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생화학 실험 밀런 닌히드린테스트와 다당류에 대한 요오드 실험

실험보고서- 다당류에 대한 요오드 실험- 닌히드린 시험- Millon Test실험제목 : 다당류에 대한 요오드 실험실험 일시 : 11월 4일시약 및 기구녹말, 글리코겐, 덱스트린, 셀룰로오스요오드용액 - 0.05%의 요오드를 포함한 3% KI수용액시험관, 피펫, 알코올램프, 비커서론 및 원리요오드 test 원리요오드는 다둥류에 흡착되어서 착색물질을 만드는데, 색이 각각 다르다.녹말은 청남색 글리코겐과 덱스트린은 분자의 크기에 따라서 적색~갈색의 색을 나타낸다.실험방법시료액에 묽은 염산 한 방울을 넣은 후 요오드 용액 두 방울을 가하여 나타나는 색을 비교한다. 시료 대신 물을 써서 똑같이 실험을 하여 대조해본다.결과 및 고찰결과녹말셀룰로오스글리코겐덱스트린물진청색노랑진한노랑주황주황고찰요오드가 다당류에 흡착되어서 착색물질을 만드는데 녹말과 요오드가 반응하면 blue-black이라는 진청색 정도의 색이 나타나며실험제목 : 닌히드린 시험실험 일시 : 11월 11일시약 및 기구아미노산 - 글리신, 티로신, 트립토판, 프롤린의 0.1% 수용액단 백 질 - 알부민암모니아수(1%)닌히드린(1% 수용액)시험관, 피펫, 알코올램프, 비커서론 및 원리닌하이드린 [ninhydrin]인단트라이온(indantrione)의 수화물로 암모니아와 1차 및 2차 아민의 존재 여부를 알아내는 데에 사용되는 화학물질이다. 이러한 성질을 이용해서 지문을 찾아내는 데에 사용된다. 아미노산과 반응하면 청자색을 나타내어 아미노산의 발색시약도 쓰인다. 2,2-다이하이드록시-1,3-인단디온 또는 트라이케토하이드린덴수화물(triketohydrindene hydrate)이라고도 한다. 화학식 C9H6O4. 무색의 막대 모양 결정으로 녹는점은 250℃(분해)이다. 프탈산에스터와 아세트산에스터의 결합에 의해 얻어진 다이케토하이드로인덴카복실산에스터를 가수분해와 동시에 탈탄산하여 얻을 수 있다. 아미노산과 반응하여 특징 있는 청자색을 나타내므로 아미노산의 발색시약으로 쓰인다. 또한 펩티드와 단백질이 지문에 남긴 아민이 닌하이드린과 반응하기 때문에 지문을 검사하는 데에 주로 사용된다.[출처] 닌하이드린 [ninhydrin ] | 네이버 백과사전닌히드린 시험의 원리-아미노산, 펩티드 및 단백질은 pH 4~8 부근에서 끓는 물(100℃) 근처에서 닌히드린과 반응하게 되어 자주색이나 붉은색을 띄는 자주색의 착색물질을 나타내게 된다. 착색물질은 종류에 따라 다르다. 제일아민과 NH3도 양성반응을 나타내지만, 이 때는 CO2가 유리되지 않는다.[출처] 닌하이드린 메커니즘 | 구글 이미지 검색닌히드린 시험은 매우 예민하다. 따라서 아미노산이나 단백질의 확인에 사용되며 아미노산의 정량에도 이용되기도 한다.실험 방법시험관에 약 1mL의 시료 용액을 취한 다음 닌히드린 용액을 가하여 물중탕으로 2분정도 가열 하며 색의 변화를 관찰한다. 묽은 암모니아수에 대해서도 똑같이 실험을 하여 색을 비교한다.결과 및 고찰결과2분간 가열한 결과이며 왼쪽부터 글리신, 티로신, 트립토판, 프롤린, 알부민, 암모니아수 이다.고찰단백질, 아미노산은 닌히드린과 반응하여 보라색으로 변하는 물질인데 아미노산은 닌히드린과 만나면 알데히드로 변하게 되며 닌히드린은 히드린단틴으로 변화하게 되고 암모니아가 히드린단틴과 닌히드린과 만나 착색화합물을 만드는 것이다. 보라색으로 변하는 물질은 1차-아미노기를 가지며 오렌지색으로 변하는 물질을 2차-아미노기를 갖는다.황색으로 변하는 물질은 프롤린이 있는데 결과 사진에서 보이듯이 보라색보다 황색으로 변하였으며, 글리신, 티로신, 트립토판, 알부민은 색변화가 보라색이어야 하는데 글리신의 경우 황색에 가깝게 나타났다. 가열을 더 하였더니 보라색에 가깝게 색을 나타내었는데 2분간 가열한 결과 오렌지색을 나타내었다. 닌히드린 반응은 강력한 산화제로 작용하여 아미노기를 가진 물질을 산화시켜 색의 변화를 나타낸다.결론닌히드린 반응을 이용하여 아미노산이나 단백질의 색의 변화를 통해 정성분석하는 방법을 실험을 통해 알 수 있었다.실험제목 : Millon시험실험 일시 : 11월 11일시약 및 기구아미노산 - 글리신, 티로신, 페닐알라닌의 0.1% 수용액단 백 질 - 알부민페 놀 (0.1%)Millon시약- 15%의 H2SO4에 HgSO4를 녹인 용액시험관, 피펫, 알코올램프, 비커서론 및 원리밀론 검사법 [ Millon test ]페놀기의 특유한 정색 반응. 밀론 시약(수은 1g을 발연질산 1ml에 녹이고 물 2ml을 가한다)을 가하고 가열하면 적색을 나타낸다. 단백질의 정색반응으로 이용되며 단백질 내의 티로신이 발색하는 것에 의한다.이 반응에서는 단백질에 진한 질산을 가하게 되면 백색 침전이 생기고, 이것을 가열하면 적색으로 된다. 이 반응은 단백질을 구성하고 있는 티로신 트립토판, 페닐 알라닌과 같은 아미노산의 존재 때문이며 색은 방향족 아미노산의 benzene핵이 nitro화 되기 때문인 것으로 알려져 있다.

