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LG화학_자소서_석사과정_합격

인재상LG화학 Techconference 인재 서류*개인인적사항*연구분야XXX 공정을 통한 마이크로/나노 구조체 양극 소재 합성 및 소재/전기화학 특성 평가-연구실 최초 XXX기반 NCM811 제조 프로세스 확립-2년간 XXX션 프로젝트 참여 연구원으로 분무 공정을 통한 NCM811 합성 및 평가를 주제로 제조 공정 셋업 및 연구를 수행했습니다.신규 공정을 활용한 실험인 만큼, 합성된 샘플이 상용 대비 부족한 전기화학 특성을 보이는 것이 가장 큰 문제였습니다. 저는 이를 크게 3가지 변화로 해결했습니다.1. XXX에 적합한 원료를 탐색했습니다.전구체 합성에서 다량의 Li가 휘발되어 조성이 틀어졌습니다. 저는 3가지 Li 원료의 휘발 정도를 파악하여 최종 LiOH 선택으로 해결했습니다. 그 결과, ICP-MS 분석으로 Li 2% 과량 조성이 유지되는 것을 확인했습니다.2. 습식 분쇄를 건식으로 변경했습니다.NCM811의 수분 취약성은 실험만으로 파악하기 어려웠습니다. 능동적으로 관련 논문을 공부하여 습식 분쇄로 인한 산화물 전구체의 잔류 리튬 형성 가능성을 파악했습니다. 이를 건식 분쇄로 변경하여, pH 적정 LiOH/Li2CO3 887/3458 ppm에 낮은 수치를 얻었습니다.3. 적정 소성 조건을 확립했습니다.과소성으로 인한 형상 불균일 문제가 발생했었습니다. 시행착오를 줄이고자 세라믹 기술원 선배님께 조언을 구해 단계별 소성에 중요성을 파악하였고, 이를 참조하여 1차 소성으로 층상 구조 형성 및 2차 처리로 구조적 안정화를 하였습니다.이를 바탕으로 최종 샘플의 특성을 cation mixing 1.5, 충/방전 용량을 212/185 mA/g로 향상할 수 있었습니다.-차세대 전지 양극 소재 연구 : 제1 저자 SCI급 논문 게재 및 투고-게재된 논문 주제는 아연-공기 전지 양극 촉매입니다. 해당 전지는 산소 환원/발생의 느린 활성으로 낮은 율속 특성 및 배터리의 수명 저하를 보입니다.본 연구에서는 N-doped bCNT 기반 3D 다공성 구조체와 활성부가 풍부한 Co3O4 나노 입자를 복합한 촉매를 합성하여 이를 해결했습니다. 특히, Mg/Ni 조성 제어로 N-doped CNT의 길이 및 두께 성장을 조절하여 반응 표면적을 극대화하였고, 이를 통해 전해질 및 전하 수송 효율성을 향상했습니다.해당 샘플은 우수한 산소 활성뿐만 아니라, 아연-공기 전지 양극 촉매로서도 높은 전력 밀도 및 안정적인 사이클 성능을 보였습니다.투고한 논문 주제는 나트륨 전지 양극재입니다. 층상 산화물 양극재는 구조적 불안정과 수분 노출의 취약성을 갖습니다.본 연구에서는 활성 금속 이온을 대체하며, 수분 저항성을 높이는 Cu 첨가를 통한 P2-type 소재를 합성하여 이를 해결했습니다. 또한, 소성 온도별 충/방전 과정 상전이 및 저항 비교로 안정적인 구조를 탐색하였습니다. 그 결과, 최종 750도 샘플에서 우수한 이온 전달성 및 안정적인 사이클 성능을 입증했습니다.적합한 구조 설계와 명확한 반응 메커니즘 이해는 소개 개발 핵심일 것입니다. 연구실에서 쌓은 저만의 구조체 합성 역량을 통해 LG화학만의 차별화된 양극재 기술 확보에 일조하고 싶습니다.1. 자신의 성장과정 및 개인 특성, 장점 중심으로 기술해주시기 바랍니다.(성장과정, 본인의 특성 및 성격(장단점)을 자유롭게 기술해주시기 바랍니다.)학부 기간, 다양한 팀 활동에 도전하며 높은 팀웍을 형성하는 자세를 길러왔습니다. 특히, 캡스톤 프로젝트와 인도 해외 봉사 경험은 저에게 리더와 팔로워로서 원활한 팀 활동을 위한 책임감과 적극성을 심어주었습니다.-열정을 되살린 책임감-학부 1년간 캡스톤 프로젝트에서 팀장으로서 높은 팀웍을 유지한 경험이 있습니다.저희 팀은 리튬메탈 배터리의 덴드라이트 억제를 주제로 실험을 진행하였지만, 합성 물질의 가벼운 질량으로 인해 수득량이 매우 적은 문제가 발생했었습니다.이에 따라 초기 팀원들의 모습과 달리 몇몇 인원들은 비효율적인 실험이라며 참여를 거부했습니다.팀장으로서 무엇보다 팀웍을 유지하는 것이 중요하였기에 저는 다른 연구실 장비를 활용한 추가 실험을 진행하며 신규 실험 방법을 탐색했습니다.그 결과, 회수량을 0.1g까지 높이는 초음파 분산법을 고안하였고, 이를 직접 팀원들에게 보여주며 팀 내 사기를 다시 높일 수 있었습니다. 높은 참여율을 유지한 덕분에 저희 팀은 최종 학술제에서도 우수상을 받았습니다.-문제 해결에 앞장서는 적극성-대학 시절, 인도 건축 봉사에서 활동 계획 수립을 담당하며 솔선수범한 자세로 공동체 문제를 해결한 경험이 있습니다.활동 당시, 40도의 무더위와 갑작스러운 독감 유행으로 인해 팀원이 20명에서 11명으로 줄어 진행에 어려움을 겪었습니다.계획 담당자로서 차질 없이 작업을 진행해야 했기에 문제 해결에 책임감을 느끼고, 야간 휴식 시간 팀장과 함께 팀원 상담을 통해 활동 가능 업무량을 조사했습니다. 수정된 계획안은 해비타트에 보고하고, 봉사 인력 추가를 요청하면서 주최 측도 상황을 인지하여 타 팀 인원을 투입해주었습니다.그 결과, 효율적으로 건축 봉사를 진행하여 완성된 보금자리를 지을 수 있었습니다.해당 경험을 통해 어떤 직책을 맡던 주인 의식을 갖고 활동한다면 뛰어난 팀웍이 자연스럽게 형성된다는 것을 배웠습니다.업무에 대한 책임감과 적극성으로 연구 직무 팀원들과 우수한 팀웍을 만들어가겠습니다.2. 논문 및 학회발표 사항을 기술해 주시기 바랍니다.(논문 및 학회발표 사항을 기술해 주시기 바랍니다.) (100~1000자)석사 기간, 차세대 양극 소재의 구조체 합성과 메커니즘 규명 연구로 2편의 제1 저자 SCI급 논문을 게재 및 투고하였습니다.-아연-공기 전지 양극 촉매 : 비표면적이 제어된 다공성 복합 구조체-본 연구에서는 3차원 다공성 구조체와 Co3O4 나노 입자를 복합한 이기능성 아연-공기 양극 촉매를 구현하였습니다.해당 촉매는 아연-공기 전지의 산소 환원/발생 (ORR/OER)의 느린 활성도를 보완하고, 소재 간 시너지 효과로 구조적 안정성을 향상하는 결과를 보여주었습니다.특히, 구조체 내 MgO의 높은 열안정성 특성을 활용하여, Mg/Ni 비율 조절로 Ni를 나노 결정화했습니다. 이는 후처리로 성장하는 N-doped CNT의 길이 및 두께 조절하여 촉매의 반응 표면적을 극대화하는 결과를 만들었습니다.해당 다공성 샘플은 LSV 평가에서 향상된 산소 반응 활성도를 보이며 전하 수송 효율성 향상 효과를 입증했습니다.Co3O4 나노 입자를 균일하게 도포한 최종 복합체는 아연-공기 전지 양극 촉매로서 낮은 분극 특성, 높은 전력 밀도 및 안정적인 사이클 성능을 입증했습니다.-소듐 이온 전지 양극재 : 높은 구조 안정성의 P2-type 소재-본 연구는 Cu를 도핑한 Mn 산화물계 P2-type의 층상구조 양극재를 합성하여 수분 취약성 및 구조적 안정성을 보완하였습니다.특히, 해당 샘플은 층상 구조 산화물의 충/방전 시 구조적 불안정성을 Ex-situ XRD와 in-situ EIS를 통해 소성 온도별 상전이 및 저항 비교하여 최적 조건을 탐색했습니다.

