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임상병리학-심장초음파

1. 심장의 구조▸심장 : 제2갈비뼈와 제5갈비뼈 사이에 위치▸심장의 위쪽 : 심장바닥(심바닥) ▸아래 뾰족한 부분 : 심장끝(심첨) ▸심장바닥만 부착되어 있으며 심장막 안에서 운동▸심장의 무게 : 성인 체중의 1/200 → 약 300g ▸성인의 혈액량 : 5000g = 5L ▸심장박동의 근원 : 전기적 현상, 자율신경의 지배* 관상동맥질환◯1 협심증 Angina ▸죽상경화판에 의해 관상동맥이 좁아진 상태▸국소 부위의 심장근육에 산소의 공급이 줄어든 상태◯2 심근경색 Myocardiac infarction ▸죽상경화판의 파열로 형성된 혈전으로 인해 관상 동맥이 완전히 막힌 상태▸국소부위의 심장근육에 산소를 완전히 공급하지 못함2. 심장의 생리1) 심장의 수축(systole) ▸심장의 한 주기는 수축과 확장을 포함▸심장근육의 탈분극의 결과 → 수축2) 심장의 확장(diastole) ▸심장근육의 재분극의 결과 → 확장3) 심장의 순환(1) 온몸순환(대순환) ▸좌심실 → 대동맥 → 온몸 → 대정맥 → 우심방(2) 폐순환(소순환) ▸우심실 → 폐동맥 → 폐 → 폐정맥 → 좌심방(3) 관상순환 coronary circulation ▸심장근육 자체에 산소와 영양분을 공급하기 위한 순환▸심장근육에 분포하는 관상동맥과 관상정맥이 관여▸관상동맥 : 산소, 영양분 공급▸관상정맥 : 노폐물 배설* 선천성 심장병◯1 심방중격결손 atrial septal defect, ASD ▸좌심방과 우심방 사이의 타원구멍(난원공)은 태아순환에서 열린 상태로 존재하지만 출생 후에는 막혀서 타원오목 (난원와)라는 흔적으로 존재▸ASD는 출생 후에도 난원공이 닫혀 있지 않은 상태 ▸난원공이 열려 있으면 이 구멍을 통하여 좌심방에서 우심방으로 혈액이 흘러 들어가므로 그만큼 많은 혈액이 폐로 흐르게 됨

기타| 2022.05.02| 22페이지| 6,000원| 조회(970)

