Gene cloning 레포트

목차

1. 서 론
2. 재료 및 시약
3. 결 론
4. 고 찰

본문내용

Gene cloning이란 생물체의 특정 유전자를 세포에서 추출한 후, 그 유전자를 벡터 DNA에 삽입하고 Competent Cell에서 증식시킴으로써 균일한 유전자 집단을 생성하는 기술이다. 다른 말로 유전자 클론화라고도 하며 특정 유전자의 대량 복제를 위해 쓰이는 중요한 DNA 재조합 기술이다.
이 기술은 기본적으로 수많은 종의 유전체와 종간 유전적 다양성을 연구하기 위해서 유전체의 DNA 조각, 혹은 서로 겹쳐져 있는 염기서열의 분석을 위해 활용된다. 또한 개별 유전자 수준에서 핵산의 탐침(probe)을 생산하는데 이용된다. 핵산의 탐침은 어떤 유전자가 어디에 얼마나 어떻게 발현되는지를 알아내기 위한 주요한 수단이 되는데 이의 제작에 활용될 수 있다. 일반적으로 분자생물학과 세포생물학 연구 분야에서 각 유전자의 다양한 생물학적 기능과 중요성을 이해하기 위한 여러 조작을 위해 관심 유전자를 확보하는 것은 기초적으로 매우 중요하다. 또한 Gene cloning을 이용하여 재조합 단백질을 생산할 수 있어 실제로 생체에서 어떤 단백질의 결핍으로 인해 질환이 유발되는 경우, 치료 단백질 대량 합성을 위한 기술로 활용된다.
Gene cloning의 원리는 유전체에서 우리가 관심이 있는 유전자(Target gene)를 추출하여 PCR로 증폭한 다음, 이 특정 유전자를 벡터 안에 삽입하는 것이다. 벡터에 특정유전자가 삽입되기 전에 운반체 역할의 원형 플라스미드 DNA인 벡터는 제한효소에 의해 잘려져 선형이 되어야 한다. 이후 벡터 DNA의 잘려진 양 끝은 특정유전자의 양 끝과 적절한 공유결합이 일어나 다시 원형의 플라스미드가 형성되게 된다. 특정유전자는 벡터에 클로닝된 후 Competent Cell에 주입되면 벡터에 내재된 작용기작에 따라 그 발현이 조절되는 것이다.

참고자료

· Jordanka Zlatanova, Kensal E.van Holde(2018), 분자생물학, 권혁빈 외 11인, 라이프사이언스
· Robert F.Weaver(2013), 분자생물학(5판), 최준호 외 23인, 라이프사이언스
· Watson, James D. et al. (2014), 왓슨분자생물학 (7판), 양재섭 외 14인, 바이오사이언스
· 김의락 외 11인(1989), 최신생화학, 형설출판사
· 김영희(2018), 분자 생물학 실험서(3판), 월드사이언스
· Alkaline Lysis, 2021-11-18, https://askabiologist.asu.edu/alkaline-lysis
· Analyze sequence: CMV-10, 2021-11-18
· https://www.addgene.org/browse/sequence_vdb/1619/
· BAP1, 2021-11-18, https://www.addgene.org/81024/
· BAP1: Not just a BRCA1-associated protein, https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32877777/
· 유전자 클로닝, 2021-11-18,
· https://terms.naver.com/entry.naver?docId=5569170&cid=61233&categoryId=61233