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TA cloning and transformation 실험 레포트

1. Title:?TA cloning and transformation2. Date:3. Name:4. Purpose: 전반적인 cloning과 TA vector가 뭔지에 대해 알고, TA vector를 이용하여 cloning을 한 후 transformation을 시켜보고 결과를 분석, 정리한다.5. Material:TA cloning (96bp PCR product, promega pGEM-T easy vector system), calculation, ligation mechamism, vector(ori, selectable markers, restriction enzyme cleavage sites)Transformation, competent cell(DH5a), antibotics(ampicillin, kanamycin, tetracycline)LB배지, LB plate6. Method:1) T-vector ligation2) Ligation은 16 ℃에서는 overnight, room temperature에서는 1 ~ 2시간정도 둔다.* Ligation volume setting3) Transformation1. Ligation 반응물 5ul를 Competent cell 50ul가 담긴 tube에 조심스럽게 넣어준다 (pipetting 하지 않는다)2. 얼음에서 30분 동안 반응시킨다3. 42°c의 water bath에서 90초 동안 heat-shock을 준다4. 바로 얼음에 2분 동안 넣어둔다.5. Room temperature에 예열된 LB medium 200ul를 첨가한다6. 37°c에서 1시간 30분 동안 shaking(~150rpm)7. 100ul 정도의 용액을 취해 LB/ampicillin/IPTG/X-Gal plates에 spreding한다.8. 37°C에서 배양기 안에 plates를 엎어서 넣은 후 overnight(18~20h) 시킨다.7. Result:(1. negative) background control(2. sample) (3. positive) control에서는 PCR product는 넣지 않되, insert DNA를 넣은 배지로서 plasmid 가 잘 잘렸는지에 대해 알 수 있다. colony가 나오면 잘 안 잘린 DNA가 있다는 것이다. (2. sample) Standard Reaction은 PCR product를 넣은 배지로서 우리가 알고자하는 DNA가 잘 ligation이 되어있는지에 대해 알 수 있는 것이다. 한마디로, 1번과 3번은 실험하는데 넣는 시약과 배지가 잘 작동하는지에 대해 알 수 있고, 이러한 것은 실험하는데 있어서 매우 중요한 요인이라고 생각한다. 위 결과에서 (3. positive) control에 흰 콜로니가 나왔기 때문에 colony에 잘리지 않은 DNA가 많다는 것을 확인할 수 있으며, (1. negative) background control 또한 흰 colony가 나왔기 때문에 competant cell 자체에도 약간의 오염이 있음을 확인할 수 있다.TA cloning의 원리TA 클로닝은 PCR product를 Taq polymerase 등을 이용해 양쪽 3′말단에 A(adenosine)꼬리를 붙인 다음에 양 말단에 T(Thymine)가 붙어 있는 T vector를 이용해 플라스미드를 만들고 효소로 원하는 삽입부위를 추출한 뒤 원하는 벡터에 집어넣는 것이다. PCR 과정 시 Taq polymerase는 3′ 말단에 항상 이유 없이 A를 붙인다 .프라이머를 만드는 in vitro DNA synthesizer로 DNA를 합성하는 과정은 생체 내에서와는 달리 3′→5′ 방향으로 진행되는데 이 과정에서는 5′에 phosphate가 붙을 수 없다. 하지만 합성한 프라이머에 polynucleotide kinase를 이용하면 5′-phosphate를 달 수 있다.DNA Ligation : 조각난 DNA를 ligase로 이어붙이는 것ligation이란 DNA 복제 과정에서 새로 합성된 5′인산기와 인접해 있는 새로운 DNA 조각의 3′ 수산기를 결합시키는 문제가 되지 않는다.DNA ligase는 대장균의 균체 내에도 존재하나 T4 phage가 생산하는 ligase가 강력하여 보통 이것을 사용한다. 이 효소는 DNA의 절단점이 3'-OH말단과 5'-인산 말단으로 인접되어 있는 경우 이를 연결한다.LB plate ( Luria - Bertani medium)LB 배지는 실험실에서 가장 많이 사용하는 배지 중 하나로 보통 세균을 키울 때 많이 사용한다. 곰팡이나 방선균을 키울 때는 주로 밀기울을 이용한 탄소원이 주가되는 배지를 사용한다.LB 배지는 트립톤 10g, yeast extract 5g, Nacl 10g에 D.W 850ml를 넣어 완벽하게 녹여준다. pH는 7 (6.5~7.5) 사이로 맞추는 것이 좋은데 pH가 높을 경우 Hcl을 넣고 pH가 낮을 경우 NaOH를 넣어주고 메스실린더로 최종 부피를 1L로 맞춘다. 