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전기영동 결과보고서2025.01.121. 전기영동 전기영동은 DNA, RNA, 단백질 등의 생물학적 거대분자를 분리하는 데 사용되는 기술입니다. 이번 실험에서는 Agarose gel을 사용하여 PCR 증폭 산물을 전기영동으로 분리하였습니다. 전기영동 과정에서 주의해야 할 점으로는 TAE 완충액의 적절한 양 유지, 전기영동 시간 관리, 시료 주입 시 gel 판 손상 방지 등이 있습니다. 또한 Polyacrylamide gel을 사용하는 실험도 있으며, 이는 단백질 분리나 작은 크기의 DNA 분리에 주로 사용됩니다. 2. PCR PCR(Polymerase Chain Re...2025.01.12
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[생명공학] RNA extraction, cDNA synthesis, qRT PCR2025.05.031. RNA extraction RNA를 분리하는 과정에서 가장먼저 첨가해주는 물질이 Trizol이다. Trizol은 phenol과 guanidinium thiocyanate라는 두가지 중요한 성분으로 이루어져있고 이들이 cell을 lysis하고 RNA를 안정화시키는 역할을 한다. 추가적으로 chloroform을 첨가하여 RNA와 다른 물질들을 분리한다. 2. cDNA synthesis cDNA 합성 과정에서는 reverse transcriptase 효소가 핵심적인 역할을 한다. 이 효소는 RNA를 DNA로 역전사하는 기능을 가지고...2025.05.03
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DNA 분리2025.01.161. DNA 구조 DNA는 인산, 당, 염기가 1:1:1의 비율로 결합한 뉴클레오타이드의 결합체이며, 2개의 폴리뉴클레오타이드가 이중 나선 구조를 이루고 있다. DNA 가닥은 인산이 가장 바깥쪽에 위치하고 있으며, 4가지 질소 염기(A, T, G, C)가 수소결합으로 쌍을 이루고 있다. 2. 중심원리 DNA를 주형으로 하여 RNA를 합성하는 전사 과정과, 전사된 mRNA가 단백질로 번역되는 과정으로 구성된다. 원핵세포의 경우 전사와 번역이 동시에 일어날 수 있다. 3. DNA 추출 원리 세포 및 조직을 파괴하고 단백질을 변성시킨 후...2025.01.16
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Reverse Transcription PCR 보고서2025.05.131. PCR의 정의 PCR은 Polymerase chain reaction으로 중합효소 연쇄반응을 말한다. DNA 분자 상에서 어떤 부분만의 염기서열을 증폭시켜 적은 양의 DNA로도 PCR을 통해 많은 DNA copy를 만들어 낼 수 있다. 2. PCR의 원리 및 방법 PCR은 DNA 가닥을 분리하고, primer가 주형가닥의 상보적인 염기서열에 결합하도록 한 후, Taq polymerase에 의해 새로운 DNA 가닥이 합성되는 과정을 반복하여 많은 DNA 단편을 복사해 내는 기술이다. 3. PCR의 이용 PCR은 의학적 진단, 유...2025.05.13
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전기 영동을 통한 DNA 분리 실험2025.05.011. 전기 영동 전기 영동은 물질을 분리하는 실험 방법의 한 종류로, 전기장을 걸어준 환경에서 물질들의 이동한 거리의 차이를 이용하여 물질을 구분하는 것이다. 전기 영동의 종류에는 Zone 전기 영동, 등전점 전기 영동, 겔 전기 영동 등이 있다. 겔 전기 영동은 전류를 흘려주어 전하를 띤 분자가 겔 내부에서 이동하여 분리되도록 하는 기법이다. 2. Agarose gel Agarose gel은 agarose 분자가 교차되어 있는 형태로, 3차원적인 그물 구조를 띤다. Agarose gel 내부에는 분자가 통과할 수 있는 구멍이 있어...2025.05.01