국가고시, 임상병리학, 심장초음파, 족보아님, 국시빈출내용정리

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조직검사학 면역조직화학

16장 면역조직화학Ⅰ 조직병리 진단분야에서 면역조직화학의 활용 범위?종양 병리에서 세포형의 규명?염증세포침윤 부위에서 세포형의 규명?종양의 예후 지표 평가?감염 병원균의 동정?결함 단백질의 동정과 세포 수준에서의 결함 유전자 전사 및 번역의 증거 제공?자가면역질환에서의 면역복합체 침착의 평가?잠재적 표적치료 전략을 위한 지표 제공?세포 활성화와 세포자명사 경로 평가Ⅲ 면역조직화학반응의 기본 원리?면역조직화학은 항체가 특정 항원물질에 결합하는 성질(항원-항체 반응)을 이용 → 그 결합부위로부터의 항원의 존재 부위를 검출?항원-항체반응물은 그대로는 현미경하에서 관찰 X?항체를 육안으로 볼 수 있도록 표지자를 발색시켜서 간접적으로 특정 물질(항원)을 검출?항원-항체반응에서는 항원에 대한 항체의 결합이 매우 특이적 이어서 항체는 대응하는 항원물질 이외에는 결합 X, 검출 민감도에 있어서도 일반 염색법에 비해 매우 우수Ⅳ 면역조직화학반응의 분류1. 항체표지의 시점에 따른 분류1) 표지항체법?항체의 표지를 항원과의 반응에 앞서 수행(1) 직접법 Direct method?검출항원에 대한 항체(일차항체)를 표지하여 반응시키는 방법?간접법에 비해 민감도 ↓, 표지항체의 용도가 한정적?특이도는 간접법에 비해 우수(2) 간접법 Indirect method?일차항체를 미표지상태로 검출항원과 반응시킨 다음 이 항체를 항원으로 하여 만든 항체(이차항체)를 표지하여 간접적으로 반응 시켜 항원 검출?여러 개의 항체를 사용하므로 비특이적 반응이 일어날 가능성 有?민감도 우수, 표지이차항체의 용도가 넓어서 직접법보다 자주 사용?발색점 2개 이상, 증폭법2) 미표지항체법?항체의 표지를 항원과의 반응 이후에 수행(1) PAP법 peroxidase-antiperoxidase method?서양고추냉이 과산화효소(horseradish peroxdiase, HRP)에 대한 항체를 제작하여 HRP-항HRP 면역복합체를 만듦?1차항체 : 동종 / 2차항체 : 이종 → 특이도 증가(3) 아비딘-비오틴법 avd, ABC법?아비딘과 비오틴의 강한 친화성을 이용하여 비오틴(2차항체의 Fc부분에 부착)과 결합된 항체와 표지자로 붙어있는 아비딘을 결합 시켜 간접적으로 항체를 표지Ⅴ 면역학의 기본 개념6. 항체 역가?항체의 역가는 단클론항혈청의 경우 1:100에서 1:2000까지 다양?단클론항체는 1:10에서 1:1000까지 다양?BEST - 1 : 200, 1 : 4008. 항체 반응1) 반응 시간?반응시간과 항체역가는 역의 상관가능성?항체역가가 높을수록 최적 결과를 얻는데 필요한 반응시간이 짧게 걸림?최적 항체 희석비율을 결정하기 전에 먼저 적절한 반응시간을 정해두는 것이 더 우선 조건?특이항체의 농도가 높으면 반응시간 단축?10~30분 : 가장 널리 사용, 최소 1시간 이상2) 반응 온도?37℃?파라핀 절편 : 실온에서 반응?동결절편 : 충분한 침투를 위해 4℃에서 overnightⅥ 항체의 보존과 관리1. 항체활성에 영향을 미치는 인자?보존에 따른 항체활성에 영향을 미치는 인자?항체단백질 농도, 세균과 진균 등에 의한 오염, 보존온도 및 반복적인 동결융해 등1) 항체단백질의 농도?희석한 정제항체 장기간 보존 시 1% BSA(bovine serum albumin)를 함유한 PBS(pH 7.4), Tris-HCl(pH 7.6)로 희석?