고체 배지를 만들 경우 1.5%의 microAgar을 넣어주며 액체배지를 만들 경우 넣지 않는다. 멸균을 위해 Autoclave (120°, 20분) 한 후 어느 정도 식힌다. 고체 배지의 경우 clean bench에서 LB배지를 plate에 20ml 정도씩 분주한 후 뚜껑을 조금 열어 굳힌다. 고체배지가 다 굳으면 랩으로 싸주거나 파라필름으로 감아 준 다음 보관한다.트립톤은 단백질을 산이나 알칼리 효소에 의해 불특정 무작위로 분해해 가용성물질로 만든 것으로 분해 시에 트립신을 이용해 생성시킨 펩톤을 트립톤이라 한다. 아미노산을 공급해줘 질소원으로 이용된다.yeast extract는 이스트를 갈아서 건조시킨 것으로, 분리하는데 시간과 비용이 많이 들어 성분은 밝혀지지 않았다. 미생물이 자라는데 필요한 필수아미노산이나 인지질, 비타민 등 영양물질을 제공 한다. yeast extract를 넣어주면 균이 잘 자라기 때문에 계속 사용하고 있다.Nacl은 배지의 삼투압을 유지해 세균들이 터지지 않게 하기 위해 넣는다.TransformationTransformation(형질전환)이란 DNA를 bacteria 에서는 prokaryote인 E.coli를 사용하므로 'transformation'이라고 한다.9. Project:purification of plasmid DNA (Bacteria)1.kit 회사 cat No., yield등 자세히 쓰시오PureLink™ HiPure BAC Buffer Kit의 catalog number: K210018Low-Endotoxin Plasmid DNA Isolation KitsPureLink Low-Endotoxin kits enable rapid and fast purification of ultraclean plasmid DNAInvitrogen PureLink Low Endotoxin Plasmid Purification Kits offer researchers two technologies to isolate transfection-grade plasmid DNA. The PureLink HiPure Low-Endotoxin Plasmid Purification mega and giga kits use an anion-exchange membrane technology that is a novel proprietary method to perform plasmid DNA isolation in about half the time of current standard protocols using anion exchange resin columns. Alternatively, the PureLink Fast Low-Endotoxin Plasmid Purification maxi and midi kits utilize a fast advanced-silica membrane technology that dramatically reduces purification protocol to around 30 minutes. In addition, the advanced silica technology requires no alcoholThe fast and simple protocol is designed to provide up to 0.4 mg (Midi prep) and 1.5 mg (Maxi prep) of high-quality low-endotoxin plasmid DNA suitable for standard transfection of robust cell lines and applications such as PCR, in vitro Transcription, Cloning, and Sequencing.?Substantial time savings?fast Advanced-Silica Technology requires no alcohol precipitation and when used in combination with the vacuum assisted workflow provides high-purified low-endotoxin plasmid DNA in as little as 30 minutes?High yields?isolate up to 0.4 mg (midi prep) or 1.5 mg (maxi prep) of high-quality plasmid DNA?Low-Endotoxin DNA?obtain plasmid with less than 1 EU/ug, ideal for standard transfections and all molecular biology applications (e.g. PCR, Cloning, Sequencing, etc.)?Colored buffers?help to provide easy step by step process to obtain high quality low-endotoxin plasmid purificationPureLink HiPure Low-Endotoxin Plasmid Purification kitsThe PureLink HiPure Expi Plasmid Megaprep and Gigaprep kits iure.

