예비5 Liquid culture & Expression A+ 예비레포트

목차

1. 실험 목적
2. 바탕 이론
3. 기구 및 시약
4. 실험 방법
5. 참고 문헌

본문내용

1. 실험 목적
액체 배지를 통해서 유전자가 조작된 균을 배양한 후에 유전자 발현 조절의 매커니즘에 대해 이해하고 원하는 특정 단백질이 발현이 잘 됐는지 확인한다.

2. 바탕 이론
(1) 배지(Culture Medium)
- 배지란?
미생물이나 동,식물의 세포 등을 증식시키기 위해 각종 영양소(탄소,질소,물,비타민 등)을 골고루 함유하는 물질이다. 배양할 세포의 종류에 따라 각기 다른 종류의 배지를 사용한다.

- 배지의 종류
배지는 크게 3가지 분류를 할 수 있다.

① 배지 성분의 성상에 따른 분류
배지 성분의 성상에 따라 분류에는 단백질의 가수분해물, 동물 조직의 침출물 등 화학적 성질이 분명하지 않은 물질을 혼합하여 만드며 세균의 증식, 분리 배양에 널리 사용되는 자연배지, 화학적 성질이 분명한 것으로 합성하여 만든 배지로써 세균의 생화학적 성상 검사, 균체 성분, 세균의 대사연구에 주로 사용하는 합성배지, 고분자 물질은 들어 있지 않으나 단백질의 완전 가수분해물을 주성분으로한 반합성배지가 있다.

② 물리적 성상에 따른 분류
배지 내에 agar 성분이 들어 있지 않는 배지로 증류수에 미생물이 성장에 필요로하는 영양성분을 녹여 멸균한 액체 배지가 있다. 액체 배지의 종류로는 untrient broth, peptone broth, tryptone broth, brain heart broth 등이 있으며 이들은 미생물의 증식에 이용되고 MR-VP broth 등은 당분해 실험, 세균의 생화학적 성장검사, 증식, 대사 산물을 검출 할 목적으로 사용된다.
배지 내에 agar 성분이 약 1.3~1.5% 함유된 배지로 고체상태인 고체 배지가 있다. 이것은 사용목적에 따라 3가지로 분류할 수 있다. 배양접시에 4mm 두께 정도 넣어 굳힌 것인 평판배지, 실험관을 세운채로 배지를 굳힌 것은 고층배지, 실험관에 배지가 약 45° 경사가 되도록 굳힌 것인 사면배지가 있다.

참고자료

· 2020년 4학년 1학기 생물화학공학 실험노트
· 기초에서 응용까지 최신미생물학 제 2판, 김영재 저, p144~146, p180~182, 385
· 알기 쉬운 분자생물학, 이행석, 기전연구사
· Gray D. Christian 외 2인. ”ANALYTICAL CHEMISTRY 7th”. WILEY(2015). P474-477
· Reece 외 3인. ”생명과학 개념과 현상의 이해 7th”.PEARSON(2011). P190-191