완충액 : 반응중지 및 반응하지 않는 항체 제거2) 세균이나 진균 등에 의한 오염?0.02% NaN3(sodium azide) 첨가 시 쉽게 방지 가능3) 보존온도?표지항체의 보존 : 4℃ 냉장보관?원액의 보존 : -80℃의 초저온냉동고나 액체 질소 내에 넣어 보존?이 경우 10~50μl씩 동결보존용튜브에 분주하여 보존2. 조직고정법?조직고정에 요구되는 기능조직구조를 포함하여 그 내에 존재하는 구성요소(분자)가 이동되지 않도록 하는 것?이를 위해 분자 사이에 가교(bridge)를 형성시키거나 용출되기 쉬운 분자를 불용화시키는 조작 필요조직 내 분해효소의 활성을 불활성화시킴으로써 조직의 변성을 막음항원성의 유지 필요1) 단백질항원?고정액 :라핀절편의 경우 : 10% NBF3) 폴리펩티드?고정 : Bouin(파라핀절편), Zamboni(동결절편, 면역전자현미경)Ⅷ 면역조직화학 염색법과 원리1. 효소항체법?효소항체법의 특성은 형광항체법의 특성과 대조적?항원 검출반응 : 항원항체반응과 효소활성 검출반응의 2단계로 구성1) 직접 효소항체법?검출항원에 대한 일차항체에 효소(HRP)를 표지한 효소항체를 표본에 작용시켜 항원과 결합시킨 후 그 효소활성을 과산화수소가 첨가된 DAB(H2O2-DAB)로 반응시켜 가시화(갈색산물)하는 방법2) 간접 효소항체법?검출항원에 먼저 미표지 일차항체를 반응시킨 후 여기에 효소(HRP) 표지 이차항체를 결합시킨 후 표지활성효소를 H2O2-DAB로 반응 시켜 가시화하는 방법(1) PAP법처음 검출항원에 A에 대한 항A특이항체(일차항체)를 조직절편 위에서 반응시켜 항원-항체반응복합체 형성그 다음 항A특이항체에 대한 효소를 표지하지 않은 중간항체(이차 항체)로 항원-항체반응 진행이어 일차항체의 항A특이항체와 동종 동물에서 제작한 항HRP항체 의 가용성 항원-항체복합물(PAP)을 반응시킨 후 PAP 내의 HRP 효소를 기질로 정색반응 → 항원의 존재부위를 관찰PAP법은 항체 한 분자당 HRP 세 분자가 표지되기 때문에 간접법에 비해 3배 감도가 좋아짐(2) APAAP법 alkaline phosphatase antialkaline phosphatase method?HRP 효소 대신 AP(alkalin phosphatase)를 항체에 표지검출항원 A에 대한 항A특이항체를 조직절편 위에서 반응시켜 항원-항체복합체를 형성그 다음 항A특이항체에 대한 미표지 중간항체로 항원-항체반응 진행이어 일차항체의 항A특이항체과 동종동물에서 제작한 항ALP의 가용성 항원-항체복합체(멤메)을 반응시킨 후 APAAP 내의 AP 효소를 기질로서 정색반응 → 항원의 존재부위 확인(3) ABC법처음 검출항원 A에 대한 항A특이항체를 조직절편에 반응시켜 항원-항체복합체를 형성이어 비오틴을 표지한 항A특이항체에 대한수의 HRP를 표지한 아비딘-비오틴 복합체를 반응시킨 후 HRP 효소를 기질인 DAB로 정색반응 → 항원의 존재부위 관찰(4) LSAB 법?아비딘 대신 미생물로부터 분리한 분자량 60000의 streptoavidin 이용?streptoavidin : 당이 포함되지 않기 때문에 당을 약 7% 함유한 아비딘에 비해 배경반응이 좋고 높은 S/N 비율(siganl/noise ratio) 을 얻을 수 있음3) 효소표지 중합체법(1) EPOS법?덱스트란 폴리머 백본에 많은 수의 일차항체와 과산화효소를 부착?동결절편 면역염색에 좋음?