취업| 2025.02.02| 6페이지| 20,000원| 조회(83)

자소서, Lg화학, 석사과정

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예비6 Enzyme activity assay 김

예비레포트실험제목 :Enzyme activity assay조 :5조학 번 :2015117014이 름 :김선준1. 실험 목적본 실험은 광분해 반응 물질에서 효소 사용의 유?무에 따라서 실험군과 대조군을 설정하고, 효소가 들어있는 실험군의 UV 흡과도를 통해 농도를 측정하고, 이를 활용하여 효소의 활성도를 계산하는 실험이다. 본 실험에서 사용하는 반응물 pNPB는 광분해 반응으로 스스로 p-NP로 분해된다. 하지만 해당 반응을 CalB효소 사용으로 인한 반응보다 상대적으로 느리다. 생성물 p-NP는 노란색을 띄고, 파자 405nm 부근에서 최대 흡광 Peak를 가진다. 효소 사용 유?무에 따른 대조군, 실험군을 UV spectrophotometer을 통해 10분 단위로 흡광도를 측정하여 농도 변화를 계산한다. 해당 농도 변화 값을 활용하여 효소의 활성도를 계산한다. 활동도는 U(유닛)인 1분간 1mu `mol의 기질 변환을 유도하는 효소 활성의 양을 기준으로 계산한다.2. 바탕 이론①효소(Enzyme)효소는 단백질의 일종으로 화학 반응에서 반응 물질 외에 미량의 촉매 역할로 반응 속도를 증가하는 효과를 가진다. 이로 이핸 미생 물 내 화학 작용은 촉매의 존재로 인해여 속도가 빨라지게 된다. 하지만 효소가 일반적인 화학 촉매와의 다른 부분이 있다. 일반적으로 화학 촉매의 경우, 고온 및 고압, 높은 Ph 또는 낮은 Ph에서 발현되는 특성을 가지지만, 효소의 경우, 100CENTIGRADE 미만의 온도에서 저압, Ph =7에 가까운 중성에서 작용하는 특성을 보인다. 추가로 효소는 기징 및 생성물에 대한 특이성도 높아 부반응이 거의 없는 특성을 보인다.현제까지 효손 2000 종 이상이 발견되었고, 명칭은 접미다 ?ase를 붙이다. 예를 들어 아밀로스(amylose) 분해 효소는 아밀라제(amylase)로 명칭한다.효소의 메커니즘은 일반적으로 우리가 알고 있듯이, 촉매 사용 시 활성화 에너지를 낮춰 반응속도를 빠르게 하는 효과를 나타내고 있다.Figure 1. 효소 유?무와 활성화 에너지의 관계②효소의 구조효소는 위에서 설명하였듯, 높은 기질 특이성을 가지고 있다. 이는 효소의 구조와 밀접한 관련성이 있는데 해당 효소의 활성부위(Activity Site)를 가지고 있기 때문이다. 해당 부분을 결과적으로 특정 기질과의 결합을 유도한다. 이러한 특성을 기질특이성이라 하고, 해당 특이성은 효소의 활성부위와 기질의 분자 모양에 따라서 결정되게 된다. 해당 반응은 아래와 같은 열쇠-자물쇠 모형으로 결과적으로 효소-기질 복합체(ES)를 형성한다. 일반적으로 대부분의 효소는 보조인자(Cofactor)인 비단백질을 가지고 있다. 이는 영구적으로 기질 및 효소에 붙어있고, 해당 인자는 적정량만 요구되고 과량으로 있을 때는 부작용을 초래할 수 있다.Figure 2. 효소-기질 복합체 형성 과정③효소 활성(Enzyme Activity) & 효소 활성도 단위 (Unit of Enzyme Activity)효소 활성이란 단위 시간당 변환을 받은 기질의 몰수나 양을 의미한다. 이는 효소의 순도를 나타내는 척도로 비활성도(Specific Activity)로 나타낸다.일반적으로 효소 활성은 존재하는 활성 효소의 양의 측정치 이므로, 특정 조건에 따라 달라지는 특성을 보인다,따라서 이러한 효소의 활동도를 나타내는 단위의 성립이 필요하고, 해당 특성을 나타내는 척도는 다양하다. 먼저, SI 단위는 카탈(Katal)이 있다. 1katal은 1초에 1mol의 기질을 변환할 수 있는 효소 활성 양이다. SI 단위보다 실용적이고, 보편적으로 사용하는 단위는 유닛(U)이다. 이는 1분에 1mu mol의 기질을 변환할 수 있는 효소 활성 양을 의미한다. 각 단위에 대한 수식적 풀이는 아래와 같다.1Katal`=` {1mol} over {1sec}##1Unit`=` {1 mu mol} over {1min} = {TRIANGLE `C`(mM)} over {TRIANGLE t(min)} ` TIMES `V(ml)이 때, 1U = 16.67 나노 Katal에 해당하는 관계를 가진다.위에서 언급하였듯, 각 효소는 기질 특이성을 가지고 있고, 반응에 최적화된 온도가 있다. 따라서 해당 효소 활성도 단위에서 효소에 따른 기질 및 온도는 변할 수 있다. 따라서 본 실험에서는 효소 특성에 따라서 1Unit은 40CENTIGRADE 에서 1분 동안 기질 pNPB를 가수 분해하는 효소 활성 양을 의미한다.④흡광도와 효소 활동도 단위의 관계본 실험에서는 흡광도를 통해 얻어낸 세포의 농도를 활용하여 효소의 단위 활동도를 나타낼 수 있다. 