생명과학실험1 A+ Column chromatography 를 위한 다양한 농도의 Tris-HCl buffer 제조 보고서

소개

"Column chromatography 를 위한 다양한 농도의 Tris-HCl buffer 제조 보고서"에 대한 내용입니다.

목차

1. 실험 목적
2. Introduction
3. Materials
4. Methods
5. Results
6. Discussion
7. Reference

본문내용

1. 실험 목적
Column chromatography 를 위해 1 M의 Tris-HCl (pH 7.4) Stock solution 50 mL 를 제조한 다. 이후 그를 이용해 다양한 NaCl 농도의 elution buffer 를 제조한다.

2. Introduction
Ⅰ. Buffer
Buffer 은 weak acid 과 그의 conjugate base 로 이루어진 mixture 로 (Vise versa), 소량의 acid(H+) 나 base(OH-) 가 첨가될 때 pH 변화에 저항하는 경향을 가진다. Buffer 에 소량의 base(OH-) 가 첨가될 시 이는 Buffer 의 weak acid 와 반응해 H2O 를 생성하고, 소량의 acid(H+) 가 첨가될 시 이는 Buffer 의 conjugate base 와 반응해 compound 를 생성하기에 Buffer 은 pH 변화를 줄일 수 있다. Buffer 의 pH는 Henderson-Hasselbalch equation 을 통해 알 수 있으며, Buffer 이 equilibrium 일 때 pH 는 최소한으로 변화한다. 이 때의 pH 는 weak acid 의 pKa 와 같다. Buffer solution 은 NaCl 과 같은 conjugate salt 를 포함하기도 하는데 이는 Conjugate base 와 같은 역할을 한다. Buffer 또는 Buffer system 은 reproducible 한 실험 환경을 유지하거나, 실험 또는 체내에서 단백질의 desired pH 를 조성하기 위해 사용된다.

Ⅱ. 몰농도
몰농도란 용액 1 L 에 들어있는 용질의 mol 수 이다. 용질 6.022x1023 개 당 1 mol 이다.

참고자료

· David L. Nelson, Michael M. Cox, Lehninger Principles of Biochemistry 6th Edition, New York: W. H Freeman and Company, 2016, pp. 64, 65.