자연과학| 2012.05.27| 10페이지| 1,500원| 조회(451)

생화학, 실험보고서, 요오드, Millon, 다당류, 닌히드린, 검출법, 닌히드린 시..

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molisch Test, Anthrone Methode, Fehling Reaction

실험보고서-Molisch TestAnthrone MethodeFehling Reaction실험제목 : 탄수화물(Carbohydrates)Molisch Test , Anthrone Methode, Fehling실험 일시 : 9월 16일시약 및 기구glucose, fructose, galactose, maltose, lactose, sucrose, starch의 1%용액, 진한 H2SO4, Molisch시약(95% 에탄올 100mL 속에-naphthol 10g을 용해시켜 만듬)서론 및 원리글루코스 [glucose]대표적인 알도헥소스(탄소 6개를 가지며 알데하이드기를 가지는 단당류)이며 D-글루코스를 포도당이라 한다. 탄수화물 대사의 중심적 화합물로서 한 분자당 38개의 ATP를 합성할 수 있다.분자식은 C6H12O6이다. D형·L형 2종의 광학이성질체가 있는데, 천연으로는 D형만이 존재하며 이 D-글루코스를 포도당이라 한다. 달콤한 과즙, 동물의 혈액·림프액 등에 유리 상태로 존재하는 외에, 글리코젠·녹말·셀룰로스 등의 다당류, 설탕 등의 소당류 및 여러 배당체의 구성성분으로서, 또한 세포벽의 구성성분으로서 자연계에 널리 존재한다.글루코스는 탄수화물 대사의 중심적 화합물로서 그 이용 경로는 매우 복잡하며, 에너지원으로서 분해되는 경로는 특히 중요하다. 글루코스는 먼저 헥소키나아제의 작용으로 글루코스-6-인산이 되고, 해당과정을 거쳐서 피루브산으로 분해된다. 또한 호기적 조건에서는 TCA회로를 거쳐서 이산화탄소와 물로 분해된다.글루코스는 이러한 세포호흡을 통해 분해되어 에너지를 생산하고, 그 에너지는 ATP의 형태로 저장된다. 이 에너지는 발효·호흡 등에 사용된다. 한편, 필요할 때까지 글루코스를 저장해 두는 경로도 존재한다. 동물에서는 글루코스가 우리딘삼인산과 반응하여 우리딘이인산글루코스가 되고, 글리코젠 합성효소의 작용으로 글리코젠에 흡수되어 저장된다.식물에서도 우리딘이인산글루코스를 거쳐 슈크로스·녹말로서 저장된다. 식물에서의 글루코스 생합성은 다음과 같다. 광 저장된다.동물에서는 간에서 옥살로아세트산으로부터 포스포에놀피루브산을 생성하고, 해당 경로를 거의 역행하여 재합성된다. 대부분의 아미노산이 글루코스로 변환되는 경우는 이 경로를 따른다. 공업적으로는 녹말의 가수분해에 의해 얻을 수 있다. 글루코스는 영양제·강장제·해독제 외에, 감미제로도 사용된다. L-글루코스는 D-글루코스의 이성질체이며, 인공적으로 합성된다.[출처] 글루코스 [glucose ] | 네이버 백과사전과당 [果糖, fructose]보통 프럭토스라고 하는 중요한 육탄당의 하나로, 포도당과 함께 과일 속에 유리 형태로 들어 있거나 포도당과 결합하여 슈크로스 형태로 존재한다. 과당은 당류 중 감미가 가장 강한데 가열 시 3분의 1로 단맛이 저하되는 특징이 있다.프럭토스라고도 한다. 대표적인 케토스(환원기로서 케톤기를 갖는 단당류)이며, 가장 중요한 헥소스(육탄당)의 하나이다. 분자식은 C6H12O6이다. 무색의 흡습성으로, 녹는점 103∼105℃이다. 식물계에 널리 존재하며, 특히 포도당과 함께 과일 속에 유리 형태로 들어 있거나, 포도당과 결합하여 슈크로스로서 함유되어 있다. 