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[만점보고서]Plasmid DNA 추출과 DNA 정량 실험보고서2025.01.171. Plasmid DNA 추출 Plasmid DNA는 세균의 세포 내에서 염색체와 별개로 존재하는 자가복제 DNA이다. Plasmid DNA 추출을 위해 Alkaline Lysis 법을 사용하여 세포를 용해시키고 plasmid DNA를 염색체 DNA와 분리한다. 이 과정에서 다양한 buffer를 사용하여 pH 변화를 조절하고 불순물을 제거한다. 2. DNA 정량 Nanodrop 분광광도계를 이용하여 추출한 plasmid DNA의 농도와 순도를 측정한다. 260nm 흡광도로 DNA 농도를 측정하고, 260nm/280nm 및 260n...2025.01.17
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Nester 미생물학 7장: 전사, 복제, 번역 및 유전자 발현2025.11.171. 전사(Transcription) 전사는 DNA의 단일가닥을 주형으로 RNA를 합성하는 과정으로, 개시, 연장, 종료 단계로 이루어진다. RNA 중합 효소가 프로모터에 결합하고 시그마 인자의 도움을 받아 개시되며, DNA의 5'에서 3' 방향으로 이동하면서 RNA를 합성한다. DNA의 염기 A, T, G, C는 RNA에서 U, A, G, C로 전사되며, 종료부위에서 Rho 단백질이나 NusA 단백질에 의해 전사가 종료된다. 2. DNA 복제(DNA Replication) DNA 복제는 시작, 연장, 종결 단계로 이루어진다. 복제...2025.11.17
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RT-PCR 실험 및 결과 분석2025.05.101. RT-PCR RT-PCR은 RNA를 추출하고 cDNA를 합성하여 PCR로 증폭하는 기술입니다. 이 실험에서는 Labozol을 이용한 RNA 추출, cDNA 합성, GAPDH와 Twist1 유전자의 RT-PCR 증폭을 진행했습니다. RNA 추출 과정에서 chloroform으로 수용성층과 지용성층을 분리하고, isopropanol로 RNA를 침전시켰습니다. 이후 ethanol로 세척하고 DEPC 처리된 물에 재용해하여 RNA 농도와 순도를 확인했습니다. RT-PCR 결과 GAPDH는 일정한 발현을 보였고, Twist1은 chemi...2025.05.10
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Gel extraction 예비레포트 결과레포트2025.05.161. Gel Extraction 이번 실험의 목적은 전기영동한 Gel로부터 원하는 DNA를 추출하기 위해 Gel Purification Kit을 이용하여 DNA를 정제하는 것이었다. 실험 결과 DNA 농도가 예상보다 낮게 나왔는데, 이는 버퍼로 계속 씻어주어 DNA 양이 줄어들었거나, 원심분리가 제대로 되지 않아 원하는 DNA가 하층액에 섞여 버려졌을 가능성, 또는 DNA가 단백질이나 페놀로 오염되었을 가능성 때문인 것으로 보인다. 이를 해결하기 위해서는 원심분리 시간을 늘리거나, 이소프로판올을 추가로 넣어 DNA를 더 잘 침전시키...2025.05.16
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PCR과 전기영동을 이용한 DNA 증폭 및 분석2025.11.141. 중합효소연쇄반응(PCR) PCR은 특정 표적 유전물질을 증폭하는 검사법으로, 소량의 DNA로부터 염기 순서가 동일한 유전물질을 대량으로 증폭할 수 있다. 열변성(94℃), 결합(62℃), 신장(72℃)의 3단계를 반복하며, 각 사이클마다 DNA가 2배로 증폭되어 n회 반복 시 2의 n승배 증폭이 가능하다. 인간의 DNA 증폭을 통한 유전질환 진단, 세균·바이러스·진균의 감염성 질환 진단 등에 활용된다. 2. DNA 구조 및 복제 DNA는 두 뉴클레오타이드 선형 중합체가 반대 방향으로 이중나선 구조를 형성하며, 염기는 나선 내부...2025.11.14
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