Enhanced thermotolerance

소개

Enhanced thermotolerance에 대한 유전자

목차

1. Abstract
2. Introduction
3. Material & Method
4. Result
5. Discussion
6. Reference

본문내용

1. Abstract
형질전환 된 세균은 항생제 배지에서 자랄 수 있었다. 형질전환 되었다는 것은 재조합된 플라스미드를 가지고 있다는 것이고, 이 플라스미드는 당근의 HSP17.7을 재조합 시킨 것이다. 이번 실험은 이번 실험은 크게 말한다면 형질전환 된 것과 형질전환 되지 않은 것의 비교이다. 즉, Heat shock을 견딜 수 있는 유전자가 있는지 없는 지의 비교이다.
각각 0분, 30분, 60분의 열충격을 가한 다음, 아무 처리도 하지 않은 control과 재조합된 vector 세균의 생존률을 비교하는 방법을 이용하기로 했다. 각각 두 sample을 동등하게 overnight culture 한 다음 sample의 O.D.값을 맞춰준다. 그 후 IPTG를 넣고 실험시간에 다시 배양시킨다. 이제 각각 sample에 50℃의 고온 환경으로 일정한 시간의 열충격을 준다. 0분, 30분, 60분이 지난 sample을 serial dilution한다. 최종적으로 희석 배수가 10-3이 되게 하며 이것을 Amp이 함유된 평판배지에 도말한다. 도말 후에 배양 시킨 후 두 가지 조건의 배지에서 자란 colony 수를 비교하여 생존율과 형질 전환의 유무를 알아본다. 실험 결과 형질전환 시킨 pET11a-HSP17.7는 예상한데로 결과가 나왔지만 형질전환 하지 않은 pET11a가 60분의 Heat shock에서 갑자기 colony수가 많아 졌다. 그래서 몇몇의 학생이 재 실험을 통해 보다 더 좋은 결과를 얻어 냈다. 그 결과는 Discussion에서 언급하겠다.
이 실험을 통해 pET11a-HSP17.7은 열처리에도 내성을 가진다는 것을 알 수 있고 그것은 형질전환이 되었다는 것을 말한다. 반대로 형질전환 시키지 않은 pET11a는 열에 대한 내성이 매우 약하다는 것을 알 수 있다.

2. Introduction
형질전환 시킨 HSP17.7은 Chaperone의 종류에 속한다. 그렇다면 Molecular- chaperone은 무엇인가 알아보겠다.
[생명과학 분야에서 Chaperone은 여러 스트레스로부터 단백질을 보호해주는 분자들을 의미한다. Chaperone 역시 단백질이다.

참고자료

· ①BROCK BIOLOGY OF MICROORGANISMS / MAKIGAN, PEARSON BENJAMIN CUMMINGS / 2008.11.07 / 12판 / 229쪽
· ②http://blog.naver.com/ari49?Redirect=Log&logNo=14002071490