흡광도를 설명하기 전, 각 물질은 고유의 파장을 흡수한다는 개념을 숙지한다,Figure 3. Lambert 법칙 & Beer 법칙⑴Lambert 법칙위의 그림을 기준으로 설명하면 해당 큐벳 내 특정 물질(세포)가 있다면 이에 대해 흡수하는 특정 파장의 광을 쏴준다. 이 때, Lambert 법칙은 큐벳의 길이, 즉, 광이 투과하는 길이가 길어지면, 해당 구간 내 물질의 양이 상대적으로 많기 때문에 흡광도가 올라간다. 결과적으로 광 투과 거리가 증가하면 흡광도는 증가하고, 투과도는 감소하게 된다.⑵Beer 법칙다음으로 Beer의 법칙은 동일 큐브 사이즈에 서로 다른 농도의 물질들이 들어 있을 때, 해당 큐벳 내 물질의 농도가 증가할수록 빛의 투과도는 감소하고, 흡광도는 증가하게 된다. 이를 바탕으로 아래 공식을 이끌어 낼 수 있다.Abosorbance(A)`=`Log _{10`} ( {I _{0}} over {I _{t}} )`=` xi `.`c`.`L##I _{0} `:`샘플을`투과하기`전`빛의`양##I _{t} `:`해당`파장이`샘플을`투과하고`나온`빛의`양##xi `:`흡광계수`,`c`:`농도,`L`:`빛의`통과`길이##*`Abosorbance`=`O.D```=` xi .c.`L⑶농도와 효소 활동도 단위위에서 언급하였듯이 본 실험에서 반응물, 즉 기질 pNPB에 대한 효소 CalB 반응으로 1Unit은 40CENTIGRADE 에서 1분 동안 기질 pNPB를 가수 분해하는 효소 활성 양을 의미하고 있다. 해당 반응을 거쳐 생성물 p-NP가 생성되고 이를 UV 흡광을 이용하여 생성물의 농도를 파악할 수 있다. 생성물의 농도는 결과적으로 효소로 인해 변화된 기질의 농도를 의미하고, 해당 과정을 통해 얻어낸 생성물의 농도TRIANGLE C는 1Unit을 구하는데 활용될 수 있다.1Unit`=` {1 mu mol} over {1min} = {TRIANGLE `C`(mM)} over {TRIANGLE t(min)} ` TIMES `V(ml)##* TRIANGLE C`는`p-Np`생성물의`농도를`활용한다.`⑤Candida antarctica lipase B (CalB)본 실험에서 효소로 사용되는 Candida antarctica lipase B (CalB)는 지방 분해 효소(lipase)의 일종이다. 지방 분해 효소는 esterase의 한 종류로 아래와 같은 glycerin과 지방산으로 분해하는 효소이다. 추가로 역반응인 ester화 반응으로 지방의 가수분해에 관여하는 효소이다.Figure 4. 지방 분해 효소(lipase) 반응결과적으로 본 실험에서는 해당 CalB 효소는 수화 반응 작용으로 기질(반응물)인pNPB에서 p-NP를 생성하는 분해 과정을 촉진한다.Figure 5. CalB 효소를 활용한 pNPB의 p-NP 분해3. 기구 및 시약①실험 기구⑴Micropipette 5ml, 1ml, 10μl⑵250ml laboratory bottle⑶Cuvette⑷Aluminium foil본 실험에서 사용하는 pNPB는 빛에 민감한 특성을 가지고 있어, 빛에 의해 광분해 반응이 일어나 p-Np로의 분해가 일어난다. 따라서 본 실험에서 효소 활동도를 정확히 파악하기 위해서는 효소와 반응하는 pNPB 용액을 Aluminium foil을 활용해 최대한 빛을 차단한다.⑸Shaking incubator액체 배지를 흔들어주어 공기 중 산소의 이동을 촉진해주는 기기이다. 이를 활용하여 호기성 세균 및 세포 배양에 사용된다.Figure 6. Shaking incubator⑹UV spectrophotometer본 실험에서는 발현된 생성물에 대한 흡광도를 측정해서 해당 큐벳 내 물질의 농도를 유도하는데 사용된다. 기기는 광원에서 출력된 빛이 기기 내 큐벳을 통과하고 이를 투과한 빛은 감지기를 통해 흡광도 및 투과도를 확인한다. 기기 사용은 먼저 큐벳 2개에 증류수를 담고, 이를 특정 파장 영역을 설정하여 광원을 쏴 해당 값을 Auto Zero로 설정한다. 다음으로 시료가 들어있는 규벳을 넣고, 해당 파장에 광원을 쏴 측정 결과 값을 통해 흡광도 및 투과도를 나타낸다.Figure 7. UV spectrophotometer②실험 시약⑴DDW이차 증류수로 이온 정도가 기존 증류수보다 적은 특성을 보인다.⑵Candida antarctica lipase B solution (CalB)지방 분해 효소인 리파아제 일종으로 지방의 ester 작용기 가수 분해 반응 유도로 지방산 및 Glycerol 분해를 일으킨다.Figure 8. CalB⑶50mM p-nitrophenyl butyrate (pNPB)

자연과학| 2021.02.07| 10페이지| 3,000원| 조회(233)

화학실험, 생물화학공학, 광분해

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결과6 Enzyme activity assay 5조

