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DNA 추출 및 전기영동2025.01.121. DNA 추출 바나나에서 DNA를 추출하는 과정을 설명합니다. 바나나를 으깨고 소금, 세제를 섞어 세포벽을 파괴하여 DNA를 추출합니다. 에탄올을 사용하여 DNA를 침전시키고 물에 녹여 관찰할 수 있습니다. DNA는 음전하를 띠는 거대분자이며 뉴클레오타이드로 구성되어 있습니다. 2. 전기영동 추출한 DNA를 전기영동 실험을 통해 분리할 수 있습니다. 아가로즈 겔을 만들고 DNA 샘플에 loading buffer를 섞어 겔의 well에 로딩합니다. 전기장을 걸면 DNA가 음전하를 띠므로 양극 방향으로 이동하게 됩니다. DNA의 크...2025.01.12
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플라스미드 DNA 준비 및 제한효소 지도 작성2025.11.121. 플라스미드 DNA 준비 플라스미드는 박테리아 세포에서 발견되는 작은 원형 DNA 분자로, 유전자 공학 실험에서 중요한 벡터로 사용됩니다. 플라스미드 DNA 준비 과정은 박테리아 배양, 세포 용해, DNA 추출 및 정제 단계를 포함하며, 순수한 플라스미드 DNA를 얻기 위해 여러 정제 기법이 적용됩니다. 이 과정을 통해 얻은 플라스미드는 분자생물학 연구와 유전자 클로닝에 필수적인 재료입니다. 2. 제한효소 지도 작성 제한효소 지도(Restriction map)는 DNA 분자 위에서 특정 제한효소의 인식 부위와 절단 위치를 나타내...2025.11.12
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플라스미드 추출 및 정제 실험2025.11.171. 알칼리 용해법(Alkaline Lysis Method) 플라스미드 DNA를 분리하는 표준 방법으로, 알칼리 환경에서 대장균의 세포벽과 세포막을 용해시킨 후 산성 용액으로 DNA를 분리한다. 이 방법은 플라스미드 DNA와 염색체 DNA의 크기 및 구조적 차이를 이용하여 선택적으로 플라스미드만 추출할 수 있다. 높은 pH에서 큰 크기의 염색체 DNA는 변성되지만, 작고 supercoiled 구조의 플라스미드 DNA는 중화 과정을 통해 원상태로 복원되는 원리를 활용한다. 2. 플라스미드 DNA의 특성 플라스미드는 대장균 내에서 주로...2025.11.17
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PCR 산물 정제 실험 예비 레포트2025.11.151. PCR 산물 정제 원리 작은 DNA 조각을 정제하는 원리를 이해하고 정제 방법을 숙지하는 것을 목적으로 한다. Column을 이용한 DNA 정제 방법을 사용하여 PCR product를 정제한다. 이 과정에서 Gel & PCR purification system kit을 활용하며, 제조사의 protocol을 따른다. 정제된 DNA는 Agarose Gel 전기영동으로 농도를 확인하고 4℃에서 보관한다. 2. Column을 이용한 DNA 정제 방법 Spin column을 이용한 DNA 정제 과정은 다음과 같다. 정제할 DNA를 포함...2025.11.15
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플라스미드 DNA 정제2025.01.121. 플라스미드 DNA 분리 플라스미드 DNA는 재조합 DNA 조작을 위한 운반체 DNA로 사용되며, 대장균에 플라스미드를 삽입하는 과정을 Bacterial Transformation이라고 한다. 대장균 세포에는 플라스미드 DNA와 염색체 DNA가 독립적으로 존재하므로, 플라스미드 DNA를 따로 분리하는 과정을 Purification of plasmid DNA라고 한다. 알칼리 용해법(Alkali lysis)은 높은 pH의 알칼리성 용액을 사용하여 세포벽과 세포막을 용해시킨 후, 산성 용액을 처리하여 플라스미드 DNA만을 분리해내는...2025.01.12
