[세포생물학및실험] Determination of cell viability (A+)

목차

1. 서론 (Introduction)
2. 재료 및 방법 (Materials&Methods)
3. 결과 (Result)
4. 고찰 (Discussion)
5. 참고문헌 (Reference)

본문내용

이번 실험의 목적은 WST-1 기반의 세포 생존율 분석을 통해 미지의 시약(Chemical A)이 HEK293FT 세포에 미치는 독성을 평가하는 데 있다. 이를 통해 시약의 농도에 따른 세포 생존율의 변화를 관찰하고, 세포 독성 평가에 활용되는 WST-1 assay의 원리를 이해하며, 궁극적으로 IC50을 추론하는 것이 목표이다.

Cell viability는 세포 집단 내에서 살아있는 건강한 세포의 비율을 측정하는 것으로, 특정 chemical을 세포에 처리하였을 때 해당 물질이 세포에 얼마나 독성을 나타내는지를 확인하는 데 사용된다. Cell viability를 측정하는 방법은 다양하며, 세포 증식(cell proliferation) 또는 세포 독성(cell toxicity)을 평가하는 데 활용된다. 대표적인 방법으로는 MTT, MTS, XTT, WST-1 assay, ATP luciferase assay, ROS(reactive oxygen species) assay 등이 있다. 본 실험에서는 WST-1 기반의 assay를 사용하였다.
MTT assay는 tetrazolium salt를 이용하여 세포 내 mitochondria의 대사 활성을 확인하는 방법이다. Tetrazolium salt는 3개의 aromatic ring 구조를 가진 heterocyclic compound를 통칭하며, 노란색의 MTT tetrazolium을 세포에 처리하면 살아있는 세포 내 mitochondria의 dehydrogenase에 의해 ring 구조가 끊어지면서 청자색의 formazan 결정으로 환원된다. 이 formazan 결정을 DMSO(dimethyl sulfoxide)와 같은 유기용매에 용해시킨 후 발색 정도를 확인하는 방식이 MTT assay이다.
WST assay는 tetrazolium salt의 구조를 변형한 WST(water soluble tetrazolium)를 이용하여 세포의 대사 활성을 측정하는 방법이다.

참고자료

· https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0167701217301549 Alonso B, ‘Comparison of the XTT and resazurin assays for quantification of the metabolic activity of Staphylococcus aureus biofilm’, Vloume 139, August 2017, Pages 135-137
· https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0887233319301183 Joo KM, ‘Development and validation of UPLC method for WST-1 cell viability assay and its application to MCTT HCE™ eye irritation test for colorful substances’, Toxicology in Vitro, Volume 60, October 2019, Pages 412-419
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· https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0039914025006836 Goossens J, ‘Microplate-based impedance and thermal sensing system for concurrent cell viability and counting analysis’, Talanta, Volume 295, 1 December 2025, 128193
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