벌꿀의 액상부는 대부분 과당이며, 또 국화과식물 속의 이눌린 등 과당으로만 이루어지는 다당류인 프룩탄의 성분으로서, 또한 슈크로스계의 각종 소당류의 성분으로서 존재하나, 배당체 성분으로서는 드물다.동물계에는 적으나 정액의 주요한 당으로서 정자의 에너지원이다. 또 과당은 생물의 당대사(糖代謝)에서 중요한 역할을 하는데, 포도당이 분해되는 경우나 글리코젠으로 합성되는 경우 등은 모두 과당을 거친다. 과당은 당류 중에서 단맛이 가장 강하나, 가열하면 3분의 1로 약해진다.벌꿀·과즙에서 분리되고, 슈크로스·프룩탄의 가수분해 등에 의해서 제조된다. 포도당을 이용하지 못하는 당뇨병 환자용 감미료, 쇠약자나 어린이의 영양제 외에 해독·강심·이뇨제로 사용된다. 또한 감미료로서 식용으로 사용되기도 하나, 값이 비싼 편이다. 또 흡습성을 이용하여 카스텔라·스펀지케이크 등이 마르는 것을 방지하기 위 육탄당(헥소스)의 하나로 글루코스보다 단맛이 덜나는 설탕 유형이다.알도헥소스에 속한다. 천연에서는 유리 상태로 존재하는 일이 드물고, 중합체의 상태로 널리 분포한다. 분자식 C6H12O6. 녹는점은 168℃이다. 흰색 가루로 단맛이 나며, 물에 잘 녹고 결정수를 포함하는 것은 118℃이다. D-형, L-형의 광학이성질체가 있으나, 천연으로는 D-형이 많이 존재한다. 일반적으로 갈락토스라고 할 때에는 D-갈락토스를 가리킨다.D-갈락토스는 생물계에 널리 분포하며, 젖당(락토스)·한천·갈락토만난이나 세균 세포벽의 다당 및 당단백질·당지질 등에 함유되어 있다. L-갈락토스는 한천이나 성게알 표면의 젤리, 달팽이의 점액 속에 있는 다당 등에 함유되어 있다. D-갈락토스는 젖당을 산으로 가수분해하여 얻는다. 가수분해물을 농축하여 냉장고 속에 넣어 두면 D-갈락토스의 결정이 생긴다.생리적으로 중요한 당의 하나로 젖당의 구성 성분이며, 뇌나 신경조직에 다량으로 분포되어 있는 당지질 등, 이것을 구성 성분으로 하는 화합물은 널리 존재한다. 예를 들면, ABO식 혈액형을 결정짓는 것은 적혈구 표면에 있는 당지질의 일종이다. B형 적혈구의 경우, 당지질의 당사슬 끝은 갈락토스이다.이 갈락토스에 α-갈락토시다아제를 작용시키면, 적혈구는 B형의 성질을 잃고 O형의 성질을 보이게 된다. 생체 내에 있는 갈락토스는 UDP-갈락토스피로포스포릴라아제라는 효소의 작용으로 UDP-갈락토스가 되어, 여러 가지로 이용된다. 이 효소가 유전적으로 결핍되면 갈락토스가 이용되지 못하고 혈액 내에 축적되어 지능이 저하된다. 이 병을 갈락토스혈증(galactosemia)이라고 한다.[출처] 갈락토스 [galactose ] | 네이버 백과사전엿당 [─糖, maltose]탄수화물의 일종으로 포도당 두 개가 당체결합(glycosidic bond)으로 결합한 이당류이다.정식명칭은 α-D-글루코피래노실(Glucopyranosyl)-(1→4)-α-D-글루코피래노스(Glucopyranose)이며, 말토스, 맥아당, H22O11이다. 다른 탄수화물과 마찬가지로 엿당을 구성하고 있는 수소와 산소의 원자수 비가 2:1이다. 포도당 두 개가 결합한 엿당에 하나의 포도당이 더 붙어 포도당이 세 개가 되면 엿당-트리오스(malto-triose), 네 개가 되면 엿당-테트로스(malto-tetrose), 다섯 개가 되면 엿당-덱스트린(malto-dextrins)이 되고, 더 붙으면 결국 녹말이 된다. 엿당은 가수분해에 의해 두 개의 포도당으로 분리가 되며, 생체 내에서는 말타아제(maltase)에 의해 가수분해가 일어난다. 