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RNA 추출 실험: Guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform 방법2025.11.171. RNA 추출 방법 및 원리 생물 샘플에서 RNA를 추출하기 위해 phase separation을 이용한 Guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction method를 사용했다. 옥수수 잎 조직을 액체질소로 급속 냉각하여 분쇄한 후 Tri-RNA reagent를 첨가하여 세포를 용해시킨다. Chloroform을 첨가하여 원심분리하면 상층의 맑은 aqueous phase에 RNA가 분리되며, isopropanol로 침전시킨 후 70% ethanol로 세척하여 순수한 RNA를 얻는다. ...2025.11.17
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RNA 추출 및 정량 실험 결과 보고서2025.01.041. RNA 추출 실험의 목적은 Trizol을 이용하여 RNA를 추출하고 정제하는 방법을 익히고, 추출된 RNA의 품질과 양을 확인하는 것입니다. 실험 방법으로는 6-well plate에 세포를 준비하고, PBS로 세척한 후 Trizol을 처리하여 RNA를 추출하는 과정이 포함됩니다. 이를 통해 RNA 추출 및 정량 기술을 습득할 수 있습니다. 1. RNA 추출 RNA 추출은 생물학 및 의학 연구에서 매우 중요한 과정입니다. RNA는 유전 정보를 전달하고 단백질 합성에 관여하는 핵산으로, 세포의 다양한 기능을 이해하는 데 필수적입니...2025.01.04
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새로운 박테리아 종 동정을 위한 DNA 추출2025.05.081. DNA 추출 과정 본 실험에서는 미지 균주의 DNA를 추출하는 과정을 수행하였다. 균주를 PBS에 현탁하고 원심분리하여 세척한 뒤, lysozyme과 SDS를 처리하여 세포를 용균시켰다. 이후 PCI, chloroform을 이용하여 단백질과 불순물을 제거하고 에탄올 침전을 통해 DNA를 회수하였다. 최종적으로 0.1x SSC 완충액에 녹여 DNA 농도를 측정하였다. 그러나 260/280, 260/230 비율이 이상적인 수준에 미치지 못하여 순수한 DNA 추출에는 어려움이 있었던 것으로 나타났다. 2. DNA 추출 시약의 역할 ...2025.05.08
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전기영동 예비보고서2025.01.121. 전기영동 전기영동은 생체 고분자들을 분석, 분리하는 방법 중 하나입니다. 전기영동은 DNA, RNA나 단백질 등이 전하를 띄고 있고 이들이 전기장에 놓이게 된다면 이동성을 가진다는 것을 기본으로 합니다. 전기영동의 종류에는 띠 전기영동, 등속 전기영동, 등전점 전기영동, 2D 전기영동이 있습니다. DNA 이동에 영향을 주는 요인으로는 DNA 크기에 따른 Gel의 농도, DNA 분자의 크기, 전압, DNA의 형태 등이 있습니다. TAE buffer는 Tris, Acetate, EDTA로 구성되어 있으며 DNA를 끌어주는 역할을 ...2025.01.12
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플라스미드 DNA 정제2025.01.121. 플라스미드 DNA 분리 플라스미드 DNA는 재조합 DNA 조작을 위한 운반체 DNA로 사용되며, 대장균에 플라스미드를 삽입하는 과정을 Bacterial Transformation이라고 한다. 대장균 세포에는 플라스미드 DNA와 염색체 DNA가 독립적으로 존재하므로, 플라스미드 DNA를 따로 분리하는 과정을 Purification of plasmid DNA라고 한다. 알칼리 용해법(Alkali lysis)은 높은 pH의 알칼리성 용액을 사용하여 세포벽과 세포막을 용해시킨 후, 산성 용액을 처리하여 플라스미드 DNA만을 분리해내는...2025.01.12