염색 재현성 우수(2) EnVision 중합체법?예민도가 높고 ABC법보다 시간 단축?아비딘과 비오틴의 반응을 이용하지 않으므로 내인성 비오틴에 대한 비특이적 반응도 일어나지 X?LSAP나 APAAP법에 비해 2~5배 민감도 ↑2. 효소항체법의 주요 단계1) 절편제작?면역염색에 사용할 절편은 염색과정에서 쉽게 슬라이드로부터 탈락 되는 경우가 많음?따라서 접착력이 강한 poly-L-lysine, γ-methacryloxypropyltrim ethoxysilane(silane)을 도포한 슬라이드(코팅 슬라이드) 사용2) 항원부활?포르말린고정 파라핀포매절편을 이용한 면역조직화학적 염색을 할 경우 알데히드 고정을 인해 발생하는 항원결정기를 포함한 단백질 분자 내 가교결합(methylen bridge)이나 주변 단백질분자와의 사이 의 가교결합에 따른 입체구조의 변형에 의해 종종 항원성이 가려져 항체가 항원에 접촉할 수 X?항원성 부활 방법단백질 분해효소처리가열처리(1) 단백질분해효소에 의한 항원부활, EIAR?트립신(trypsin), 펩신(pepsin), protease 사용?조직자체의 항원이 고정액의 aldehyde기에 의해 교차결합되어 있을 경우 항원을 노출시켜주기 위해 사용(2) 가열에 의한 항원부활?고온에 의한 항원성의 부활에 대한 정확한 기전 X마이크로파 조사법?가정용/실험용 전자레인지 모두 사용 가능?실험용 전자레인지가 시간 단축?탈파라핀 절또는 EDTA buffer(pH 8.0)가 들어있는 내열성 용기에 넣고 뚜껑을 살짝 덮은 후 전자레인지에 넣고 3~5분 조사를 2~8회 반복가압증기멸균기법?내열성 용기에 넣고 autoclave에 넣어 뚜껑을 덮은 후 121℃ 10~20(15min) 가열압력밥솥법 또는 찜통법3) 내인성 활성물질의 활성 차단?조직 내 효소 및 비오틴은 고정이나 파라핀포매에 의해 변성되거나 불활성되어 그 활성 정도가 변화?과산화수소(peroxidase)는 파라핀이나 동결절편에서 그 활성이 보존?ALP는 고정이나 파라핀 포매과정에서는 활성이 완전히 불활성화 하지만 도말표본, 동결절편, 저온 메타크릴수지표매조직에서는 효소 활성 보존(1) 내인성 과산화효소 활성의 억제?내인성 과산화효소의 활성은 주로 적혈구(Heme에 의한 유사 과산화효소 활성)와 과립구(주로 Eosinophil)에 존재?유사 과산화효소 활성을 가진 catalase가 존재하는 간세포, 상피성 과산화효소 활성을 보이는 갑상샘소포상피, 침샘꽈리세포, 콩팥 요세관상피, 수유기의 유선상피 등 다수의 정상 및 종양세포에 관찰?위양성 가능성?내인성 과산화효소의 활성 억제(일반적 방법)?0.3% H2O2을 첨가한 메탄올 사용4) 정상 혈청을 사용한 비특이반응(배경염색)의 차단?비오틴표지 이차항체가 비특이적으로 절편과 반응하는 것을 방지 하기 위해 이차항체를 얻은 동물과 동종의 동물에서 채취한 정상 혈청을 먼저 반응시키면 항체분자가 비특이적으로 조직에 결합하는 것을 막을 수 있음?적정 농도(1~10℃)로 희석한 항혈청을 절편 위에 반응?사용한 정상혈청 : 2차항체를 얻은 동물과 동종의 동물혈청5) 일차항체 반응?일차항체의 반응시간 : 실온에서 15~30분 / 4℃에서 하룻밤8) 발색(기질과 색소원)?표지효소에 대한 발색에는 표지효소의 종류에 따라 여러 종류의 기질과 발색물질(색소원)을 이용할 수 있음?과산화효소의 발색물질 : DAB / AEC?DAB : 갈색 반응산물이 알코올에 녹지 않기 때문에 넓은 범위의 대조염색이나 투명 후 캐나