자연과학| 2018.11.15| 7페이지| 1,500원| 조회(568)

실험, TA cloning and trans, TA cloning 실험레포트

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SDS PAGE 실험 레포트

1. Title:?SDS-PAGE2. Date:3. Name:4. Purpose: sample을 SDS-PAGE gel에 running 하여 induction condition을 확인한다.5. Material:BSA(66.5KDa) protein 10% SDS-PAGE gel, protein size marker (Xpert Prestained Protein Marker p8502-025)6. Method:① induction test한 sample 20㎕와 2x S.B 20㎕를 잘 섞어준다.② 끓는 물에 5min boiling③ sample은 gel running하기 전까지 ice에 보관④ SDS-PAGE gel만들기⑤ boiling한 sample을 gel에 15㎕씩 loading⑥ 70V로 gel running⑦ stacking이 잘 되면 150V로 gel running⑧ staining 40min, destaining하여 gel 확인7. Result:위의 전기영동 사진은 Sample loading 후 Coomassie 염색한 것이다.size marker를 보고 내린 sample의 크기는 약 55~72이나 55에 가까운 분자량을 가지고 있다.?8. Discussion:①SDS-PAGESDS-Polyacryl amide gel electrophoresis(SDS-PAGE)는 분자량의 측정 및 단백질 분석에 많이 이용되는 방법이다. SDS(sodium dodecyl sulfate)는 음극(-)전하를 띈 detergent로 단백질의 분자량에 비례해서 단백질에 흡착한다. 전기염동의 경우 분자량과 물질의 전하가 이동하는 정도에 영향을 주지만 SDS를 사용하면 (-)전하에 의해 물질의 net charg가 없어지므로 분자량에 의해서만 불질이 이동하게 된다. 분자량 측정시에는 이미 분자량을 알고 있는 표준 단백질을 사용하며, SDS-PAGE 완충 용액 system은 SDS-phosphate(continuous)system과 SDS-discontinuous system이 있으며, 현재 가장 많이 사용되고 있는 system은 Laemmli 방법으로, 이 방법은 누적(stacking)gel, 분리(separating)gel 환충 용액과 reservoir 완충용액이 모두 다르며, 2.7%의 bis 를 사용한다.보통 SDS-PAGE는 두 가지의 다른 gel이 붙어있는 상태인 Disc(discontinuous pH)gel 전기 염동으로 시행하게 된다. 이것을 사용하면 단백질 시료를 gel에 넣었을 때 모든 시료가 같은 점에서 출발할 수 있도록 압축이 되기 때문에 두 gel의 농도나 pH가 다르게 설정되어 있다. 여기서 윗부분의 gel은 stacking gel이라 부르며, acryl amide의 농도는 주로 3~5%이고, pH는 6.5를 주로 쓴다. 아랫부분의 gel은 separating gel(또는 running gel, resolving gel)이라고 부르며, 분리하고자 하는 단백질의 크기에 따라 acryl amide 농도를 6~15%로 주로 사용하고 pH는 8.5를 주로 쓴다. 이러한 SDS gel을 이요한 방법은 낮은 이온 강도에서 잘 녹지 않는 단백질 분석에 이용될 수 있으며 현재 모든 종류의 단백질에 보편적으로 사용되고 있다.②-Stacking gelGlycine 이온은 net charge가 0이 되는 pH값이 6.2인데 stacking gel의 경우 pH가 6.8이므로 이로 인해 Cl-와 glycine 간의 이동속도의 차이가 생기게 된다. Cl-, 단백질, glycine은 모두 (-)를 띄게 되는데 Cl-는 그 분자량이 아주 작기 때문에 가장 빨리 내려가게 되고 glycine은 일부만 (-)를 띄기 때문에 이동속도가 가장 느리게 된다. 따라서 이동속도는 Cl->단백질>clycine의 순서가 된다.Stacking gel 상에서 Cl-와 glycine간의 이동속도 차이는 두 이온 사이에서 발생하는 high voltage gradient의 영향을 받게 된다. 전기영동으로 인한 전기장 뿐만 아니라 이 두 이온 사이의 전기장이 또 한번 생김으로 해서 이 현상으로 인해 두 이온 사이에 놓인 단백질들은 그 이동속도가 매우 빨라지게 되어 단백질들은 거의 동일한 속도로 내려가게 된다. 이로 인해 단백질들은 일직선으로 내려가게 되고 running gel에 들어가기 전에 같은 출발선상에 위치하는 효과를 내게 된다.-Running gel (Separating gel)Running gel은 stacking gel과는 달리 pH가 8.8이기 때문에 glycine이 완전히 이온화되게 된다. 이동속도가 Cl->clycine>단백질로 바뀌기 때문에 Cl-와 glycine 사이에 형성되었던 high voltage gradient가 거의 사라지게 되고 단백질의 이동은 자신의 분자량에 영향을 받게 된다. 또한 acrylamide의 농도가 높아져 gel 내부의 그물구조가 더욱 촘촘해 지는 것도 단백질들의 이동속도 차이를 더욱 높인다.Running gel의 acrylamide 농도를 이용하여 단백질의 이동속도를 조절할 수 있다. 원하는 단백질이 분자량이 큰 경우에는 acrylamide의 농도를 낮춰서 분자량이 큰 단백질들이 빠르게 이동할 수 있게 하고, 분자량이 작은 경우는 농도를 높여서 단백질들의 이동속도를 낮출 수 있다. 따라서 sample의 분자량에 맞는 gel의 퍼센트를 선택하는 것도 중요하다고 할 수 있다.③사용되는 buffer(1)2X(or 4X, 10X) SDS gel-loading bufferprotein sample을 loading buffer와 섞은 후에 loading을 하게 되며 SDS, 2-mercaptoethanol, glycerol이 포함되어 있다.(2)1X Tris-glycine electrophoresis bufferReservoir biffer라고도 부르며 SDS, Tris, Glycin으로 이루어져 있다. 전기를 흐르게 하는 전해질 용액으로 gel의 양족 끝을 이 용액으로 채워 주게 된다.(3)Loading buffer (5X Sample buffer): 전기영동시 단백질을 loading buffer와 섞는데, 이는 단백질이 파란색을 띠게 하고 단백질이 퍼지지 않고 가라앉도록 도와주는 역할을 한다.④TEMEDTetramethylenthylenediamine(CH3)2NCH2CH2N(CH3)2의 약자로서 ammonium persulfate로부터 생기는 자유 radical의 생성을 촉매하여 acrylamide와 bisacrylamide의 polymer형성을 촉진 시킨다. TEMED는 자유염일 때에만 작용하기 때문에 낮은 pH에서는 pomer형성이 방해 받는다.⑤APS(ammonium persulfate)

자연과학| 2018.11.15| 4페이지| 1,500원| 조회(597)

