생화학실험 만점(A+) 실험 보고서(레포트) 4. LB 배지 만들기

소개

생화학실험 만점(A+) 실험 보고서(레포트) 4. LB 배지 만들기 관련 리포트 입니다.

목차

1. 실험 목적

2. 실험 재료 및 기구

3. 방법
가.   LB 배지 만들기 (100mL)

나.   LB plate 만들기 (500mL)

4. 실험 결과

5. 실험 원리(배경) 및 실험 고찰
가. 실험원리(배경)

나. 실험 고찰

6. 참고 문헌

본문내용

1. 실험 목적: 대장균의 형질 전환을 위한 배지를 준비한다.

2. 실험 재료 및 기구: LB broth, Bacto agar, 250mL 비커, D.W(500ml), Autoclave, 멸균테이프, 호일, 전자저울, 네임펜, peri dish, 약 숟가락, Ampicillin

<중 략>

3. 방법
가.   LB 배지 만들기 (100mL)
① Autoclave 돌릴 때, 넘칠 것을 방지해서, 250mL 비커를 준비한다.
② 비커에 D.W 100mL와 LB를 2.5g (100mL 기준) 넣어준다.
③ 비커 입구를 호일로 막고, labeling을 한 뒤 멸균 테이프를 붙인다.
④ Autoclave에서 121°C에서 15분간 멸균한다.
(121°C까지 Autoclave 온도가 상승하기 위해서는 약 1시간 30분 정도의 시간이 소요된다.)

나. LB plate 만들기 (500mL)
① 과정 ‘가’ 방법으로 액체 LB 배지를 제조한다.
② Agar를 1.5%가 되게, 7.5g (500ml 기준) 넣는다.
③ 삼각 플라스크 입구를 호일로 막고, labeling을 한 뒤 멸균 테이프를 붙인다.
④ Autoclave에서 121°C에서 15분간 멸균한다.
(121°C까지 Autoclave 온도가 상승하기 위해서는 약 1시간 30분 정도의 시간이 소요된다.)
⑤ Labeling한 petri dish에 autoclave 돌린 LB media를 agar가 굳지 않을 정도로 식힌 후 (약65°C ~ 70°C) 50 ug/ml Ampicillin을 넣고 섞는다.

과정④ 용액 500mL에 Ampicillin을 농도 50 ug/ml가 되도록 넣어야 한다.
X : 500mL=50ug : 1mL
X = 2500ug
X = 25mg 이다.
실험에 사용한 Ampicillin 농도는 10mg/mL 이므로, 25mg을 첨가하기 위해선 Ampicillin 10mg/mL를 2.5mL 넣어야 한다.

참고자료

· 이종호 “의생명과학 실험서. 상권”, 국내서 단행본, 서울 : 라이프사이언스, 2021 (p.4-7)
· 신경옥 “(이해하기 쉬운)생화학 실험”, 국내서 단행본, 서울: 파워북, 2014 (p.126-133)