강산과 함께 가열 시에도 마찬가지로 수 분 내에 두 개의 포도당으로 분리된다.[출처] 엿당 [─糖, maltose ] | 네이버 백과사전젖당글루코스 1몰과 갈락토스 1몰로 이루어지는 이당류이다. 젖당은 이름 그대로 포유류의 젖, 특히 초유 속에서 많이 발견되며, 그 양은 모유에 6.7%, 우유에 4.5% 정도 함유되어 있다. α, β형의 2종류가 있다.락토스·유당이라고도 한다. 분자식 C12H22O11. β-D-갈락토실-(1,4)-D-글루코스의 구조를 갖는다. 젖당은 이름 그대로 포유류의 젖, 특히 초유 속에서 많이 발견되며, 그 양은 모유에 6.7%, 우유에 4.5% 정도 함유되어 있다. 모유 속에서는 이 밖에도 10종 이상의 소당류가 발견되는데, 이들은 모두 젖당의 골격구조로 가지고 있다. 젖당은 젖 이외에서는 별로 발견되지 않았으나, 식물의 씨에서 발견되었다는 몇 가지 보고가 있다. α, β형의 2종류가 있는데, α-락토스는 약간 단맛이 나며, 1g은 5mℓ의 물과 2.6mℓ의 온수에 녹으나 알코올에는 잘 녹지 않고 클로로폼이나 에테르에는 녹지 않는다.β-젖당은 93.5℃ 이상의 진한 용액에서 결정시키면 생기는데, α-젖당보다 더 달다. 묽은 산이나 효소(락타아제)의 작용으로 가수분해되어 D-글루코스와 D-갈락토스로 되며, 또 젖산균의 작용을 받으면 젖산이 된다. 생합성은 글루코스를 수용체로 하여 UDP(우리딘이인산)-갈락토스로부터 갈락토스를 전이하는 반응에 입체성단백질(allosteric protein)의 일종으로 혈청단백질의 일종인 α-락트알부민을 결합할 때 글루코스를 수용체로 하여 락토스를 합성하며, α-락트알부민이 존재하지 않을 때는 n-아세틸락토사민을 합성한다. 이것은 생물이 갖는 조절기구의 한 보기로, 출산 후에는 α-락트알부민이 증가하여 유아에게 필요한 젖당의 합성이 촉진되는 것이다. 젖당은 유아 영양, 의약의 희석제, 분석화학에서 크로마토그래피의 흡착제로도 사용된다. 또 영양제와 의료용 감미료 및 육아용 조제분유의 배합원료로 이용되고, 페니실린공업에서 발효배양기에도 필요하다.[출처] 젖당 [lactose ] | 네이버 백과사전슈크로스 [sucrose]D-글루코스와 D-프럭토스로 이루어지는 이당류를 말하는데, 광합성 능력이 있는 모든 식물, 특히 사탕수수, 사탕무에 많다.자당(蔗糖) 또는 사카로스라고도 한다. 광합성 능력이 있는 모든 식물에서 발견되며, 특히 사탕수수·사탕무에 많다. 사탕수수에서는 그 액즙의 20%, 사탕무에서는 15%를 차지하고 있으므로, 이들은 슈크로스의 공업적 원료로 이용된다. 이 밖에 사탕옥수수·사탕단풍의 수액에도 많이 함유되어 있다.[출처] 슈크로스 [sucrose ] | 네이버 백과사전기초 이론Molisch TestMolisch 반응은 탄수화물에 대한 일반적인 시험법으로 탄수화물의 황산에 의한 탈수반응으로 furfural or hydroxymethyl furfural 이 생기는 반응이다.Hydroxymethyl furfuralMolisch Test의 메커니즘보라색의 링 모양의 경계가 생김.Fehling Test펠링 반응은 은거울 반응 등과 함께 글루코스 등의 환원당이나 알데하이드처럼 환원력이 강한 물질을 검출하는데 쓰이는 반응으로, 알데하이드나 환원당을 용액에 넣고 가열하면 용액이 붉은 색으로 변하게 된다. 이 변색 반응의 원리는 타타르 산 이온과 함께 착염의 이온상태로 존재하던 푸른 색의 구리이온을 환원시켜 붉은 구리 침전으로 석출시키게 되어 용액이 붉은 색을 띄게 되는 .