SDS, 생화학 실험, SDS PAGE

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감시와 처벌 에세이

권력에 저항하는 행동, 우리가 가져야할 자세1. 서론1.1 배경설명푸코는 신체에 대한 권력의 작용과 그 이유, 그 권력의 기술적인 변화를 얘기함으로써 오늘날의 권력의 특징, 그 권력이 어떻게 순종적인 신체를 만드는지를 설명한다. 권력은 개인이 태어나기 전부터 존재했기 때문에 개인은 그 구조를 내면화시키고 당연하다고 생각하게 되면서 자발적으로 거기에 순종하게 된다. 규율중심의 권력은 공간과 시간을 분할함으로써 신체를 조작하고, 능력을 세분화하여 조직한다. 이러한 과정이 반복되면서 권력은 개인을 감시하고, 훈련, 교정하는 등의 미시적 작용을 하게 된다. 그렇게 오늘날의 보이지 않는 권력은 사회 전면에 영향을 미치는 힘으로서 효율적으로 개인의 신체를 조작하고 순종하게 만들었다.푸코는 여기서 구조주의를 눈에 띠게 서술하고 있다. 권력은 인간에게 있어 필연적인 부분이며, 인간은 태어나기 전부터 존재한 권력에 끊임없이 영향을 받으며 살아간다. 때문에 당연하다고 느끼는 모든 것이 권력에 영향을 받은 것이며, 이것에 독립적인 존재는 없다는 것이다. 국가 권력뿐 아니라, 관습, 관념 등이 권력이 될 수 있으며, 규율에 따른 행동조차 권력일 수 있다.1.2 주제선정이유모든 대상의 주체는 그 본래의 성질에서 온다고 믿고 있던 필자는, 푸코의 『감시와 처벌』을 읽고 구조주의에 대해 생각해보게 되었다. 어렸을 적부터 배웠던 모든 것들이 사회의 영향을 받은 것이며, 주체적으로 한 선택마저 권력과 독립적일 수 없는 존재라는 것에 대해 구조주의를 반대하지 않는다. 인간은 사회적 동물이며, 끊임없이 무리 짓고, 사회를 형성하며 살아가기 때문에 어느 곳에서나 사회 속 권력은 존재하고 그 영향은 무시할 수 없다는 것을 알 수 있었기 때문이다. 하지만 남아선호사상에서 페미니즘이라는 단어가 나오기 까지 인간은 꾸준히 지식을 쌓고, 성적 차별이 아무런 근거가 없다고 알게 되는 순간, 관념 속에서 벗어나며 인간은 주체적인 삶을 살아갈 수 있다고 생각한다. 그러한 생각을 근거로 우리가 어떻게 변화되고 있는 사회에 살고 있는가를 고찰하고, 이러한 근대사회를 살면서 가져야 되는 문제의식에 대해 서술하고자 한다.2. 권력에 저항하는 방법, 우리가 가져야할 자세2.1 푸코의 관점과 근대사회에서의 권력푸코는 『감시와 처벌』3부에서 규율과 순종에 설명한다. 여기서 “규율은 신체의 활동에 대한 면밀한 통제를 가능케 하고, 체력의 지속적인 복종을 확보하며, 체력에 순종-효용의 관계를 강제하는 이러한 방법”을 뜻한다. 또한 “규율은 신체에 대한 구속의 강화를 지향할 뿐만 아니라 하나의 메커니즘 속에서 신체가 유용하면 유용할수록 신체를 복종적으로 만들” 수 있다. 푸코의 이러한 규율을 통해 보다 강제적인 권력에 대해 알 수 있다. 이 책에서는 규율에 대해 4가지 성질을 얘기하고 있다. “(공간배분에 의한) 개체 중심성, (활동의 규범화에 의한) 유기성, (시간 축적에 의한) 생성성, (힘의 조립에 의한) 결합성”이 있다.특히 규율의 성질 중에서 분할의 기술은 폐쇄성에 대해 설명하는데, 이것은 근대사회의 군대와 학교를 예시로 들 수 있다. 학교에서는 동일한 나이의 사람들을 한 곳에 모아놓고(개체 중심성), 같은 복장을 통해 통일성을 주고(유기성), 시간표와 교칙을 통해(생성성) 규율을 정한다. 이렇게 학생들은 학교라는 곳에서 선생님의 말씀을 듣는 것을 당연시하게 여기는데, 이것은 학생들에게 있어 권력이 되는 것이다.이렇듯 권력은 눈에 보이기도, 안보이기도 하는 것이다. 눈에 보이지 않는 권력 중에서는 여태껏 남아있는 관습과 관념 등이 있다. 특히나 우리나라 같은 경우, 몇 년 전까지만 해도 있었던 남아선호사상과 어른을 공경해야한다는 것이 보이지 않는 권력, 규율로서 작용하고 있다. 또한 외국의 같은 경우, 백인우월주의 같은 것이 권력이라고 볼 수 있다. 이것은 아무런 근거도 없는 주장이고, 백인이 다른 인종들을 억압하고 통제하기 위해 만든 규율일 뿐이다. 백인들은 흑인들이 일자리를 갖는 것도, 교육을 받는 것에도 통제하며 이들을 사회의 하위계층으로 전략하게 만들었고, 보다 더 쉽게 억압하길 원했다. 하지만 링컨의 노예해방과 마틴 루서킹과 같은 인권운동가에 의해 흑인은 전보다는 나은 삶을 살게 되었다.