의/약학| 2021.05.31| 5페이지| 5,000원| 조회(624)

국가고시, 조직검사학, 임상병리학

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조직검사학 효소조직화학, 분자병리

17. 효소조직화학Ⅰ 효소 활성에 영향을 미치는 인자온도, pH, 기질 농도억제제활성제Ⅱ 효소화학반응의 종류금속침전법?효소작용에 의한 기질의 분해산물은 금속 또는 금속염과 이온결합 하여 효소활성 국재부위에 가시반응산물을 형성?금속염은 광학현미경적 관찰에 짙은 착색 반응산물을 만들뿐 만 아니라 금속 자체의 전자선을 방출하는 성질이 있어서 전자현미경 적으로 관찰 가능아조염색법?효소의 분해 작용에 의해 깆리로부터 생성된 산물을 다아조늄염과 반응시켜 효소활성 국재부위에 가시산물(아조염료)을 형성시켜 관찰?아조화합물은 강한 착색을 나타내지 않으나 이것이 기질의 분해 산물과 결합한 후 청색, 흑색, 녹색, 갈색, 자색 등 광학현미경으로 구별하기 쉬운 착색을 나타내는 아조색소가 됨Ⅲ 조직 처리와 주의사항?효소는 불안정하여 변화를 일으키기 쉽기 때문에 검체의 적절한 보존이 가장 중요?세포 내 미토콘드리아에는 많은 산화효소들이 있는데 인체로부터 절취되어 혈액공급이 중단되면 급속히 손상되며 많은 효소들이 열, 조직표본제작에 사용하는 고정액이나 시약에 의해 불활성화되기 때문에 대부분 효소 검사는 동결절편 이용?효소의 동결절편 시 고정액 : cold Acetone1. 검체의 동결?효소조직화학 검사를 위한 골격근 생검 조직은 횡단면이 나타날 수 있도록 잘라 미리 액화질소(-190~-180℃)에 넣어 차갑게 준비한 isopentane(-160~-150℃)에 넣어 동결?너무 오래 동결할 경우 생검 조직이 경화되어 균열 발생?액화질소에 넣어 차갑게 한 isopentane은 시럽과 같은 점도를 나타 낼 때까지 저어주며 조직을 넣은 후 보통 25~30초 이내에 동결 완료 (-150℃)?cryostat 절편법은 신속하고 취급이 간단하기 때문에 대부분 효소 증명에 가장 좋은 방법으로 이용?isopentane?열 전도성이 높기 때문에 조직에 인위적인 변화를 주지 않음?ice artifact가 발생되지 않음Ⅰ 근섬유 종류적색섬유(Ⅰ형근섬유)백색섬유(2형근섬유)철새의 가슴근육, 포유류의 사지근육, 사람의 등근육ATPase 염색 X사람의 안구근육, 닭의 가슴근육ATPase 짙게 염색Ⅲ 근질환 진단을 위한 근조직의 채취 및 취급3. 생검검체의 취급?수축 방지를 위해 겸자 사용?적출된 시료는 생리식염수를 적신 거즈 위에 잠시 두었다가 필요에 따라 처리?진단을 위한 동결절편용 근육의 횡단면(가로절단면, cross section) 이 나오도록 방향을 잡아 연속절편?동결절편 시 검체의 크기 : 1 × 0.5 × 0.5cm?전자현미경 검사의 경우 근육 검자로 고정하여 절단된 생검근육 으로부터 너비 1mm의 크기로 절취하여 10% NBF(pH7.4)에 고정한 후 2% 글루탈알데히드에 후고정?H&E 염색을 비롯한 일반적인 형태학적 검사를 위해서는 겸자부위 를 피하여 10% NBF에 24시간 고정한 조직을 사용Ⅳ 근질환 염색법1. ATPase1) 목적?근섬유형 감별 - Ⅰ, Ⅱa, Ⅱb, Ⅱc형으로 구별2) 염색법의 종류ATPase pH9.4 : Ⅰ, Ⅱ형으로 구별ATPase pH4.3 : Ⅰ, Ⅱa, Ⅱb형으로 구별ATPase pH4.6 : Ⅰ, Ⅱa, Ⅱb형으로 구별3) 반응 원리?