[생명공학] Transformation

소개

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(참고 자료의 출처는 레포트 내에 기재되어 있습니다)

목차

1. Title
2. Date
3. Objective
4. Theory
5. Instrument & Reagent
6. Procedure
7. Reference
[출처]
8. Result
9. Discussion

본문내용

1. Title Transformation
2. Date 2008. 10. 29
3. Objective
- 재조합된 DNA를 competent cell에 삽입하여 형질전환 후, ampicillin과 x-gal이 들어 있는
LB plate에서 배양하여 colony를 형성시킨 후, 색깔로 재조합 DNA를 판별하여 형질 전환의 원리와 기술을 익히고 Lac Operon의 Mechanism을 이해한다.
4. Theory
- Transformation(형질전환)이란 외부 DNA를 숙주 세포 내에 넣어주어 세포가 원래의 성질과는 다른 새로운 유전형질을 추가로 얻게 되는 것을 말한다. E. coil의 형질전환은 초기에는 발견이 되지 않았으나 bacteria를 차가운 로 처리한 다음 잠시 열처리를 하면 bacteriophage λ가 세포 내로 들어가 phage를 형성한다는 사실에 의해 처음 관찰되었다. 이와 같은 처리는 bacteria의 세포막이 DNA가 infection될 수 있는 competent 상태로 일시적으로 유도되는 것으로 이때의 bacteria를 protoplast라고 한다.
transformation은 E.coli와 같은 prokaryote(원핵생물)를 이용할 때 사용하는 용어로 구분은 다음과 같다.
<항생제를 이용한 selection>
Transformation한 후의 결과는 다음 세 가지 중의 하나로 생각할 수 있다.
① Plasmid가 들어가지 않은 경우
② Plasmid가 들어갔으나 plasmid에 원하는 gene이 들어가지 않은 경우
③ 원하는 gene이 포함된 plasmid가 들어간 경우
Plasmid에는 antibiotics resistance gene(항생제 저항 유전자)이 포함되어 있으므로 항생제가 포함된 배양접시에서 plasmid가 들어가지 않은 cell은 사멸하여 colony를 생성하지 못하고 colony가 생성된 배양접시는 모두 plasmid가 들어가 있는 cell이다.

참고자료

· http://www.genehunter.co.kr (transformation부분)
· http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_workshop
· http://en.wikipedia.org/wiki/Ampicillin