그렇다면 권력은 나은 방향으로 변화될까? 성적 차별에 의해 ‘페미니즘’이라는 단어가 등장했다. 이것은 여성의 권리를 평등하게 하는 여러 형태의 사회적인 운동을 말하는 것으로 요즘 많은 시사성을 담고 있다. 하지만 사람이 모이고 또한 그 집단이 커지게 되면 권력이 형성되는데, 이것은 꼭 올바른 방향으로 흘러가진 않는다. 성 평등이 또 다른 성차별을 낳을 수 있으며, 나 자신은 페미니즘에 동의하지만, 이러한 페미니즘의 단체는 옳지 못한 방향으로 주장하고 행동할 수 있다.이렇듯이 우리는 근대사회에서 권력에 저항하는 단체가 또 다른 권력이 되고, 이것이 꼭 옳지 않다는 것을 몸소 느끼고 있을 것이다. 그렇다면 우리는 이렇게 권력이 변화되는 사회에 살면서 어떻게 생각하고 행동해야 하는가?2.2 권력에 대한 저항, 레지스탕스당연하다고 생각하는 것이 사회가 만든 것이라면 어떡하겠는가?푸코는 사람은 사회의 영향력에서 벗어날 수 없음을 애기하고 있다. 또한 권력에 저항하는 생각을 가진 것조차 권력 속에서 생각한 것이기 때문에 권력에 기반을 둔 생각일 수 있다는 것을 주장한다. 그렇다면 사람은 어떻게 살아가야하는가? 수많은 사람들은 권력 속에 살아가며 그 권력의 꼭대기에 자신이 있기를 바라고 있다. 또 다른 사람들은 권력 속에서 안정적인 위치에 만족한 채 안주하기를 바라고 있다. 전자, 또는 후자가 나쁘다고 말할 수 없으며, 그것이 옳은 방향이라고도 말할 수 없다.『감시와 처벌』을 읽고. 사람의 생각조차 사회의 일부분이라는 것에는 동의한다. 하지만 권력에 저항하는 선택과 생각이 있었기에 사회의 발전이 이루어 졌다고 생각한다. 만약 권력 속에서 안주하며 살아가는 사람만 존재하였다면 개혁과 발전을 이루기는 힘들었을 것이다.‘레지스탕스’라는 단어는, 권력에 저항하는 단체를 뜻하며, 더 나아가서는 저항자체를 의미하기도 한다. 권력에 저항하는 것은 자신이 가지고 있는 위치와 권력을 잃을 각오와 함께 하는 것이다. [발전>자신의 위치, 권력]일 때 가능하다는 것이다. 자신의 짧은 삶보다 후생의 나은 세상을 만드는 것에 의의를 두며, 우리는 이들을 영웅, 또는 위인이라고 칭한다. 또한 권력에 높은 위치에 있더라도 끊임없이 저항하는 사람들도 존재한다. 이들은 자신의 위치가 남들과 다를 바 없고, 남들보다 높은 권력에 위치해있더라도, 자신이 위치한 권력에 끊임없이 의심을 하고 행동으로 실천하였다는 것이다. 여기서 필자는 푸코가 말하는 구조주의와는 다른 관점으로, 권력에 저항하는 것 자체는 자신이 주체가 되어 생각하고, 옳음과 옳지 않음을 판단하는 것으로 본다.하지만 여기서도 권력은 존재하게 된다. 저항하는 집단이 생기고, 그 크기가 커지게 되면 또 다른 권력이 생겨나게 된다. 그리고 이 권력의 모습은 자신이 저항했던 권력의 모습과 비슷한 양상을 띠게 될 수 있다. 하나의 올바른 생각이 다수의 지지를 받고, 그 생각이 권력을 얻게 되면 변질될 우려가 있다는 것이다. 그리고 이것은 높은 확률로 발생하게 된다. 이곳에서의 권력자는 모두 자신의 위치를 의심하고, 올바른 방향을 제시해야 하지만, 많은 경우가 그렇지 않고, 자신의 권력에 만족하며 새로운 규율을 만들고자 한다. 이렇게 또 다른 사회가 구성되고, 규율을 만들어 사람들이 자신의 생각대로 순종하길 바란다. 이렇듯 권력에 대해 저항하고자 하는 ‘레지스탕스’에도 불구하고, 다시 권력은 형성되며, 그 권력에 따른 규율들은 사람들을 감시하고 통제하는 수단이 된다.여기서 중요한 것은 다시 권력 속으로 들어오기 때문에 저항하는 것 자체의 의미가 없다는 것이 아니다. 권력에 저항하는 것 자체는 자신의 위치와 권력에 대해 의심하고, 올바른 길을 생각하고 행동하는 데 의미가 있다. 자신이 옳지 않은 권력 속에서 살아가고, 자신을 제외한 모두가 권력지향적인 삶을 살아간다 해도, 자신은 권력에 영향을 받고 있는가를 끝없이 의심하는 자세는 사회가 주체가 아닌 자신을 주체로 이끌 수 있을 것이다. 그리고 권력에 저항하여 올바른 길로 이끌어 낸다면 그 끝이 다른 권력을 형성한다하더라도 우리는 역사의 발전을 한 발자국 이룬 것이며, 그것만으로도 우리는 주체적인 삶을 살아갈 수 있다는 근거가 될 것이다.2.3 변화하는 근대사회에서 가져야할 자세끊임없이 변화하고 있는 권력 속에 살고 있는 우리들은 학생으로서 어떠한 자세를 가져야 할까?