결과레포트실 험 제 목 :Enzyme activity assay조 :5조학 번 :2015117014이 름 :김선준1. Abstract해당 실험은 자발적인 광분해를 일으켜 pNPB가 p-NP로 분해되는 과정을 효소CalB 투입을 통한 실험군의 흡광도 및 효소 활성단위(Unit)에 대한 비교?측정 실험이다. 광분해를 통한 생성물 p-NP가 405nm 파장에서 피크를 보이므로 해당 값을 설정하여 흡광도를 측정하고, 이를 Lambert-Beer의 공식을 활용하여TRIANGLE C 의 값을 유도한다. 해당 값을 활용하여 최종적으로 효소 활성 단위Unit을 계산할 수 있다. 본래 실험은 activity(U/mg_enzyme)도 계산해야 되지만 실험에서 mg_enzyme의 값을 알 수 없기 때문에 해당 값은 계산하지 못하였다.실제 실험 결과, 이론적인 10min 간격이 아는 각 구간별 12~13min 사이로 4번 흡광도를 측정하였고, 추가적으로 초기(0min)가 아닌 효소 반응이 일어난 (2min)를 초기로 흡광도를 측정하였다. 측정 결과, 대체적으로 선형적인 값을Abs와Unit에서 보여주고 있지만, 구간 12min에서 흡광도가 음의 값을 가지는 오차가 발생하였다. 해당 오차 원인으로 고려되는 사항은 흡광도 측정 과정의 문제, 효소 반응, 실험실 내 광원에 대한 노출 등으로 고려된다. 추가적으로Unit의 값이 작은 이유는 효소를 500배 희석하여 사용하였기 떄문이다.유도하는 효소 활성의 양을 기준으로 계산한다.2. Experiment①실험 기구⑴Micropipette 5ml, 1ml, 10μl⑵250ml laboratory bottle⑶Cuvette⑷Aluminium foil실험에서 사용하는 pNPB의 경우, 빛에 대한 자발적인 광분해 반응을 일으켜 p-NP로 분해되는 성질을 가지고 있기 때문에, 효소 자체의 반응 특성을 정확하게 비교하기 위해서 해당 반응을 최소화하는 방법으로 사용하는 PNPB를 Aluminium foil로 동봉하여 최대한 밀폐한다.⑸Shaking incubator본 실험에서 반응을 최적화할 수 있는 40CENTIGRADE 의 온도 상태에서 반응을 촉진해주는장치로 사용된다.Figure 1. Shaking incubator⑹UV spectrophotometer실험에서 효소를 사용한 실험군의 흡광도를 측정하기 위해 사용된다. 해당 장치 사용 과정에서 영점을 반복적으로 맞춰주어 효소의 시간 별 흡광도를 측정하고, 파장은 405 nm으로 설정한다. 해당 값을 Lambert-Beer 방법을 활용하여TRIANGLE C의 값을 유도할 수 있다.Figure 2. UV spectrophotometer②실험 시약⑴DDW이중으로 증류한 이차 증류수로 기존의 일차 증류수보다 이온 성질이 더 적게 나타난다.⑵Candida antarctica lipase B solution (CalB)지방 분해 효소의 대표적인 물질인 리파아제의 종으로 지방 화학식에 Ester 작용기에 대한 가수 분해 반응을 유도하여 결과적으로 지방산과 Glycerol로 분해시켜준다.Figure 3. CalB⑶50mM p-nitrophenyl butyrate (pNPB)고온 및 넓은 Ph 활성 범위에 대해 안정한 특성을 가지고 있는 효소로 에스테르화 반응 및 에폭시 반응, 가스 분해 반응에 적용되는 촉매의 일종이다. 본 실험 이론에 나타나듯, 빛에 대해서 광분해 특성을 가지고 있기 때문에 자발적으로 p-NP로 분해가 일어난다.⑷50mM Tris-HCl buffer (pH 7.5)Ph 중성 물질로 반응에서 Buffer를 중화시키는 역할을 할 때 사용된다.Figure 4. 50mM Tris-HCl buffer③실험방법1)PNPB의 광분해를 막기 위해서 우선 Bottle을 호일로 감아주고, 50mM Tris-HCl buffer 54.45ml를 넣어준다.Figure 5. 호일로 감은 Bottle(좌), 50mM Tris-HCl buffer 54.45ml(우)2)50mM pNPB 0.55ml를 각 bottle에 넣어 55ml의 0.5 mM pNPB 용액을 만들어준다. 해당 과정에서 빛의 차단을 최대한 지켜준다.Figure 6. pNPB3)Bottle에 500배 희석한 효소(calB) 20 μL을 넣어 실험군을 만들어준다.Figure 7. 효소(calB)4)반응 전 제조한 용액 1ml를 Sampling하여 초기(0min)에 대한 흡광도를 UV spectrophotometer로 405 nm 파장으로 측정한다.5) bottle을 shaking incubator에서 40 ℃으로 반응 후, 이를 10분 간격으로 흡광도를 4번 측정한다. 해당 결과 값은Abs _{405} `/`min그래프로 나타낸다.6)위의 값을 활용하여TRIANGLE C를 유도하고, 이를 통해 아래의 식을 바탕으로 효소 specific activity (U`/`mg _{enzyme})를 계산한다.1Unit`=` {1 mu mol} over {1min} = {TRIANGLE `C`(mM)} over {TRIANGLE t(min)} ` TIMES `V(ml)Abosorbance(A)` == ` xi `.`c`.`b##xi `:`흡광계수`,`c`:`농도,`b`:`빛의`통과`길이##*` xi `=`18500M ^{-1} cm ^{-1}※본 실험에서 mg_enzyme 값을 모르는 관계로 Unit만 산출한다.3. Result※흡광도이론적인 시간(min)흡광도(Abs)실험군00.01610-0.094200.062300.118400.125Table 1. 이론적인 시간 간격(10min)에 대한 Abs해당 값을 Graph로 나타내면 아래와 같다.Figure 8. 이론적인 시간 간격에 대한Abs _{405} /min의 그래프해당 그래프를 통해 이론적으로 시간 10min 간격으로 흡광도를 측정한 결과를 살펴보면 해당 그래프는 광분해 반응에 따른 흡광도의 값이 선형을 띄지 않고, 10min에서 흡광도가 음의 값을 나타나내는 것을 확인할 수 있었다.(선형 그래프에 대한 추세선 :R ^{2`} =0.5746)실제 실험 과정에서 시간 간격이 10min이 아닌 값으로 차이를 나타냈기 때문에 이를 고려하여 아래와 같은 실제 시간 간격을 바탕으로 흡광도 그래프를 나타냈다.실제 시간(min)흡광도(Abs)실험군20.01612-0.094250.062370.118500.125Table 2. 실제 시간 간격에 대한 Abs해당 값을 Graph로 나타내면 아래와 같다.(선형 그래프에 대한 추세선 :R ^{2`} =0.5746)Figure 9. 실제 시간 간격에 대한Abs _{405} /min의 그래프해당 값을 활용하여 Lambert-Beer의 법칙에 따른TRIANGLE C(mM)을 계산한다. 해당 수식을 아래의 공식을 활용하였다.A`=` epsilon bC````` RARROW `A`=` epsilon TRIANGLE Cepsilon `=`18500M ^{-1} Cm ^{-1} 일 때,THEREFORE ` TRIANGLE C=` {A} over {185M ^{-1} m ^{-1} `}이를 통해 구한TRIANGLE C는1U`=` {1` mu mol} over {1`min} `=` {TRIANGLE C`(mM)} over {TRIANGLE t`(min)`} ` TIMES `V`(ml)에 대입하여 Unit의 값을 구하였다.(※구간별V(ml)는 55ml, 54ml, 53ml, 52ml. 51ml로 계산하였다.)(※실험에서 mg_enzyme 값을 모르는 관계로 activity(U/mg_enzyme)는 구하지 않는다)시간(min)TRIANGLE C`(mM)U(μmol/min)20.000086490.002378475120.000508110.002286495250.000335140.000710497370.000637840.000896424500.000675680.000689194Table 3. 실제 시간 간격에 대한TRIANGLE C 와 UnitFigure 10. 실제 시간 간격에 대한Unit`[ mu mol/min]의 그래프해당 그래프 역시 선형성을 띄지 못하고 있다. 실제 시간 12min에서Abs의 값이 음의 값을 나타내 다음과 같은 결과가 나타난 것으로 판별된다.(선형 그래프에 대한 추세선 :R ^{2`} =0.7638)4. Discussion※추가 이론해당 실험에서 Shaking incubator의 온도를 40CENTIGRADE 설정하였고, 이는 1Unit가 40CENTIGRADE 에서 1분 동안 기질 pNPB를 가수 분해하는 효소 활성 양을 의미하고 있기 때문에 설정하였다. 이를 통해 해당 반응을 거쳐 생성물 p-NP가 생성되고 이를 UV 흡광을 이용하여 생성물의 농도를 파악할 수 있었다.본 실험에서 사용하는 CalB 효소는 수화 반응 작용으로 기질(반응물)인 pNPB를 분해 과정을 촉진하여 p-NP를 생성하는 역할을 한다. 본래 pNPB의 경우, 빛에 민감한 특성을 보이는 물질로 자발적으로 광분해 과정을 나타낸다. 따라서 실험 결과를 통해 효소에 따른 광분해 촉진 속도를 파악할 수 있는 것이다.광분해 생성물 P-NP의 경우, 405nm 파장에서 흡수 피크를 가지는 특성이 있어, 해당 특성을 바탕으로 UV 흡광기의 파장을 405nm로 설정하여 진해하였다.