자연과학| 2012.05.27| 14페이지| 2,000원| 조회(573)

생화학, 탄수화물, 실험보고서, test, molisch, 단당류, Fehling, Carbohydrates

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ehrlich Test, Biuret Test

실험보고서- Ehrlich Test- Biuret Test실험제목 : Ehrlich TEST실험 일시 : 12월 2일시약 및 기구1. Ehrlich 시약2. 글리신3. 트립토판4. 알부민서론 및 원리엘리히알데히드시험 [ Ehrlich aldehyde reagent, 試驗 ]Ehrlich의 알데히드반응에 사용한다. 많은 처방이 있는데, Watson의 처방은, ρ-디멜티아미노벤즈알데히드 0.7g을 진한 염산 150㎖에 용해하여, 물 100㎖을 가한다. clemens의 처방은ρ-디메틸아미노벤즈알데히드 2g, 진한 염산 50㎖을 물로써 전량 100㎖로 한다. Koziczkowsky의 처방은 ρ-디멘틸아미노벤즈알데히드 2g, 진한 염산 16g을 물로 전량 100㎖가 되게한다. clemens의 처방이 가장 산성도(酸性度)가 높고 반응이 예민하므로 정성시험(定性試驗)에 흔히 사용된다.[출처] 엘리히알데히드 시험 | 네이버 지식사전Ehrlich 시약은방향족 아민화합물 (방향족 화합물에 아민기(-NH2)를 포함하고 있는 화합물이다. 암모니아의 유기 유도체이며, 대표적인 유기 염기이며 일반적으로 방향족 나이트로 화합물을 환원시켜 얻을 수 있다)우레이드(요소의 수소가 아실기로 치환된 화합물)인돌 유도체와 반응하여 색소를 만든다.실험 방법각 시료용액 0.5ml에 2ml의 Ehrlich 시약을 가하고 용액의 색을 비교하여라결과 및 고찰왼쪽부터 글리신 트립토판 알부민고찰세 가지 시료 중에 유일하게 적색으로 변한 것은 트립토판이다. 나머지 두 시료에 비해서 트립토판만 변한 이유는 Ehrlich 시약의 특징에서 알 수 있다. Ehrlich 시약은 인돌 유도체나 방향족 아민, 우레이드 등과 반응하여 색소를 만드는데 트립토판에는 인돌의탄소 때문에 트립토판은 적색으로 변하게 되며 나머지 두 시료는 색의 변화가 없었다.결론트립토판의 인돌의 알파탄소 때문에 Ehrlich 시약과 반응하여 색소가 만들어짐을 확인하였으며, 글리신이나 알부민은 색의 변화가 없는 것으로 보아서 Ehrlich 시약과 반응하여 색소를 만들 요소가 없다는 것을 알 수 있었다.실험제목 : Biuret Test실험 일시 : 12월 2일시약 및 기구1. CuSO4?5H2O2. NaOH3. 알부민4. 글루타티온5. 글리신서론 및 원리뷰렛반응수산화알칼리로 알칼리성으로 한 단백질 용액에 황산구리 용액을 가하면, 청자색이나 적자색을 나타낸다. 이 반응은 -CO?NH- 유무를 알기 위해 사용한다. 단백질용액에 수산화나트륨 용액을 가하고 1%의 CuSO4용액 몇 방울을 가해 흔들어주면 색을 나타낸다. 단백질이나 펩티드를 검출하는 반응이며, 뷰렛이 2가의 구리 이온과 반응하여 보라색의 착화합물을 형성하여 용액의 색깔이 보라색으로 변하는 특성을 이용한다. 단백질 뿐 아니라 펩티드 결합을 가지고 있는 펩티드도 뷰렛반응을 통해 검출할 수 있다.실험방법2 ml의 시료용액에 CuSO4 용액 2방울을 넣은 후 2ml의 NaOH 용액을 가하고 잘 섞어서 용액의 색을 비교한다.

