▣ 실험 제목: 용량기구의 사용-1▣ 실험 목적: 피펫에이드와 저울 사용하는 방법과 주의사항들을 숙지하고, 눈금실린더에 용액을 80~90mL가량 붓고 100mL 용량을 맞추는 것과 25mL를 4번 옮겨 100mL 용량을 맞추는 것 중 어떤 방법이 정확한지와 오차범위를 확인한다. ▣ 실험 목표1. 피펫에이드, 계량 피펫, 눈금실린더의 사용법을 익힌다.2. 정확한 용량 측정을 위한 방법을 찾아본다.3. 피펫팅 방법과 주의사항을 숙지한다.4. 저울 사용법과 주의사항을 숙지한다.▣ 실험 원리-메니스커스: 용량 기구 내 액체 표면은 계면장력에 의해 관벽을 따라 주위가 중앙에 비해 올라가든지 내려가든지하여 일종의 곡면을 형성하는 상태-자동 마이크로 피펫에 계량 피펫을 장착한 뒤 손잡이에 있는 버튼을 누르면 자동으로 흡입되고 분주도 가능하다. 많은 양을 피펫팅을 할 수 있다는 장점을 가지고 있지만 마이크로피펫에 비해 정확한 용량을 피펫팅하기에 까다롭기 때문에 시료나 표준 용액의 측정에는 사용하지 않는다.-모아피펫(mohrpipette): 눈금이 원통 부분에만 있음 (TC)-TC: To Contain의 약자로 담겨있는 양을 측정하는 기구이다.-저울 사용시 주의사항: 실온(24 ~ 25 ℃)에 보관하며, 습도는 60±10% 이내 유지하고, 항상 청결하게 유지한다. 진동이 없는 평평한 장소에 설치해야하며, 부식성기체가 발생하지 않는 곳에 설치시약을 접시에 직접 놓지 않고 기름종이에 놓아 햇빛에 직접 노출되지 않게 한다. 검정분동(calibration weights)을 사용하여 정기적으로 점검한다▣ 실험 준비물-증류수, 전자저울, 눈금 실린더, 계량 피펫, 피펫에이드, 피펫 펌프
▣ 실험 제목: 혈액 도말과 혈구 감별▣ 실험 목표: 혈액 내 혈구 관찰을 하기 위해서 채취한 혈액을 슬라이드에 도말하여 염색하고 봉입하여 표본을 현미경을 이용하여 관찰한 후, 비정상 혈구를 관찰해본다. 혈액 검사의 기본적인 단계이며 질병의 진단. 확진에서 나아가 치료방법 결정과 예후 판정을 할 수 있다.▣ 실험 원리: 혈액 도말 검사를 통해서 적혈구, 백혈구, 혈소판의 모양과 수가 정상인지 확인할 수 있으며 다른 종류의 백혈구들을 구별하여 혈액 내 상대적인 비율을 결정할 수 있다. 도말 검사를 통해서 결핍, 질환 및 장애의 범위를 진단하는 데 도움을 줄 수 있다. 적혈구의 경우 빈혈의 분류 및 원인 감별, 적혈구 내 존재하는 말라리아와 같은 기생충을 진단할 수 있으며, 백혈구의 경우 골수형성이상 증후군, 백혈병, 감염이나 염증의 원인, 거대적모세포 빈혈 여부 등을 판단하는데 지표가 된다. 혈소판은 골수 증식성 질환이나 혈소판위성 현상 등을 감별하는 데 도움이 된다.▣실험 과정① 혈액 도말0) 채혈 실습 시간에 숙지한대로 혈액을 채취한다.1) slide glass를 왼손의 엄지와 중지 사이에 잡고 우측 상단에서 1.5cm 정도 떨어진 곳에 혈액 한 방울을 올려놓는다.2) spreader glass를 오른손의 엄지와 중지사이에 잡는다.3) slide glass에 올려 놓은 혈액방울이 spreader 뒷면에 닿게 하고, 오른손에 잡고 있는 sperader를 따라 혈액이 균일하게 퍼진다.4) spreader slide와 slide glass 사이의 각을 약 25~30도 유지하며 slide glass를 지탱하고 있는 왼손 엄지를 향하여 spreader slide를 일정속도로 이동한다.5) slide에 환자명을 작성한 후 도말표면에 먼지 등이 접촉하지 않도록 주의하여 실온에서 충분히 건조시킨다.
▣ 실험 제목: 헤모글로빈 측정 시험▣ 실험 목적: 헤모글로빈(Hb)의 농도를 측정하는 실험이다. 헤모글로빈 농도 측정은 빈혈을 진단하는 필수적인 생화학적 조사 방법이며, 적혈구 증가증의 중요한 지표가 되므로 헤모글로빈 농도 측정 실험을 숙지할 수 있어야 한다. 또한 많은 실험에서 사용되는 micro 피펫의 사용법을 숙지한다.▣실험 목표:헤모글로빈 측정을 위한 채혈을 통하여 올바른 채혈 연습알맞은 피펫과 피펫팁의 사용법혈색소 농도 측정에 필요한 실험기구들을 익힌다헤모글로빈 농도 계산법검량선 이용하여 환산하기▣실험 원리:혈색소는 불안정한 물질이기 때문에 표준액을 만들기 어렵다. 따라서 검체에 혈색소와 반응하는 약제를 넣어서 혈액 중의 혈색소를 안정된 유도체로 변화시켜 그 색조의 농도를 분광광도계를 사용하여 읽어내고 이미 알고 있는 표준액의 검량선을 이용하여 환산한다.헤모글로빈 농도가 성인 남성에서 12.0g/dL 이하, 성인 여성은 11.0g/dL 이하를 빈혈이라 할 수 있으며, 성인 남성이 18.0g/dL 이상, 성인 여성이 16.0g/dL 이상인 경우 적혈구증가증이다. 참고해야 할 점은 헤모글로빈 정상 수치보다 조금 낮다고 해서 빈혈이라 진단할 수 있는 것은 아니며, 여러 상황을 고려하여야 한다. 그 이유는 빈혈 수치가 낮아도 만성적으로 서서히 감소하는 경우에는 빈혈 증상이 없을 수도 있기 때문이다. 분광광도계는 540 nm에서 흡광도를 측정하고 표준 HiCN 용액의 흡광도와 비교하여 농도를 g/L 단위로 환산한다. (임상적으로 헤모글로빈은 g/dL 단위를 많이 사용한다.)