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RNA 추출 실험: 원리, 방법 및 순도 분석2025.11.171. RNA 추출 원리 및 중심원리 DNA의 유전정보는 DNA → RNA → 단백질 순서로 전달되는 중심원리(Central Dogma)를 따른다. DNA의 정보가 RNA로 전달되는 과정을 전사(transcription), RNA에서 단백질이 합성되는 과정을 번역(translation)이라 한다. RNA 획득은 유전자 발현의 양상과 메커니즘 연구에 필수적이며, cDNA 제작 및 RT-PCR 등의 실험 수행을 위해 필요하다. RNA는 DNA와 유사한 물리화학적 성질을 가지며, 세포 분쇄, 단백질 분해 제거, RNA 농축 및 검정 순서를...2025.11.17
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Purification of Plasmid DNA by Mini-prep2025.01.211. Plasmid DNA Plasmid DNA는 bacterial cell의 소기관으로서 transformation 등 다양한 곳에 사용된다. Plasmid DNA는 host cell 당 적게는 1~3개, 많게는 수십 개까지 복제되기도 한다. Plasmid DNA 또한 유전자를 지녔기에 transformation을 일으킬 수 있으며, vector로서 사용되기도 한다. 2. Plasmid DNA Purification Mini-prep은 bacteria로부터 plasmid DNA만을 정제하는 실험법이다. 수확한 bacteria에 다...2025.01.21
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인천대학교 나노바이오실험(1) A 자료) 4. Plasmid perp & Gel Electrophoresis2025.01.041. Plasmid DNA 플라스미드 DNA는 세균의 세포 내에 염색체와는 별개로 존재하면서 독자적으로 증식할 수 있는 DNA이다. 유전공학에서는 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소로 끊은 뒤, 필요로 하는 유전자를 삽입하여 이를 다시 세균에 넣어 배양하는 유전자재조합 기술을 사용한다. 2. Plasmid DNA 추출 방법 플라스미드 DNA를 추출하는 방법에는 크기 차이를 이용한 방법과 구조 차이를 이용한 알칼리 용해 방법(Alkaline Lysis method)이 있다. 알칼리 용해 방법은 높은 pH의 알칼리성 용액...2025.01.04
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HEK293T 세포 계대배양 및 핵산 추출 실험2025.11.171. HEK293T 세포 계대배양 HEK293T 세포는 SV40 T 항원을 발현하는 형질전환 세포로, 높은 단백질 발현을 유도한다. 계대배양은 trypsin-EDTA를 이용하여 세포를 배양용기에서 분리하고, centrifuge로 세포를 수집한 후 새로운 배지에 옮기는 과정이다. 세포는 부착단백질과 결합할 때 길게 늘어난 형태를 보이다가, trypsin 처리 후 구형으로 변한다. 8일간의 배양 관찰 결과 시간이 지날수록 배지에 세포가 증식하여 빈 공간이 감소하는 것을 확인할 수 있다. 2. Genomic DNA 추출 Genomic D...2025.11.17
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브로콜리 DNA 추출 실험 결과 보고서2025.11.131. DNA 추출 방법 브로콜리에서 DNA를 추출하기 위해 소금과 계면활성제 용액을 만들어 브로콜리를 분쇄한 후 혼합하고, 고운 체망으로 걸러낸다. 추출액에 에탄올을 2배 부피로 천천히 붓고, 생성된 하얀 실 모양의 물질을 나무젓가락으로 감아 올린다. 이 과정을 통해 식물 세포에서 DNA를 분리하고 관찰할 수 있다. 2. 계면활성제의 역할 계면활성제는 인지질과 유사한 구조로 미셀을 형성하여 세포막과 핵막의 인지질 성분을 녹인다. 친수성 부분이 세포막의 친수성 부분에 결합하여 제거함으로써 DNA와 단백질이 방출될 수 있게 한다. 이를...2025.11.13
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