기질인 ATP는 조직에 함유하고 있는 ATPase에 의해 37℃, pH9.4인 조건에서 ADP와 orthophosphate로 분해?유리관 orthophosphate는 Ca과 결합하여 무색의 calcium phosphate로 전환되며 이 물질에 cobalt chloride를 반응시키면 cobalt가 칼슘과 치환되어 효소활성 부위에 무색의 cobalt phosphate로 침전됨?여기에 ammonium sulfide를 작용시키면 불용성의 암갈색의 cobalt sulfide 형성?활성제 : Ca2+?저해제 : Mg2+2. NADH-TR1) 목적?골격근의 형태학적 관찰, 가장 강하게 염색되는 Ⅰ형 근섬유 감별에 매우 효과적?Ⅱa형 근섬유는 중간, Ⅱb형 근섬유는 약하게 염색2) 반응원리?기질인 NADH가 37℃ pH7.4에서 incubation하면 NADH-TR diaphorase의 작용으로 NAD와 H+로 분해되고 전자수용체인 NBT(nitro blue tetrazolium) 색소와의 결합으로 효소의 활성부위에 자색을 나타냄?효소 활성은 기질로부터 수소를 방출시키며 방출된 수소는 수소 첨가에 의해 tetrazolium으로 전이됨?수소를 받은 tetrazolium은 자청색 포르마잔 색소(formazan pigment : 청록색 색소)로 전환되어 효소활성 부위에 침착?산화효소3. SDH(succinic hydrogenase) 염색1) 목적?SDHase 활성은 미토콘드리아에서만 양성 반응2) 반응원리?SDHase는 cytochrome oxidase와 함께 연결되어 있는 산화효소계에 속하는 미토콘드리아 효소이며 succinic aicd에서 푸마르산(fumaric acid)로의 가역적인 산화반응을 촉매하는 효소?이 효소의 활성은 신선한 돌결절편에 tetrazolium 화합물의 존재 하에 succinate 기질을 반응시켜 조직화학적으로 검출?기질인 succinate는 효소에 의해 분해되어 수소 이온 방출, 이 유리 된 수소이온은 반응액 내의 tetrazolium salt(NBT)와 결합하여 효소 활성부위에 청자색의 formazan으로 전환되어 효소 활성 부위에 색소 형성4. MGT (modified gomori thrchrome) 염색1) 목적?근섬유형 감별 : Ⅰ형, Ⅱ형1) 반응원리?MGT는 chromotrope 2R에 의한 복합 세포질 염색과 Fast green FCF에 의한 결합섬유의 복합염색을 기초로 함3) 결과?Nuclei : dark blue?Muscle myofibrils : green blue?Mitochondria, endoplasmic reticulum stain : red?Connective tissue stain : pale green blue?Myelin stain : purple red?Type Ⅰ fiber stain : darker blue/green as compared to Type Ⅱ18. 분자병리학적 검사1. Southern bloting?DNA를 분자크기에 따라 특이적 검출?제한효소 허리 후 검체 DNA를 아가로스겔에서 전기영동하여 니트로셀룰로스막에 옮긴 후 DNA Probe와 부합시키는 방법2. Northern bloting?RNA나 mRNA의 해석을 목적?RNA를 추출하여 전기영동을 이용해 크기별로 분리 후, 니트로셀룰 로스막에 옮긴 후 원하는 mRNA에 상보적인 DNA나 RNA Probe를 부합시킨 후 자기방사법으로 mRNA의 크기나 상대적인 양 측정