인문/어학| 2018.11.15| 5페이지| 2,500원| 조회(577)

감시와 처벌, 경제와 사회 세미나, 감시와 처벌 에세이

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감시와 처벌 토론문

감시와 처벌 토론문논제1) 권력에 대해 개인은 어떻게 행동해야하는가?푸코는 신체에 대한 권력의 작용과 그 이유, 그 권력의 기술적인 변화를 얘기함으로써 오늘날의 권력의 특징, 그 권력이 어떻게 순종적인 신체를 만드는지를 설명한다. 권력은 개인이 태어나기 전부터 존재했기 때문에 개인은 그 구조를 내면화시키고 당연하다고 생각하게 되면서 자발적으로 거기에 순종하게 된다. 규율중심의 권력은 공간과 시간을 분할함으로써 신체를 조작하고, 능력을 세분화하여 조직한다. 이러한 과정이 반복되면서 권력은 개인을 감시하고, 훈련, 교정하는 등의 미시적 작용을 하게 된다. 그렇게 오늘날의 보이지 않는 권력은 사회 전면에 영향을 미치는 힘으로서 효율적으로 개인의 신체를 조작하고 순종하게 만들었다.그렇다면, 우리는 개인으로서 이러한 권력에 대해 어떻게 행동해야할까?논제2) 권력에 대한 저항이 진정한 자유를 위한 투쟁이라고 할 수 있는가?권력은 인간에게 있어서 필연적인 부분이다. 개인이 태어나기 전부터 권력은 개인과 긴밀하게 연결되어 사회화를 거치는 동안 끊임없이 내면화된다. 때문에 권력은 보이지 않으며, 보고 있어도 그것이 권력인지 인지하지 못하고 작용하고 있으나 느끼지 못한다.권력은 단순히 국가 권력만을 뜻하지 않는다. 저항하는 집단이 생기고, 그 크기가 커지게 되면 또 다른 권력이 생기게 되면서 이는 자신이 저항하고자 했던 권력과 비슷한 모습을 띠게 된다. 이러한 저항은 다수의 지지아래 정의, 혹은 선으로 받아들여진다. 때문에 그 새로운 권력에 순종하는 개인은 그들의 논리를 내면화 시키고, 자신은 논리적인 사고를 통해 그 집단을 자율적으로 선택하고 따른다고 믿는다. 결국 권력에 대한 저항은 새로운 권력에 대한 순종으로 이어진다.

인문/어학| 2018.11.15| 1페이지| 1,000원| 조회(382)