공학/기술| 2021.02.07| 10페이지| 3,000원| 조회(215)

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예비5 Liquid culture & Expression 김

예비레포트실험제목 :Liquid culture & Expression조 :5조학 번 :2015117014이 름 :김선준1. 실험 목적본 실험은 액체 배지를 활용하여 형질전환을 통해 유전자 조작된 세포(eGFP DNA 포함)를 배양한다. 후에 배양된 세포에 IPTG를 첨가하여 단백질 발현을 유도하는 실험이다. IPTG는 단백질 발현 과정에서 유도물질로 조절 유전자에서 발현된 억제물질이 작동유전자에 결합하여 전사를 방해하는 현상을 막아주는 유도체 역할을 한다. 결과적으로 이를 통해 특정 단백질의 적절한 발현을 유도할 수 있다. IPTG 투입은 Cell Growth Curve에 미생물의 성장 속도가 급속도로 빨라지는 대수기에 투입하는데, 이 때 O.D 0.6~0.8는 해당한다.2. 바탕 이론①세포 배양세포 배양은 일반적으로 동물과 같은 다세포 생물에서 특정 세포를 추출하여, 외부에서 증식시키는 생명공학에서 유용한 기술이다. 배양은 배양 세포의 형태에 따라 접착 배양계 세포와 부유 배양계 세포로 분류된다.접착 배양계 세포의 경우, 배양 용기에 부착하여 배양을 실시하여 증식시키는 형태의 세포이고, 이는 주시적으로 새배지에 이식시켜 균주를 보관하는 계대배양(Subcultury)에서 배양지를 계대 시에 교환해주어야 한다.부유 배양계의 경우,부유 배양계 세포의 경우, 배양지 내에서 부유 상태로 증식하는 배양 세포로, 계대 시에 따로 배양지 교환을 실시하지 않고, 희석을 통해 배양을 시행한다.추가로 배양액 종류에 따라 각각 액체 배양과 고체 배양으로 분류된다. 고체 배양과 액체 배양에 대한 장점 및 단점을 아래의 표와 같이 나타난다.액체 배지고체 배지장점?높은 검사율?세포 성장이 매우 빠름?세포 종에 관련 없이 배양에 적합함?세포 배양 오염에 대한 결과를 육안으로 확인 가능함?액체 배지에 비햐여 오염도가 적음단점?배양 과정에서 오염 정도 확인 불가?고체 배지에 비해 높은 오염도? 상대적으로 긴 배양 시간?특정 종의 배양에 대해서 적합하지 않음Table 1. 액체 및 고체 배지Curve⑴유도기(lag phase)일반적으로 세포 배양에서 해당 세포는 기존 환경에서 외부 배양에서 배양하게 된다. 이 때, 해당 미생물은 새로운 환경인 배양에서 초기에 즉각적인 세포 분열일 일어나지 않는다. 이는 새로운 배지 환경에 노출되면 증식에 필요한 ATP 및 필수 보조인자, 리보솜 부족 등의 문제가 형성된다. 따라서 세포 생장에 있어서 해당 성분의 합성 기간이 필요하다. 따라서 이러한 기간이 지체기에 해당하고, 해당 기간 동안에는 세포 수의 증가가 일어나지 않는다.⑵대수기(logarithmic phase)대수기는 미생물의 종의 특성 및 배지 조성과 생장 조건에 따라 세포가 기하 급수적으로 증가하는 시기로 세포 세포의 생리 활성도가 높고, 최대 속도로 분열하여 균수가 대수적으로 증가하는 시기이다. 해당 시기는 일반적으로 세포의 증식속도가 사멸속도보다 빠르다. 일반적으로 대수기 기간 동안에는 생장 속도가 일정하게 나타나 시산에 따른 분열 수가 대략 2배로 증가하는 특성을 보인다. 따라서 위와 같이 Log Scale 직선의 부드러운 특성을 보인다. 해당 구간동안 대부분의 세포는 화학 및 생리적 특성이 균일하여, 세균이 한 번 분열하는데 소요되는 시간인 세대 시간으로 활용된다.본 실험에서 유도물질 IPTG를 첨가하는 구간으로 이는 뒤에 O?D와 연관하여 설명하겠다.⑶정지기(stationary phase)정지기는 새로운 세포의 증가 속도와 사멸 속도가 같은 시기로 결과적으로 균수가 일정한 구간이다. 이는 위의 Cell Growth Curve를 통해 Log Scale이 수평으로 나타나게 된다. 일반적으로 미생물의 정체기가 발생하는 이유는 배지 상의 영양 물질의 고갈이다. 이는 결과적으로 분열에 필요한 요소들의 부족으로 인하여 미생물의 생잘 속도가 저해되는 결과를 유발한다. 가장 대표적인 예시로 호기성 생물의 배양에서 배지의 산소 공급이 원활하지 않으면 해당 세포는 정지기에 도달하게 되는 특성을 보이게 된다.⑷사멸기(death phase)일반적으로 사멸기의 경우갈 및 대사산물의 축적으로 인한 독성 노폐물의 노출 환경에 의한 영향으로 볼 수 있다.해당 환경으로 인해 결과적으로 세포 분열에 저해를 받게 된다.③O.D (Optical Density)우선 O.D (Optical Density)의 의미를 파악하기 전에 Lambert-Beer 법칙과 물질을 고유의 흡광 파장을 가진다는 개념을 이해해야 된다.위의 Figgure 2는 Labert 법칙과 Beer의 법칙을 설명하기 위한 그림이다.Figure 2. Lambert 법칙 (좌), Beer 법칙 (우)⑴Lambert 법칙일반적으로 위의 그림과 같이 물질이 채워진 큐벳에게 광원에서 특정 파장의 빛을 쏘아주면 물질을 빛을 흡수하고 나머지는 통과하게 된다. 이 때, 빛이 통과하는 큐벳의 길이가 길게 되면, 해당 구간 내에 물질의 양이 상대적으로 많아지고 이는 결과적으로 흡수하는 빛이 많아지게 된다. 