의/약학| 2021.05.31| 4페이지| 5,000원| 조회(422)

국가고시, 조직검사학, 임상병리학

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조직검사학 뼈조직

15장 뼈조직?항상 고정 먼저?고정 → 고정 완료 후 탈회 (칼슘 빼기)(담금고정 : 포르말린)?탈회 : 산으로 제거 → 칼슘이 염으로 침전?탈회 종류 산 탈회Ca + EDTA → 키레이틴 생성?탈회 온도 : 실온?탈회액의 약 : 조직부피의 10~20배?조직의 두께 : 4mm?탈회 후 즉시 수세 x, 5% 전후 sodium bicarbonate에 담금(중화)Ⅲ 뼈 검체의 종류1. 생검검체?골수 생검 : 척추뼈에서 추출?탈회 : 유방생검, 폐 생검?장골 : 골두세포에 연골 有 → 성장 가능, 염증 발생Ⅳ 뼈조직의 표본제작1. 탈회뼈조직의 표본제작?탈회(decalcification)은 뼈조직과 같이 칼슘이 침착된 조직에서 칼슘을제거하여 박절하기에 적합하도록 처리하는 과정?탈회액 사용?산(acid)이나 EDTA가 사용?산은 조직 내 칼슘과 반응하여 용해성 칼슘 형태로 바뀜?EDTA는 칼슘이온과 선택적으로 킬레이트 결합 형성, 칼슘 제거?탈회액은 진단의 신속성, 칼슘의 침착정도, 조사 범위 및 사용될 염색법등을 고려하여 적절하게 선택1) 탈회제의 종류(1) 산 탈회제?뼈조직 내 인산 또는 탄산과 같은 음이온과 결합되어 있는 칼슘은 산과반응하여 용해성 칼슘염을 형성함으로써 조직으로부터 제거질산(nitric acid, HNO3)?가장 많이 사용?5~10% 질산수용액 사용?탈회액을 매일 신선한 액으로 교환해 주어야 함?매일 교환이 어려울 경우 탈회액 내에 1% 요소(urea)를 첨가해주어아질산 형성을 다소 늦출 수 있음염산(hydrochloric acid)?5~10% 수용액 상태로 사용포름산(frormic acid, HCOOH, 개미산)?5~10%의 포름산수 용액을 주로 사용?염색성과 탈회 시간을 고려하면 탈회에 가장 무난하게 사용(3) 조직화학적 염색을 위한 탈회제?효소조직화학이나 면역조직화학염색이 필요할 때 사용되는 탈회제?주로 EDTA 사용?EDTA는 신속한 진단에는 부적절?EDTA는 칼슘 등과 같은 금속이온들과 킬레이트를 형성하는 유기화합물?산(acid)이지만 으로 작용X, 금속이온들과 결합?EDTA는 pH3.0 이하에서 칼슘과 결합X, pH7.0~7.4에서 빨리 결합중성 EDTA?탈회에는 약 10% 수용액을 만들어 pH7.4~7.5로 조절하여 사용?이온화된 칼슘에만 결합?뼈조직의 인회석결정 표층에서만 작용할 뿐 결정 내부는 작용X?결정의 표층이 제거되면 다시 내부로부터 칼슘이온 형성, 이온화된칼슘이 EDTA와 결합하여 제거되는 과정 반봅마그네슘-구연산 용액?중성 탈회액으로 구연산(citrate acid) 80g을 증류수 100ml에 첨가한 후가열하여 용해?3일마다 용액 교체2) 일반 산 탈회방법?탈회액의 양은 조직 부피의 10~20배 정도가 적당?을 사용할 경우 10배, 을 사용하면 20배의 용액 첨가?10~30℃ 범위의 온화한 조건하에서 탈회액을 교반3) 산 탈회 촉진법(1) 초음파 탈회법?7.5% 아세트산(acetic acid) 탈회액에서 1초당 약 10250사이클의주파수를 발생시키면 탈회율이 약 10배 정도 빨라짐(2) 마이크로파 탈회법 ? 전자레인지?마이크로파를 이용하여 탈회하는 동안 탈회액이 항온을 유지하며순환할 수 있도록 되어 있어 탈회 속도를 촉진?고온 주의(3) 이온교환수지 탈회법 ? 투석에서 사용?수지 : 작은 플라스틱 알갱이 → 표면에 양이온, 음이온 결합 구멍 有?양이온교환수지를 이용하여 탈회액 내의 유리된 칼슘이온을 신속히제거하는 방법(4) 전기분해 탈회법?뼈조직 내 칼슘이 이온화를 증진?원리?양극에 뼈조직을 부착하고 전해질 용액에 전기를 통전하여 칼슘이온이음극으로 이동(5) 표면 탈회법?파라핀블록을 박절하기 위해 다듬기를 하다 보면 조직 내 작은 칼슘침착부위로 인해 박절하기 어려운 경우가 있음?블록 상태로 조직이 노출된 표면을 직접 탈회액에 담가 칼슘을 제거?탈회액(1% 염산/70% 에탄올용액 또는 10%포름산용액)을 적신거즈패드나 스폰지를 직접 파라핀 블록에 접촉시켜 10분간 둔다.4) 탈회 종료의 확인?탈회 종료시점 확인 방법?물리적 검사 : 탐침, 바늘로 찔러보기, 세절, 구부려보기 및 눌러보기(1) 화학적 검사수산칼슘 검사?탈회 종료가 가까운 시점에서 잘 흔들어 섞은 탈회액 5ml를 취해시험관에 옮기고 작은 조각의 리트머스 시험지를 넣어줌?이 시험관에 강암모니아수를 한 방울씩 떨어뜨려가면서 리트머스시험지가 중성으로 변할 때까지 첨가?하얗게 변함 (젖빛 혼탁) : deca o = 뼈 안의 칼슘 다 나옴l하얗지X (무색투명) : decal X이산화탄소 기포검사?산 탈회 진행과정에서 발생된 이산화탄소가 조직의 표면에 을형성하는데 기초한 검사?특별한 시약을 사용하지X?질산 탈회의 경우 조직 내 탄산칼슘이 질산과 반응하면 CO2 발생→ 기포층 형성?산 탈회가 진행되는 과정이라면 조직표면에 항상 기포층이 형성?탈회액을 주기적으로 흔들어 조직표면의 기포층이 없어진 후 다시기포가 생기지 않는 시점을 탈회 종료시점으로 판정

