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세포의 DNA 정제 mini-preparation 예비 및 결과레포트

"세포의 DNA 정제 mini-preparation 예비 및 결과레포트"에 대한 내용입니다.
7 페이지
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최초등록일 2026.02.09 최종저작일 2023.04
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세포의 DNA 정제 mini-preparation 예비 및 결과레포트
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    • 📊 실제 실험 결과와 토의를 포함하여 이론과 실무를 연결하는 학습 자료로 활용 가능

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    소개

    "세포의 DNA 정제 mini-preparation 예비 및 결과레포트"에 대한 내용입니다.

    목차

    1. 실험제목
    2. 실험날짜
    3. 실험목적
    4. 이론
    5. 실험기구 및 시약
    6. 실험방법
    7. 참고사항
    8. 실험결과
    9. 토의

    본문내용

    1. 실험제목 : 세포의 DNA 정제 (mini-preparation)

    2. 실험날짜 : 2023. 04. 28

    3. 실험목적 : 배양액에서 박테리아 세포를 얻고 세포를 용해시켜 DNA를 방출한 다음 칼럼 크로마토그래피, 침전, 원심분리와 같은 기술을 사용하여 세균의 DNA를 정제 해본다.

    4. 이론

    Mini-preparation은 Plasmid DNA를 위한 DNA 추출과 정화의 방법이다. 목적은 박테리아 로부터 Plasmid DNA를 정화시키는 것이고 이러한 방법에는 반드시 세균 배양 성장, 세균의 채취 및 투석, 플라스미드 DNA 정화 세 가지 단계가 포함된다.
    Alkali lysis method는 박테리아로부터 plasmid DNA를 분리하는데 사용되는 방법이다. 기본 적인 원리는 세균의 cell wall과 cell membrane을 부수고 DNA만을 분리해내는 것이다. 중 요한 것은 세균이 원래 가지고 있는 chromosomal DNA와 plasmid DNA를 구분하여 분리 하는 것인데, 이 둘은 모두 DNA여서 성질이 비슷하기 때문에 분리하기가 쉽지는 않다. 하지 만 Chromosomal DNA는 분리과정에서 linear 형태가 되고 크기가 상당히 크기 때문에, 이 러한 차이를 이용하면 분리할 수 있다.
    Resuspension buffer는 세포를 풀어주는 역할을 한다. 50 mM glucose, 25 mM Tris-Cl, pH 8.0, 10 mM EDTA로 구성되어 있는데 EDTA는 세포벽의 integrity를 유지하는데 필수적 인 calcium ion을 제거하여 세포벽이 군데군데 무너지게 한다. 이때 glucose는 삼투압을 유 지시켜 세포의 외형을 유지시켜 준다. 이때 세포가 완전히 깨지게 되면 chromosomal DNA 가 잘게 깨지게 되어 plasmid DNA와 구분할 수 없게 되기 때문에 세포를 유지시켜주며 세 포벽만 깬다.

    참고자료

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