Gram 염색법

소개

연세대학교에서 미생물학을 전공하는 학생입니다.
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목차

1) Gram 양성 세균
① 크리스탈 바이올렛 염색
② 착색 단계(매염)
③ 탈색
④ 대조 염색
- 그람 양성균과 음성균의 염색차이 요인
a. 실험 방법상 오류
b. 세포의 상태
c. 세균 자체의 특성
** 실험 방법 **
1,2,3,4,5,6,7,8,9
* 유침관찰
** 염색 시약 제조 *
염색의 예

본문내용

Gram 염색법

미생물 염색에 가장 많이 사용되는 감별염색으로 1884년 Denmark의 christain Gram이 개발한 방법이다. 원리는 gentianviolete crystal violet의 pararosanilin 색소 속의 염색물질은 옥도액 (iodo solution)으로 처리하면 Gram 양성균은 이의 균체내의 pararosanilin에 친화력이 강한 물질이 있으므로 강력히 끌어당기며 iodo에 의하여 정착되어 Iodo pararosanilin의 진한 청색을 나타내고, alcohol에 의하여 탈색이 되지 않는 균을 Gram 양성균이라 하고, alcohol에 의하여 탈색되어 후염색에 염색되는 것을 차단하므로 crystal violet 색소의 탈색이 억제되므로 세포벽은 violet 색으로 남게 된다. Gram 염색법에는 Hucher의 변법, Kopelloff-Beermans 변법 기타 변법이 있으나 Hucher의 변법이 많이 쓰인다.

1) Gram 양성 세균
탈색제에 탈색이 안 된 것으로 흑자색으로 염색된다.
ex> C. diphtheriae 결핵균, 포도상구균, 연쇄상구균, 고초균, 탄저균, 유산 균, 장구균 등

크기와 형태를 유지하게 하며 또한 삼투압에 의한 세포 파열을 방지하는 역할을 한다.

세포벽에는 peptidoglycan이라고 하는 물질이 있기 때문에 아주 단단하다. 그람 양성균의 세포벽은 여러 층의 펩티도글리칸층이 두껍게 감싸고 있는데 세포벽의 약 80~90%가 펩티도클리칸이다. 반면, 그람음성균의 세포벽은 펩티도글리칸층이 한 겹으로 매우 얇으며, 이층 외부에는 인지질, 리포폴리사카라이드, 리포프로테인 등으로 구성

② 착색 단계(매염)
1단계에서 염색된 세균에 요오드 용액을 처리하면 크리스탈 바이올렛과 요오드가 반응

참고자료

· 없음