의/약학| 2021.05.31| 3페이지| 5,000원| 조회(534)

국가고시, 조직검사학, 임상병리학

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조직검사학 신경병리학

14장 신경병리학Ⅰ 신경조직의 구성1. 신경세포?신경세포는 신경계총의 형태학적 기능의 단위로서 신경단위 (neuron)이라고 부름?신경세포는 세포체 또는 핵주위부와 이것으로부터 나온 돌기로 구성?세포체 내에는 한 개의 둥글고 큰 핵을 포함하여 니슬소체, 신경원 섬유(중간세포로 응집된 형태로 나타난 섬유) 및 일반 세포에서 볼 수 있는 것과 같은 각종 형질 함유닛슬소체?과립세포질그물 / 신경세포체 내 존재 / RNA, 리보솜 多?Feulgen (-) 호pyronin / 호염기성?알칼리에 용해?에탄올, 에테르, 클로로포름에 용해 X?알코올 고정 후 초산, 무기산에 용해 X니슬소체3) 신경세포의 돌기(1) 축삭?신경세포체로부터 전기적 자극이 전달되는 부위?축삭(axon)은 거의 모든 신경세포에 존재하는 단 하나의 원통형 돌기?세포의 종류에 따라 길이와 직경 다름?대부분의 축삭은 세포체의 축삭둔덕에서 기원하지만 큰 가지돌기의줄기로부터 기원하는 경우도 있음(2) 가지돌기?나뭇가지 모양으로 뻗어있는 돌기3. 말이집(미엘린집)?축삭을 둘러싸고 있는 말이집?신선한 상태에서는 거의 투명하며 강한 광굴절성 有?편광현미경으로 관찰 시 신경섬유의 중심으로 방사상 방향으로 향하는 강한 복굴절성 물질로 나타남Ⅱ 신경병리 검체의 취급2. 고정액?신경조직의 고정은 목적에 따라 약간씩 다른 고정액이 권장?뇌 같은 큰 검체 : 10% 포멀-셀라인?신경교질세포의 염색 : 포멀브롬화암모늄?인지질 염색 : 포멀-칼슘?닛슬소체 고정 : 무수알모올, carnoy, 포멀-알코올Ⅲ 신경조직의 표본제작?표본제작의 경우 5×4×0.4cm를 초과하지 않아야 함Ⅳ 신경조직의 염색법4. 신경원섬유 염색1) 빌쇼브스키(Bielschowsky)의 동결절편 및 파라핀 도은법?은거울 반응?절편에 침투 후 질산은과 환원제가 함유된 용액으로 은침전물을증강시키는 반응?환원제 : Formalin?조색 : GC / 정착 : ST2) 보디안(Bodian)의 파라핀절편 도은법?보디안 도은법은 파라핀절편으로서 고안되었기 때문에 연속절편 관찰 가능?얼룩이 많이 생기는 암모니아성 은용액 대신 안정한 프로타골 은(Protargol silver)을 사용?환원제 : 하이드로퀴논5. 말이집(수초) 염색?현재 대부분의 신경병리 검사실에서는 말이집 염색으로 룩솔파스트 블루(luxol fast blue) 염색과 솔로크롬 시아닌(solochrome cyanine) 염색을 선호

의/약학| 2021.05.31| 2페이지| 6,000원| 조회(343)

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