자연과학| 2012.05.27| 7페이지| 1,500원| 조회(275)

실험보고서, 글루타티온, 알부민, ehrlich Test, 글리신, 트립토판, Bi..

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DNP 아미노산의 합성

DNP-아미노산의 합성실험제목 : DNP-아미노산의 합성실험 일시 : 12월 2일시약 및 기구1. 아미노산 - 글리신2. NaHCO33. 1-플루오르-2,4-다이니트로벤젠4. 에탄올 5. 에테르 6. 1N HCL7. 분별깔때기8. magnetic stir bar, 교반기서론 및 원리DNP-아미노산2,4-디니트로플루오로벤젠(DNFB)과 유리아미노산을 약알칼리성으로 반응시켜 조제하는 아미노산. α-, ε-아미노기, α-이미노기 외에 히스티딘의 이미다졸기, 티로신의 히드록실기, 시스테인의 SH와도 반응하여,각각의 디니트로페닐(DNP)유도체를 부여한다.이 반응은 펩티드 및 단백질 분자의 N-말단 아미노산을 확인하는데 이용된다.DNP아미노산의 합성(sanger reaction)친핵성 방향족 치환반응이다.실험방법0.5g의 글리신과 1g의 NaHCO3 을 소량의 물에 함께 녹인 용액에 FDNB용액을 가하고 상온에서 2시간 흔들어준다. 에탄올을 증발시키고 물에 녹이고 여분의 FDNB를 에테르로 추출제거한다. 수용액층에 1N HCl를 가하여 산성으로 하면 DNP-아미노산이 석출된다.결과 및 고찰결과얻어진 시료의 색 - 노랑색얻어진 시료의 무게 - 1.9g고찰유리아미노산이 FDNB와 반응하여 DNP아미노산을 만드는 실험인데 이 반응은 펩티드 및 단백질 분자의 N-말단 아미노산을 확인하는데 이용된다. R-CH2NH3-CO2- 를 물에 녹이고 FDNB와 반응시키면 친핵성 방향족 치환반응으로 DNP아미노산이 생기는데 이 과정을 실험을 통해 알아보았으며 상온에서 2시간 정도 교반기로 교반시킨 다음 물에 녹이고 여분의 FDNB를 에테르로 추출 제거하고 수용액 층에 녹아 나오는데 여기에 산성을 가하게 되면 DNP아미노산이 석출되게 된다. 이렇게 해서 석출된 DNP아미노산의 무게를 측정한 결과 1.9g 의 DNP아미노산이 얻어졌다. 하지만 재결정을 하지 않았기 때문에 순수한 DNP아미노산의 무게라고는 할 수 없다.

자연과학| 2012.05.27| 4페이지| 1,000원| 조회(182)

생화학, 실험, 실험보고서, 아미노산, DNP 아미노산, NaHCO3, 아미노산 합..