권력, 감시와 처벌, 진정한 자유, 감시와 처벌 토론문

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ABO식 혈액형 판별 및 혈구 관찰

1. Title : ABO식 혈액형 판별 및 혈구관찰2. Date :3. Name :4. Purpose혈액 속의 혈구 세포를 관찰하고 각 세포의 형태적 차이와 기능을 알아본다.3개의 복대립 유전자에 의해 지배되는 멘델의 유전원리를 이해하고, 동시에 본인의 현액형의 판정과 A형, B형, O형 및 AB형의 유전자 빈도를 조사한다.혈액형의 종류는 각종 응집원과 응집소의 응집반응에 의하여 결정되는데 응집원은 적혈구의 세포막에, 응집소는 혈장 속에 존재하며 이러한 반응을 일으키는 물질은 모든 개체 속에 동일하게 존재하는 것이 아니라 개체에 따라 다르기 때문에 한 개체의 혈구와 혈장 속에 존재하는 물질의 쌍은 다른 개체의 혈액과 반응할 수 있게 된다. 본 실험에서는 ABO식 혈액형의 검사방법과 유전자 빈도를 조사해 본다.ABO식 혈액형은 사람의 혈액형 중 가장 먼저 발견된 것으로, 수혈과 깊은 관계가 있어 임상의학에서 중요하게 취급되고 있다. 그리고 이 혈액형은 3복대립인자에 의해 지배되는 멘델의 유전원리에 따라 유전되며, 환경의 영향으로 혈액형의 변화가 없기 때문에 멘델집단에 있어서 유전자 빈도를 추정하는 데 편리하다.표1 - 사람의 혈액형표 현 형인 자 형응 집 원응 집 소OOO없음anti-A anti-BAAA 또는 AOAanti-B(β)BBB 또는 BOBanti-A(α)ABABA 와 B없음표2 - 혈액형의결정실험용 혈액표 준혈 청표 현 형anti-A (α)anti-B (β)1+-A2++AB3--O4-+B5. Materials항 A 혈청(anti-A serum, α), 항 B 혈청(anti-B serum, β), 란셋, 70% 알코올, 탈지면, 슬라이드 글라스, 광학현미경, 커버글라스, Giemsa staining solution, DW6. Methods< 혈액형 판별 >① 알코올을 이용하여 손가락 끝을 깨끗이 소독한다.② 란셋을 이용하여 손가락 끝을 찔러 혈액을 채취한다.③ 채취한 혈액을 슬라이드 글라스 위에 적당히 올려 놓는다.④ 혈청을 이용하여 응집반응을 관찰한% 에틸알코올로 소독한 후 일회용 란셋으로 찔러 혈액이 나오게 한다.② 슬라이드 글라스 끝쪽에 혈액을 한 방울 떨어뜨리고 커버 글라스를 이용하여 얇게 도말한다.③ 도말된 혈액을 air dry.④ 슬라이드 글라스에 김자 염색액을 한 방울 떨어뜨리고 3분간 염색한다.⑤ 슬라이드 글라스 뒷면에 물을 20초 정도 흘려서 염색액을 조심스럽게 씻어 낸다.⑥ 물기를 제거한 다음 커버 글라스를 덮고 현미경으로 관찰한다.⑦ 적혈구와 백혈구의 모습을 관찰하고 백혈구의 종류를 확인한다.7. Results< 혈액형 판별 >anti-A와 anti-B 둘다 응집반응이 일어났으며 anti-D와도 응집반응이 일어났다.anti-A에는 응집반응이 일어났지만 anti-B에는 응집반응이 일어나지 않았다. anti-D에는 응집반응이 일어났다.400배율1000배율400배율1000배율검은색원으로 표시된 곳이 염색된 백혈구가 있는 곳이다. 응고된 세포의 400배율, 1000배율에서는 염색된 혈구는 관찰되었으나, 옆의 적혈구가 뭉게보일정도로 응고가 진행되어 어떤 종류의 백혈구인디 가늠할 수 없다. 응고가 일어나지 않은 세포의 400배율, 1000배율에서는 비교적 정확한 백혈구들과 적혈구를 관찰 할 수 있었으며, 이중 1000배율에서 관찰된 백혈구는 호중구로 보인다.8. Discussion이번 실험은 혈액형에 대해서 배우고 혈액형을 판별해보는 실험이었다. 실험 방법에는 혈구조사에 대한 정보도 포함하고 있지만 시약이 없는 관계로 혈구 관찰 실험은 진행하지 않았다.혈액형 판별의 종류에는 여러 가지가 있다. Rh식 혈액형, ABO식 혈액형, MN식 혈액형 등이 있다. 이 중에서 우리는 Rh식과 ABO식 혈액형을 판별해 보았다.먼저 ABO식 혈액형 판별에 대해 알아보자. ABO식 혈액형은 혈액의 적혈구 표면에 있는 항원과 혈액 속의 항체에 의해 구분되는 것으로, 크게 A형, B형, O형, AB형의 4가지 형태가 있다. A형의 적혈구 표면에는 응집원A가 있고 혈액 속에는 anti-B, 즉 항B응집소가 있다. 따라서 반응에 의해 응고되며 anti-B를 처리하면 응고되지 않는다. 마찬가지로 B형의 적혈구 표면에는 응집원B가 있고 혈액 속에는 anti-A가 있다. 따라서 anti-A를 처리하면 응고되지 않고 anti-B를 처리하면 응고된다. AB형의 적혈구에는 응집원A와 응집원B가 모두 있고 혈액 속에는 응집소가 없다. 따라서 anti-A와 anti-B를 처리하면 모두 응고된다. O형의 적혈구 표면에는 응집원이 없고 혈액 속에는 anti-A와 anti-B가 모두 들어있다. 따라서 이번 실험의 결과와 같이 anti-A와 anti-B를 처리해도 응고되지 않는다.우리의 주변에서 ABO식 혈액형의 판별은 어느 곳에 이용될까? ABO식 혈액형이 발견됨으로써 예전과 달리 수혈을 할 때도 응집원과 응집소를 구분지어 수혈할 수 있게 되었다. ABO식 혈액형을 판별함으로써 친자감별, 범죄수사에 이용된다. 이론적으로 A와 B가 우성이고 O가 열성이다. 만일 AO의 유전형을 가진다면 표현형은 A가 되며 BO의 유전형을 가진다면 표현형은 B가 된다. 