확한 초점을 맞춘다 ⑥ 관찰한다주의사항 현미경을 옮길 때 , 한 손은 손잡이를 잡고 , 다른 손은 받침대를 받친다 반사경이 있는 현미경은 직사광선이 비치는 곳은 피한다 무리한 힘을 주지 않는다 렌즈가 더러울 때 , 렌즈 페이퍼를 사용한다 자물대를 올릴 때 , 샘플이 깨지지 않도록 옆에서 보면서 조작한다실험방법 슬라이드를 알코올로 깨끗하게 닦고 말린 후 , 슬라이드 위에 멸균 생리 식염수에 잘 풀어진 균을 한 방울 떨어뜨리고 넓게 편다 . 공기 중에서 건조시킨 뒤 , 알코올램프 위를 3~4 회 통과시키면서 건조 고정한다 ( 열 고정 ). * 이 때 , 슬라이드 글라스가 너무 뜨거워져서 세균이 손상되지 않도록 주의한다 .Crystal Violet 염색액을 충분히 가하고 약 1 분간염색한다 . - 염기성 색소인 CV 로 염색 시 , 양성 음성 모두 자주색으로 염색 염색액을 버리고 요오드 용액을 충분히 가하고 약 1 분간 반응시킨다 . - 1 단계에서 염색된 세균에 요오드 처리 시 , 반응하여 CVI 형성 .에탄올을 사용하여 탈색시고 증류수로 탈색제를 씻어낸다 . - 알코올 처리시 CVI 용해 . 그람양성균의 경우 , 자주색 그람음성균의 경우 , 무색 *** 너무 많이 탈색 될 경우 , 양성균이 음성균으로 판명될 수 있으므로 주의한다 대조염색인 사프라닌 용액으로 염색한다 - 그람음성균 분홍색 그람양성균은 자주색Q A출처 네이버 백과사전 네이버 블로그 구글 이미지 “ 생명과학” , Roven , 녹문당 , 2008감사합니다{nameOfApplication=Show}

공학/기술| 2012.10.14| 27페이지| 1,000원| 조회(428)

그람염색, 그람음성, 그람양성, 대학생물, 펩티도글리칸

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