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크산토프로테인 시험, pauly 시험

실험보고서- 크산토프로테인 시험- pauly 시험실험제목 : 크산토프로테인 시험실험 일시 : 9월 18일시약 및 기구아미노산 - 글리신 티로신 히스티딘 트립토판의 0.1% 수용액,단 백 질 - 알부민 (1%)페 놀진한 질산NaOH(40%)서론 및 원리크산토프로테인반응 [ xanthoprotein reaction , ~ 反應 ]단백질의 발색반응 중 하나. 검출이나 정성에 이용되지만, 단백질의 정량에는 적당하지 않다. 시료에 질산을 가하고 가열하여 이에 알칼리를 가하면 황색 또는 오렌지색을 띤다. 이 반응은 티로신, 페닐알라닌, 트립토판의 존재에 근거하는 것으로, 이들을 함유하는 대부분의 단백질이 발색을 하게 된다.출처 - 네이버 지식사전크산토프로테인 반응의 원리이 반응에서는 단백질에 질한 질산을 가하면 니트로화 되면서 황색으로 변하는데 이 반응은 단백질을 구성하고 있는 티로신, 트립토판, 페닐알라닌과 같은 아미노산의 존재 때문이라고 알려져 있으며 색의 변화는 방향족 아미노산이 니트로화 되기 때문인 것으로 알려져 있다.실험 방법약 1mL의 시료용액에 같은 양의 진한 질산을 넣고 색의 변화를 비교한다.또 이들 용액을 NaOH로 센 알칼리성으로 하였을 때 색의 변화를 관찰한다.실험 결과시료에 질산을 가하였을 때왼쪽부터 글리신 티로신 트립토판 페닐알라닌 알부민 페놀시료에 질산을 넣은 후 NaOH로 센 알칼리성으로 하였을 때왼쪽부터 글리신 티로신 트립토판 페닐알라닌 알부민 페놀고찰이 반응에서는 단백질에 질한 질산을 가하면 니트로화 되면서 황색으로 변하는데 이 반응은 단백질을 구성하고 있는 티로신, 트립토판, 페닐알라닌과 같은 아미노산의 존재 때문이라고 알려져 있다. 실험 결과를 보면 티로신 트립토판은 황색으로 변하였다. 그러나 트립토판의 색의 변화는 미미했고 페놀의 색도 변화가 있었는데, 색의 변화는 방향족 아미노산이 니트로화 되기 때문이다. 즉, + HNO3/H2SO4 → 가 되어서 색의 변화가 나타나며 주로 황색을 나타낸다. 이것을 바탕으로 단백질의 검출을 할 수 있는 것이다.결론방향족 아미노산이 니트로화 되어서 나타나는 색의 변화를 관찰함으로써 단백질을 검출 할 수 있었다.실험제목 : pauly test실험 일시 : 9월 18일시약 및 기구아미노산 - 글리신 티로신 히스티딘 트립토판의 0.1% 수용액단 백 질 - 알부민 1%술파닐산 - 10% HCl에 1%의 술파닐산을 녹인 용액NaNO2Na2CO3서론 및 원리pauly 반응 원리단백질 용액에 다이조화한 술파닐산 용액을 가한 후에 NaNO2를 가하고 얼음물에서 차게 한 다음 Na2CO3 를 가하면 황색으로 변한다. 이 반응은 티로신, 히스티딘을 함유한 단백질에서 일어나며 이들 아미노산의 벤젠기에 시약이 결합하여 아조계 색소를 형성하기 때문이다.보통 이 방법은 티로신과 히스티딘의 존재를 검출하는데 이용한다.실험 방법1ml의 술파닐산에 2ml 단백질용액을 가하고 혼합 후 얼음물 속에서 차게 한 다음 1ml의 NaNO2 를 가하고 얼음물 속에서 차게 한 다음 2~3분정도 후에Na2CO3 를 넣어 알카리성으로 만들어 주고 색의 변화를 관찰하라결과 및 고찰결과글리신티로신히스티딘트립토판알부민색의 변화x변화x변화x트립토판만 무색에서 밝은 노랑색으로 색이 변하였다.

자연과학| 2012.05.27| 7페이지| 1,500원| 조회(1,242)

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