[생명과학전공실험] Comet assay 레포트 A+

소개

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목차

1. Title
2. Date
3. Name
4. Purpos
5. Materials
6. Method
7. Results
8. Discussion
9. Reference

본문내용

1. Title : Comet Assay

4. Purpose : Human 피부 세포에 UV(자외선)를 조사하여 유발된 DNA 손상 정도를 알칼라인 코멧 에세이(Alkaline Comet Assay)를 통해 분석하여 UV의 독성을 확인한다.

5. Materials : Cell, pipette, incubation, SYBR Gold

6. Method
[1] Buffer 준비
Mincing Buffer (사용 전 DMSO 10%) HBSS 400ml EDTA_2Na 20mM
Lysis buffer (사용 전 DMSO 10% + Triton-X 1% 첨가) (adjust pH 10) DW 400ml NaCl
81.23g EDTA_2Na 20.68g Tris Base 0.67g NaOH 4g
Alkaline buffer (pH>10) DW 700ml NaOH 8.4g EDTA (200mM) 3.5ml
D Neutralization buffer (adjust pH 7.5) DW 400ml Tris base 24.23g
[2] Comet assay slide 제작
(1) Tissue mincing with Mincing Buffer 1ml (+DMSO 10%) in dish
(2) Incubating 10min in 15ml tube, ice
(3) Mix 20ul of (2) + 180ul of 37-40°C LMP agarose gel in ep tube
(4) Immobilize cells on comet slide (90ul in each circle)

참고자료

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