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브로콜리 DNA 추출 실험 보고서2025.11.181. DNA 추출 원리 및 방법 브로콜리 조직을 막자사발로 분쇄하여 세포벽을 파괴한 후, 계면활성제를 이용해 세포막과 핵막을 용해시킨다. 소금은 Na+ 이온을 제공하여 음전하를 띤 DNA 분자 간의 반발력을 감소시키고, 에탄올의 탈수작용으로 DNA를 응축시켜 흰색 침전물 형태로 추출한다. 이 과정을 통해 식물 세포 내 DNA와 단백질을 분리할 수 있다. 2. 계면활성제의 역할 계면활성제는 친수성과 소수성 부분을 가진 양성분자로, 세포막의 인지질 이중층 구조와 유사한 특성을 가진다. 계면활성제가 세포막과 핵막의 인지질과 결합하면 막 ...2025.11.18
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생화학 실험/실습 보고서 (DNA Gel electrophoresis)2025.01.231. 제한효소 제한효소는 DNA의 특정한 염기배열을 식별하고 이중사슬을 절단하는 엔도뉴클레아제로서 재조합 DNA를 만들기 위해서 사용하는 특수한 효소이다. 제한효소의 종류에는 1형, 2형, 3형, 4형, 5형 등이 있으며, 각각 인식하는 염기서열과 절단 방식이 다르다. 하나의 플라스미드는 여러 제한효소에 의해 자를 수 있다. 2. 전기영동 Agarose gel에서의 DNA pattern은 smear, 용해되지 않은 물질과 고분자량의 DNA, RNA cloud, supercoiled plasmid, relaxed 또는 nicked c...2025.01.23
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바이러스 RNA 추출 및 PCR 실험 보고서2025.11.141. RNA 추출 및 정제 바이러스 RNA 추출을 위해 HeLa 세포에 HRV1B를 감염시킨 후 세포를 용해하여 RNA를 분리했다. VB lysis buffer로 세포를 용해하고 AD buffer로 RNA에 염을 결합시켜 침전시킨다. VB column tube의 양전하 필터를 이용해 음전하를 띤 RNA를 분리하고, W1 buffer와 Wash buffer로 세척한 후 Nuclease-free water로 용출했다. 나노드랍을 사용하여 RNA 농도를 측정한 결과 대조군 227.8ng/ul, 실험군 195.2ng/ul로 측정되었다. 2...2025.11.14
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DNA 전사와 번역과정 구체적으로, <핵산의 정의, 구성성분, 전사, 번역,TRNA)2025.05.071. 뉴클레오티드 모든 생물의 세포 속에는 인산, 5탄당, 염기라는 물질로 구성된 핵산이 공통적으로 존재한다. 이 세 가지 각 한 분자의 물질이 연결되어 있는 것을 뉴클레오티드라고 부른다. 염기는 5종류(아데닌, 구아닌, 티민, 시토신, 우라실)이 존재하며 당은 인산과 염기를 연결시키는 역할을 한다. 또한 5탄당은 탄소원자가 5개 있는 탄수화물의 일종인데 줄여서 당이라고 이야기한다. 2. 리보오스와 디옥시리보오스 당은 리보오스와 디옥시리보오스로 구분된다. 5탄당이 디옥시리보오스이면 DNA(디옥시리보핵산)라고 하고 리보오스이면 RNA...2025.05.07
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DNA 전기영동 실험 예비 보고서2025.01.031. DNA DNA는 deoxyribonucleic acid의 약자로, 핵산을 구성하는 기본 구조인 리보스의 2번 탄소에서 산소 원자 하나가 제거된 형태의 핵산을 의미한다. DNA는 여러 개의 뉴클레오타이드가 연결되어 있는 폴리 뉴클레오타이드로 구성된 이중 나선 가닥 형태이다. 생명체의 DNA는 보통 유전 정보를 보관하는 데에 이용된다. 2. 전기영동 전기영동은 전기장 내에서 용액 속의 펩타이드, DNA, RNA, 단백질 등의 하전된 물질들이 반대 전하의 전극을 향해서 이동하는 현상이다. 이때 하전된 물질의 전하량이나 크기, 모양,...2025.01.03
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