DNA 추출 및 유전자 클로닝 원리와 방법

소개

유전자 클로닝의 방법과 원리 유전자 조작기술등을 조사한
레포트입니다^^

목차

유전자 클로닝
유전자 클로닝이란?
클로닝 과정
유전자 cloning
① PCR (중합효소 연쇄반응)
② 겔 전기 영동법
유전자 cloning에 필요한 기술
DNA 조작기술
운반체: plasmid 와 Bacteriophage
DNA 추출(검출)

본문내용

이배체 생물 또는 일배체 생물의 배우자에 포함된 유전자 전체를 genome이라 부른다. 원핵생물로서 대장균의 염색체는 수천 종류의 유전자가 포함되어 있다. 가장 단순한 진핵 생물인 효모의 genome size는 대장균 genome의 2.9배이며 포유동물의 경우는 약 6000배에 이른다. 사람의 유전자를 3kb 정도의 절편으로 만든다면 약 100만 종류의 많은 절편으로 된다. 그중에서 목적하는 특정의 유전자는 보통 1개밖에 존재하지 않으며 그것을 분리하는 것은 종래의 물리화학적 방법으로는 불가능하다. 대장균의 유전자조차도 수천 종류이므로 그것을 분리하지 않고 직접 연구한다는 것은 아주 곤란하다. 따라서 유전공학 이전의 단계에서 유전자 구조에 관한 연구는 genome size가 수 kb의plasmid vector에 연결하여 그 혼합물을 대장균에 도입해 형질전환을 시킨 뒤 그것을 적당하게 희석하여 평판배지 위에 clone을 만 들 수 있다. 형질전환의 결과 일반적으로 1세포에 1종의 plasmid만 받아들여져 유전한다. 그러므로 대장균의 clone을 분리하는 것으로서 다양한 조합들의 plasmid를 순수하게 분리할 수 있게 된다.
즉 대장균의 군락을 선별하는 일로서 도입된 DNA절편의 clone을 선별하는 셈이다. 여기에 유전공학이 가져다 준 cloning의 의미가 있다. 대장균의 형질전환세포 중에는 숙주 본래의 염색체 DNA와 plasmid가 공존해 있으나 양자는 구조의 차이에 의하여 원심분리에 의해 간단히 구별될 수 있다. 미와 같은 유전자 절편의 cloning에 의해 염기서열의 직접적인 결정이 가능하게 되어 유전자의 기초적인 연구가 급속히 진행되었다.

참고자료

· 없음