3. 실험 목적: ABI의 측정은 하지동맥 동맥경화증의 선별에 이용되는 비침습적인 검사법으로 뇌경색 및 말초동맥질환 간의 상호 높은 연관성을 고려할 떄 ABI검사는 뇌경색 환자에서의 말초동맥질환 병발 가능성을 알아보는 유용한 방법으로 상지와 하지의 혈압 차이를 이용하여 동맥 경화증과 관련된 각종 질환의 위험을 간단하게 실험하기 위험이다.4. 실험 이론:*ABI: 발목 수축기 혈압을 팔 수축기 혈압으로 단순히 나눈 값으로 정의한다. 오른쪽과 왼 쪽을 따로 계산하기도 하며, 발동맥 혈압은 낮은쪽을 팔동맥의 혈압은 높은쪽을 선택하여 계산하기도 한다. 발목 동맥중에서 발등동맥(anterior dorsalis artery)이나 뒤정강동맥 (posterior tibial artery)의 혈압을 따로 측정하여 평균을 낸 값을 발동맥 혈압으로 이용하거 나 낮은 쪽을 더 의미를 두어 발등동맥혈압으로 계산하기도 한다.*하지동맥경화증: 다리 혈관 중 동맥이 딱딱해지는 질병으로 고혈압, 고지혈증, 당뇨, 흡연, 비만 등의 원인으로 발병한다.*동맥: 일생동안 심장으로부터 발생한 압력을 받으면서 일생동안 일을 하게 됨으로 압력 자체가 혈관내벽에 손상을 주기도 하며, 이외에도 여러 가지 원인에 의하여 혈관내벽이 손 상되게 되면 일종의 염증반응이 생기게 되는데, 이 과정에서 부드럽고 탄력적인 원래의 혈 관의 성질로 치유되는 것이 아니라 탄력층 (elastic layer)이 소실되고 섬유화 (fibrosis)를 초래하여 딱딱한 변성이 유발되는 것이다. 동맥경화증은 콜레스테롤이 많은 동맥경화반 (atheroma)의 유무에 따라 죽상동맥경화증 (atherosclerosis)과 동맥경화증 (arteriosclerosis)으로 나누어진다.
3. 실험 목적심초음파 검사는 인체에 무해한 초음파를 이용하여 심장의 움직임, 구조, 혈류의 흐름, 판막의 이상 유무, 심장 내 종양, 혈전 등을 영상화하고 분석하여 심장 질환을 판단할 수 있으며 심 장과 대동맥에 비침습적으로 모든 방향에서 심장의 절단된 단면을 관찰할 수 있어 심장의 구 조 및 기능을 파악하는데 용이하기 때문에 실시한다.4. 실험 이론심초음파 종류: 심장 초음파검사는 크게 나누어 M-mode 심장 초음파검사, 이면성 심장 초음 파검사, 도플러 심장 초음파검사, 부하 심장 초음파검사 등이 있으며 이 외에는 심장 내 초음 파 감사와 혈관 내 초음파검사가 있다. 일반 심장 초음파검사에 제한이 있는 경우 내시경과 비슷한 탐촉자를 식도에 삽입하여 초음파 영상을 얻는 경식도 초음파검사도 존재한다.임상적 의의: 판막 질환, 허혈성 심장질환, 선천성 심장질환, 심근병증, 심장막 질환, 감염성 심내막염, 폐동맥색전, 대동맥박리 등의 심혈관 질환의 진단과 치료 결정 및 치료 경과의 관 찰에 많은 정보를 제공5. 장비 및 실험 방법5-1) 장비 컴퓨터와 모니터, 탐촉자로 구성 탐촉자는 본체에 선으로 연결되어 있는 유선 마이 크와 같은 장비로 초음파를 발생시키고 인체에서 반사되는 음파를 받는 역할은 한다. 젤은 탐촉자와 피부 사이의 공기를 제거하여 탐촉자와 피부가 밀착되게 하고 잘 미끄러지게 하는 필수적인 장비이다.5-2) 검사 방법심초음파 검사는 환자의 몸을 왼쪽 방향으로 뉘인 상태에서 시행한다. 탐촉자에 초음파 젤을 바른 후 검사를 시작한다. 탐촉자를 눌러 피부와 완전히 밀착시켜 검사 부위를 문지르면서 검사를 시행한다. probe를 좌측흉골연의 제3 또는 제4 늑간에 놓고 영상을 얻는다. 이때, 환자는 왼쪽으로 돌아눕는다.