이를 이용해서 부모와 자식 간의 유전관계를 알 수 있고 친자감별이 가능한 것이다. 그러나 간혹 유전형 중 한 가지가 발현이 되지 않는 봄베이 혈액형이 나올 수 있다.Rh식 혈액형은 어떤 식으로 판별될까? 우리가 실험에 이용한 anti-D는 anti-Rh 혈청이다. 이 혈청과 반응하여 응고된 혈액은 Rh양성, 즉 Rh+이고 응고되지 않는 혈액은 Rh음성, 즉 Rh-이다. 왜 anti-D일까? Rh식 혈액형은 D, C, c, E, e의 5가지 항원의 조합으로 이루어지는데, Rh+와 Rh-의 구분은 D항원 유무로 구분된다. D항원을 가지고 있으면 Rh+이고 가지고 있지 않다면 Rh-이다. 이런 이유 때문에 D항원과 결합하는 anti-D를 처리하면 Rh+ 혈액이 응고되는 것이다.이번 실험의 목적에는 유전자 빈도를 알아보는 것이 있다. 그렇다면 각 나라별로 혈액형의 빈도는 어떨까? 왼쪽 도표는 나라별 혈액형 분포이다. 전체적으로 AB형이 적은 비율임을 알 수계에서 각각 A와 B를 받아야 하는 것이 이유인 것 같다. 페루의 원주민의 경우 O형인 사람만 존재하여 100% O형이 나타나는 것이다.혈액이 다 같은 것이 아니라 유형이 있음을 알게 됨으로써 수혈로 인한 인명피해가 사라졌다. 그렇다면 수혈은 어떤 유형끼리 가능할까? 이는 응집원과 응집소의 종류를 보면 쉽게 알 수 있다. O형의 적혈구에는 응집원이 없으므로 다른 유형의 혈액형에 존재하는 항체들과 결합하여 응고되지 않는다. 따라서 O형은 모든 혈액형에게 수혈가능하다. 반면 AB형은 AB응집원이 모두 있기 때문에 다른 혈액형에게 혈액을 받을 수만 있고 수혈은 불가능하다. 하지만 이렇게 다른 혈액형 간의 수혈은 소량만 가능하다. 예를 들면 O형의 혈액에 있는 A와 B혈청 때문에 다른 혈액형의 응집원과 응고될 수 있기 때문이다. 이와 같은 이유로 대량수혈은 같은 혈액형의 혈액 간에만 가능하다.백혈구의 종류와 기능에 대해서는 프로젝트 4번에서 기술했다. 그 외의 형태적인 특징을 알아보자.Neutrophils는 호중구로, 가느다란 크로마틴(chromation) 사로 연결된 3~5엽의 핵과 미세하고 눈에 띄지 않는 과립을 함유한 세포질을 가진 과립백혈구이다. Eosinophils은 호산구로 세포안 과립이 많이 보이며 핵이 두 개정도로 보이며, 항기생충의 식균작용을 한다. Basophils는 호염기구로, 과립이 많아 핵이 관찰되기 어려운 구조로 되어있으며, 보통 핵은 2~3개이다. Monocytes는 단핵구로 대식세포가 된다. 핵이 하나로 주위의 과립세포가 비교적 적어 관찰할 수 있다. Lymphocytes는 림프구로 면역시스템의 기본 세포이며, T,B cell, Null cell이 된다. 림프구는 세포의 크기만큼 핵이 커서 핵 외의 부분이 거의 없는 형태로 관찰된다. 실험결과에서 관찰된 응고가 아직 안 일어난 1000배율에서는 핵의 개수가 3개로 보이기 때문에 호염기구, 호중구같이 관찰이 된다. 하지만 핵이 깔끔하게 관찰된 것으로 보아 호중구라고 생각이 된다.9. Proj 조사하시오.항원-항체 반응이란 항원과 항원에 대응하는 항체와의 사이에 일어나는 특이적인 반응과 현상을 말한다. 항원-항체 반응의 특징은 다음과 같다. 특정항원에 반응하여 생성된 항체가 다른 항원과는 반응하지 않는 특이성을 가진다. 효소에서 다뤘던 기질특이성과 유사한 특징이라고 할 수 있다. 하지만 구조적 유사성이 아누 높은 항원과는 교차반응을 하기도 한다. 특이성은 면역, 혈액형판별, 알레르기 등 연구에 도움을 준다.왼쪽 그림은 항체의 모습이다. 항원이 인체에 들어오면 수지상세포가 잡아먹은 후 T세포나 B세포를 활성화시킨다. T세포에는 킬러T세포(세포독성 T세포)와 보조 T세포가 있다. 킬러T세포는 항원을 직접적으로 제거하고 보조 T세포는 다른 면역세포들을 활성화시키고 B세포는 항체를 만들어낸다.② 희귀혈액형의 종류와 특징에 대해서 조사하시오.우선 서양에서는 전체의 20%가 Rh-를 갖지만 동양에서는 1%밖에 되지 않는다. 이 때문에 동양에서는 Rh-를 가진 사람들을 따로 등록해둔다.또한 잠시 언급했듯이 봄베이 혈액형 또한 희귀혈액형이다. 약A형, 약B형이 그 예이다. 이 경우 O형으로 오진될 경우가 있다.cis-AB형 또한 희귀혈액형이다. AB형은 원래 A와 B가 각각 다른 염색체에 존재하는데 cis-AB의 경우 같은 염색체에 함께 존재하여 유전이 될 때도 같이 유전되는 특징이 있다. 수혈을 할 때는 대게 O형을 수혈한다.밀텐버거 혈액형은 태아의 적혈구를 파괴하는 신생아 용혈성 질환등의 수혈 부작용의 원인이 된다.③ 혈액을 구성하는 성분에는 무엇이 있으며, 그 역할은 무엇인지 조사하시오.혈액에는 적혈구, 백혈구, 혈소판, 혈장으로 구성되어 있다.적혈구는 헤모글로빈 색소를 함유하고 이를 이용해 산소를 운반하는 역할을 한다. 적혈구로 인해 혈액이 붉은색을 띠는 것이다.백혈구는 식세포작용으로 감염원을 파괴하고 항체를 생산하는 역할을 한다. 혈소판은 상처가 나 출혈이 일어날 때 응고를 촉진시켜 다량 출혈을 막아준다. 혈장은 수분, 무기염류, 단백질로 구성된 피의 .

자연과학| 2017.12.27| 7페이지| 1,000원| 조회(437)

혈구 관찰, ABO식 혈액형 판별, 일반생물학 및 실험 레포트

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