MTT assay를 통한 세포 viability 측정

문서 내 토픽

1. MTT assay

MTT assay는 살아있는 세포에서만 환원 반응이 일어나는 MTT에 의한 세포 대사 활성을 평가하는 방법입니다. 항암제를 투여하지 않은 배지와 농도별로 항암제를 처리한 배지의 UV 흡광도 값을 비교하여 세포의 생존 비율(cell viability)을 계산할 수 있습니다. 실험 결과, DOX의 농도가 증가할수록 세포 생존율이 감소하는 것을 확인할 수 있었습니다.
2. 항암제 독성 평가

항암제를 세포 배양배지에 투여한 후 배양한 암세포는 약제의 농도에 따라서 생존 세포의 비율이 줄어듭니다. MTT assay를 통해서 항암제를 투여하지 않고 순수한 배지에서 배양한 암세포에 비해 생존세포의 비율이 얼마나 감소하였는지 UV 흡광도 값을 비교할 수 있습니다.
3. HeLa 세포

HeLa 세포는 1951년 2월 8일 Henrietta Lacks라는 환자의 자궁경부암 조직에서 얻어낸 세포계입니다. 연구에서 쓰이는 다른 세포주에 비하여 내성이 있고 증식력이 높은 것이 특징이며, 바이러스학, 암연구, 분자생물학 등의 연구 재료로 널리 사용되고 있습니다.

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1. MTT assay

MTT assay는 세포 생존율을 측정하는 대표적인 방법 중 하나입니다. 이 방법은 살아있는 세포에서 미토콘드리아 효소 활성을 측정함으로써 세포 생존율을 간접적으로 확인할 수 있습니다. MTT assay는 빠르고 간단하며 재현성이 높아 세포 독성 평가, 세포 증식 분석, 약물 스크리닝 등 다양한 분야에서 널리 사용되고 있습니다. 그러나 MTT assay는 세포 종류, 배양 조건, 처리 시간 등에 따라 결과가 달라질 수 있어 실험 설계와 데이터 해석에 주의가 필요합니다. 또한 MTT 시약이 세포 내에서 환원되어 생성되는 포르마잔 결정의 용해도와 흡광도 측정 방법에 따라 정량적인 결과에 차이가 날 수 있습니다. 따라서 MTT assay를 활용할 때는 이러한 한계점을 고려하여 실험을 설계하고 결과를 해석해야 합니다.
2. 항암제 독성 평가

항암제 독성 평가는 신약 개발 과정에서 매우 중요한 단계입니다. 항암제는 암세포를 선택적으로 죽이는 것이 목적이지만, 정상 세포에도 일정 수준의 독성을 나타낼 수 있기 때문입니다. 따라서 항암제 후보물질의 독성을 정확히 평가하여 안전성을 확보하는 것이 필수적입니다. 항암제 독성 평가에는 다양한 in vitro 및 in vivo 실험 방법이 사용됩니다. 대표적으로 MTT assay, LDH assay, apoptosis 분석 등의 in vitro 실험과 동물 실험이 활용됩니다. 이를 통해 세포 생존율, 세포 독성, 세포 사멸 경로 등을 확인할 수 있습니다. 또한 약물 동태학적 특성, 장기 독성, 면역 독성 등도 평가해야 합니다. 항암제 독성 평가 결과는 신약 개발 과정에서 매우 중요한 의사결정 기준이 됩니다. 독성이 높은 물질은 후보군에서 제외되고, 안전성이 확보된 물질만이 임상 시험 단계로 진입할 수 있습니다. 따라서 정확하고 신뢰할 수 있는 독성 평가 데이터를 확보하는 것이 매우 중요합니다.
3. HeLa 세포

HeLa 세포는 1951년 Henrietta Lacks로부터 채취된 자궁경부암 세포주로, 현재 가장 널리 사용되는 인간 세포주 중 하나입니다. HeLa 세

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