이는 결과적으로 빛의 투과율을 흡수 층의 두께에 반비례하는 반면 흡광도는 흡수 층에 비례하는 특성을 보이게 된다.⑵Beer 법칙Beer의 법칙은 같이 길이의 큐벳들에 동일 물질에 대한 서로 다른 농도들이 들어 있다고 한다. 이는 결과적으로 고농도에서 시료 내 빛을 흡수하는 분자들이 많기 때문에 고농도에서 흡광도는 증가하고, 투과도는 떨어지게 될 것이다. 이에 대한 결과를 수식으로 표현하면 아래와 같이 나타난다.Abosorbance(A)`=`Log _{10`} ( {I _{0}} over {I _{t}} )`=` xi `.`c`.`L##I _{0} `:`샘플을`투과하기`전`빛의`양##I _{t} `:`해당`파장이`샘플을`투과하고`나온`빛의`양##xi `:`흡광계수`,`c`:`농도,`L`:`빛의`통과`길이##*`Abosorbance`=`O.D```=` xi .c.`L결과적으로 본 실험에서 O.D를 이용하는 이유는 해당 세포의 농도를 확인하기 위해서이다. 이는 결과적으로 세포의 성장 정도에 따른 세포의 수를 확인할 때, O.D를 이용할 수 있다. 해당 실험에서는 세포 수가 기하 급수적으로대로 늘리기 위해서이다.*여기서 eGFP(enhanced Green Fluorescent protein)는 녹색 형광 단백질로 추적하고자하는 단백질에 주입하면 발광하는 특성을 활용하여 해당 단백질의 위치 및 성장을 관찰하는데 사용된다.④Lac Operon(락토스 오페론)락토스 오페론은 DNA가 mRNA를 전사하는 역할을 하는 기능을 가지고 있다. 아래의 그림을 통해 락토스 오페론을 살펴보면, 회색의 나선형 유전자는 DNA이고, 이 DNA에 락토스 오페론이 있는 형태이고, 이는 lacZ, lacY, lacA의 부분을 포함한다. 해당 부분은 β-galatosidase, permease, transacetylase을 발현한다.Figure 3. Lac Operon(락토스 오페론)아래의 그림은 락토오스 오페론의 발현 과정이다.Figure 4. 락토오스 오페론 발현 과정위의 그림을 살펴보면, 락토오스 오페론의 앞부분에 lac l의 존재한다. 해당 부분은 뒤의 lacZ, lacY, lacA의 전사에 사용되는 Promoter와 다른 종류의 Promoter로 전사 및 번역이 이루어지게 된다. 이를 통해 결과적으로 LacI repressor인 억제 물질이 발현되게 된다. 해당 억제 물질은 위의 그림에서 Operator 지역에 붙게 되고, 결과적으로 이는 뒤에 lacZ, lacY, lacA 부분의 전사 및 번역을 억제하는 결과를 유발한다. 이는 억제 물질로 인해 RNA Polymerase가 Operator와 결합할 수 없기 때문에 결과적으로 해당 부분의 전사 및 번역이 이루지지 않는 것이다. 해당 억제 물질은 유도물질인 젖당에 의해 촉진될 때 까지 전사되는 않는 특성을 보인다.만약 젖당의 농도가 높아지게 된다면, 해당 억제물질은 젖당과 결합하게 되고, 결과적으로 RNA Polymer가 Operator와 결합하여 lacZ, lacY, lacA의 전사가 진행되게 된다. 해당 락토스 오페론에 존재하는 하나의 폴리시르트론에서 mRNA가 전사되고, 이는 결과적으로 젖당을 대사하는 효로를 lacZ, lacY, lacA 전사가 억제되는 cycle이 반복되게 된다.Promoter가 RNA Polymer에 효율적으로 결합하기 위해 부속 단백질인 대사물 활성자 단백질(catabolite activator protein;CAP)가 존재한다. 이는 세포 내 포도당이 없을 경우, Promoter에 결합하여 ARP 대사 유도체인 환상 AMP(cyclic AMP;cAMP) 분자 증가시키다. 이 때, cAMP가 CAP에 결합해야만 CAP가 lac promoter에 결합하여 전사를 촉진시킬 수 있다.Figure 5. 젖당 유?무에 대한 락토스 오페론 전사본 실험에서는 이를 Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside(IPTG) (1000X)가 이러한 젖당의 효과로 억제물질과 결합하여 락토오스 오페론의 단백질 발현을 유도하는 효과를 가진다.3. 기구 및 시약①실험 기구⑴Flask⑵Cuvette⑶Shaking incubator본 실험에서 액체 배지를 흔들어주어 공기 중 산소의 이동을 촉진해주는 기기이다.해당 기기는 호기성 세균 및 세포 배양에 사용되는 기기이다.Figure 6. Shaking incubator⑷UV transilluminator & UV spectrophotometer일반적으로 DNA Band를 관찰하기 위해 Agarose gel에서 전기 영동한 Matrix를 활용하여 Band Image를 구현하다.하지만 본 실험에서는 흡광도 측정을 통해 O.D 0.6~0.8인 대수기(logarithmic phase)에 사용된다. 해당 구간에서 조절 유전자를 유발하는 IPTG를 해당 구간에 넣어주어, 결과적으로 eGFP 단백질 발현을 최대로 늘려준다.Figure 7. UV transilluminator(우), UV spectrophotometer(좌)②실험 시약⑴Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside(IPTG) (1000X)해당 시약은 allolactose을 대신하여 락토스 오페론의 억제인자인 시량체 분자와 결합하여

자연과학| 2021.02.07| 12페이지| 3,000원| 조회(212)

유전자, 화학실험, 생물화학공학

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결과5 Liquid culture & Expression

결과레포트실 험 제 목 :Liquid culture & Expression조 :5조학 번 :2015117014이 름 :김선준1. Abstract본 실험은 미리 제조한 LB 액체 배지에서 녹색 형광 단백질인 eGFP DNA를 포함하는 재조합된 세포를 배양하고, 이를 Cell Growth Curve와 연관된 적정 O?D 값(0.6~0.8) 구간에서 IPTG을 주입하여 단백질 발현을 유도하는 실험이다. IPTG는 단백질 발현 과정에서 조절 유전자에서 발현된 억제 물질에 대한 유도 물질로 작동 유전자에 억제 물질이 붙는 현상을 막아주어, 전사 현상 방해를 막아준다. 이를 통해 단백질 정상 발현된다. 해당 실험 결과, 본 조는 재조합된 세포를 넣지 않은 대조군에 비하여 형광 특성을 보이고 있지만, 이론적으로 eGFP DNA을 포함시키는 재조합된 DNA의 녹색 형광을 특성은 보이지 못하였다. 이러한 오차를 보인 이유는 재조합된 DNA의 영향이 가장 큰 것으로 보인다.2. Experiment①실험 기구⑴Flask⑵Cuvette⑶Shaking incubator본 실험에서 액체 배지를 흔들어주어 공기 중 산소의 이동을 촉진해주는 기기이다.해당 기기는 호기성 세균 및 세포 배양에 사용되는 기기이다.Figure 1. Shaking incubator⑷UV transilluminator & UV spectrophotometer실험에서 흡광도 측정을 통해 O.D 0.6~0.8인 대수기(logarithmic phase)에 사용된다. 해당 구간에서 조절 유전자를 유발하는 IPTG를 해당 구간에 넣어주어, 결과적으로 eGFP 단백질 발현을 최대로 늘려준다.Figure 2. UV transilluminator(우), UV spectrophotometer(좌)②실험 시약⑴Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside(IPTG) (1000X)해당 시약은 allolactose을 대신하여 락토스 오페론의 억제인자인 시량체 분자와 결합하여 오페론의 전사를 유발하는 유도체 역할을 000X)항생물질로, 형질 전환된 유전자를 가진 세포의 경우, 해당 항생 물질에 대한 내성을 가지고 있다. 결과적으로 이는 Selection Mark로 사용되어 형질 전화된 유전자를 내포한 세포만을 선별할 수 있게 된다.Figure 4. Ampicillin (1000X)⑶LB배지 (Yeast extract, NaCl, Tryptone)호기성 균류를 배양하는데 가장 일반적으로 사용되는 배지로, 세포 배양에 있어 필수 요소들을 가지고 있다.성분특성Yeast extract효모 추출물로 균이 자라는데 필요한 탄소 원, 아미노산, 비타민 등의 포함한 종합 영양분NaCl균은 세포 내 수송 단계에서 확산 메커니즘을 이용하는데, 이때 배지와 균 사이의 삼투압을 조절하기 위해 사용되는 염Tryptone다량의 단백질 함유 및 탄소 원, 질소원을 포함한 영양소 공급원Table 1. LB 배지 성분의 특성③실험방법※실험 ⑴,⑵는 조교님들이 미리 진행해주셨다.⑴Table 2의 LB배지 조성으로 50ml의 배지 2개를 제조한다.구성 성분조성Tryptone0.5gYeast Extract0.25gNaCl0.5gDDW50mlTable 2. LB배지 조성⑵제조된 LB 배지는 autoclave의 주의사항을 수직하고, 해당 장비에서 멸균한다.⑶멸균 과정을 거친 배지는 clean-bench로 옮겨 60 ℃로 식히고, ampicillin (1000X)를 각 배지에 50mu l씩 넣어준다. 이 때, clean-bench 사용 시, UV 주시하지 않도록 주의한다.Figure 5. LB배지에 ampicillin (1000X) 50mu l을 주입⑷eGFP DNA 포함된 세포 5ml를 배지가 들어있는 1개의 플라스크에 넣고, shaking incubator에서 37 ℃로 배양한다.이 때, 온도를 37 ℃로 배양하는 이유는 대장균 세포의 성장에 최적 온도를 제공하기 위해서이다.Figure 6. LB배지에 eGFP DNA 포함된 세포 5ml 주입(좌), shaking incubator에서 37 ℃로 배양⑸배지가, 세포가 배양된 배지 1ml를 Sampling하여 O.D가 0.6~0.8 될 때까지 기다린다.Figure 7. 영점을 맞추고, O.D가 0.6~0.8까지 기다린다.⑦해당 값에 도달하면 각각의 플라스크에 IPTG (1000X) 50mu l 주입한다.⑧해당 2개 플라스크는 25 ℃ shaking incubator에서 induction한다.Figure 8. 25 ℃ shaking incubator에서 induction한다.3. ResultFigure 9. 2020 생화공 5조 실험 결과(좌), 과년도 생화공 실험 결과(우, 참조)본 조 실험 결고, 좌측에 사진과 같이 실험군이 대조군에 비해 살짝 밝은 색의 푸른 형광빛을 띄고 있지만, 대조군과의 확연한 차이를 볼 수 없다. 또한 이론적으로 실험군에는 재조합 시킨 eGFP DNA의 사용으로 녹색 형광 단백질의 특성을 보이는 유전자가 포함되어 있다. 따라서 이론에 부합하는 결과는 우측에 있는 과년도 실험 결과처럼 eGFP DNA가 포함되지 않은 대조군의 경우, 푸른빛을 나타내지만, eGFP DNA가 포함된 실험군의 경우에는 녹색 빛을 보여야된다.Figure 10. 녹색 형광 단백질이 재조합된 DNA(eGFP DNA)4. Discussion※핵심 이론①배양된 LB 배지를60 CENTIGRADE 로 식힌 후,Ampicillin을 넣어주는 이유Ampicillin은 다흔 항생재보다는 구조적으로 간단한 특성으로 안정한 형태이지만, 하지만 너무 높은 고온에서 배지에 사용하면 Ampicillin의 결합 구조가 깨져버려 항생재 자체의 특성을 잃어버리게 됩니다. 반대로 너무 낮은 온도의 배지에 사용하는 경우, 굳어버려 특성을 잃어버리거나, 느린 속도의 반응성을 보여준다. 따라서 배지 상에서 적정 활용온도인 약60 CENTIGRADE 에서 사용하는 것이 적합하다.②Cell Growth Curve와 O?DO.D (Optical Density)는 Lambert-Beer 법칙을 기반으로 아래와 같은 공식을 통해 구해지는 흡광도를 의미한다.A`빛의`통과`길이##*`Abosorbance`=`O.D```=` xi .c.`L해당 O.D는 결과적으로 후에 설명하는 Cell Growth Cureve와 연관하여, 해당 세포의 농도를 확인하기 위해서 사용되는 수치이다.아래는 Cell Growth Curve의 그림이다.Figure 1. Cell Growth Curve※Cell Growth Curve⑴유도기(lag phase)일반적으로 세포 배양에서 해당 세포는 기존 환경에서 외부 배양에서 배양하게 된다. 이 때, 해당 미생물은 새로운 환경인 배양에서 초기에 즉각적인 세포 분열일 일어나지 않는다. 이는 새로운 배지 환경에 노출되면 증식에 필요한 ATP 및 필수 보조인자, 리보솜 부족 등의 문제가 형성된다. 따라서 세포 생장에 있어서 해당 성분의 합성 기간이 필요하다. 따라서 이러한 기간이 지체기에 해당하고, 해당 기간 동안에는 세포 수의 증가가 일어나지 않는다.⑵대수기(logarithmic phase)대수기는 미생물의 종의 특성 및 배지 조성과 생장 조건에 따라 세포가 기하 급수적으로 증가하는 시기로 세포 세포의 생리 활성도가 높고, 최대 속도로 분열하여 균수가 대수적으로 증가하는 시기이다. 해당 시기는 일반적으로 세포의 증식속도가 사멸속도보다 빠르다. 일반적으로 대수기 기간 동안에는 생장 속도가 일정하게 나타나 시산에 따른 분열 수가 대략 2배로 증가하는 특성을 보인다. 따라서 위와 같이 Log Scale 직선의 부드러운 특성을 보인다. 해당 구간동안 대부분의 세포는 화학 및 생리적 특성이 균일하여, 세균이 한 번 분열하는데 소요되는 시간인 세대 시간으로 활용된다.?이러한 기하급수적으로 성장하는 미생물의 특성 단계 특징으로 해당 구간에서는 높은 세포 농도 증가 수치로 O?D수치가 0.6~0.8 구간으로 나타나고, 해당 구간의 특성을 활용하여 본 실험에서 O?D 0.6~0.8인 대수기에 IPTG를 넣어주게 된다.⑶정지기(stationary phase)정지기는 새로운 세포의 증가 속도와 사멸 속도가 같은 시기로 결h Curve를 통해 Log Scale이 수평으로 나타나게 된다. 일반적으로 미생물의 정체기가 발생하는 이유는 배지 상의 영양 물질의 고갈이다. 이는 결과적으로 분열에 필요한 요소들의 부족으로 인하여 미생물의 생잘 속도가 저해되는 결과를 유발한다. 가장 대표적인 예시로 호기성 생물의 배양에서 배지의 산소 공급이 원활하지 않으면 해당 세포는 정지기에 도달하게 되는 특성을 보이게 된다.⑷사멸기(death phase)일반적으로 사멸기의 경우, 세포 증식속도가 사멸속도보다 낮은 특성을 보이는 구간으로 결과적으로 세포의 수가 감소하는 자기용해가 일어나는 구간이다. 사멸기가 일어나는 대표적인 이유로는 분열에 필요한 영양물질의 고갈 및 대사산물의 축적으로 인한 독성 노폐물의 노출 환경에 의한 영향으로 볼 수 있다.해당 환경으로 인해 결과적으로 세포 분열에 저해를 받게 된다.③Lac Operon과 IPTG (1000X)Lac Operon은 DNA가 mRNA를 전사하는 역할을 하는 기능을 가지고 있다. 아래의 Figure를 통해 Lac Operon을 활용해 본다. 회색의 나선형 유전자는 DNA이고, 이 DNA에 Lac Operon이 있는 형태이다. 이는 lacZ, lacY, lacA의 부분을 포함한다. 해당 부분은 β-galatosidase, permease, transacetylase을 발현한다.Figure 3. Lac Operon(락토스 오페론)아래의 그림은 락토오스 오페론의 발현 과정이다.Figure 4. Lac Operon 발현 과정위의 Figure를 살펴보면, Lac Operon의 앞부분에 lac l의 존재한다. 해당 부분은 뒤의 lacZ, lacY, lacA의 전사에 사용되는 Promoter와 다른 종류의 Promoter로 전사 및 번역이 이루어지게 된다. 이를 통해 결과적으로 LacI repressor인 억제 물질이 발현되게 된다. 해당 억제 물질은 위의 그림에서 Operator 지역에 붙게 되고, 결과적으로 이는 뒤에 lacZ, lacY, lacA 부분의 전사

공학/기술| 2021.02.07| 12페이지| 3,000원| 조회(140)

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