[세포생물학및실험] E.coli culture (A+)

목차

1. 서론 (Introduction)
2. 재료 및 방법 (Materials&Methods)
3. 결과 (Result)
4. 고찰 (Discussion)
5. 참고문헌 (Reference)

본문내용

이번 실험은 대장균(E.coli)를 배양(culture)하는 방법과 한천배지(agar)를 이용한 배양접시(culture plate) 제작법을 익히고, 계대배양 및 미생물 배양 실험을 직접 실습해보는 것이 목적이다.

무균기법이란 멸균 상태의 배지 및 기구를 조작하는 과정에서 미생물의 오염이 일어나지 않도록 하는 기술을 의미한다. 멸균은 바이러스를 포함한 모든 생물체를 완전히 제거하는 과정으로, 단순히 일부 미생물을 죽이는 살균과는 구별된다. 멸균 방법에는 열 멸균, 방사선 멸균, 여과 멸균, 화학적 멸균이 있으며, 이 중 고압멸균기는 대부분의 배양배지를 멸균하는 데 사용된다. 고압멸균은 100 kPa(30 psi)의 높은 압력에서 121℃로 10~15분간 증기열을 가하여 이루어진다.
무균기법을 실현하기 위해서는 무균 작업대가 필요하며, 무균 상태를 유지하기 위해 사용 전·후, 또는 외부에서 내부로 들어가는 모든 과정에서 반드시 70% EtOAH로 소독을 실시해야 한다. 또한 작업이 끝난 후에는 UV 멸균을 통해 오염 가능성을 줄이는 것이 바람직하다.
미생물 배양(microbe culture)은 다양한 목적을 위해 여러 종류의 미생물을 배양하는 것을 의미한다. 미생물은 단세포 미생물 및 바이러스로 구성되며, 크게 원핵 미생물(진정세균, 고세균), 진핵 미생물(조류, 진균류, 원생동물), 바이러스로 구분된다.
대장균은 사람 및 동물의 대장에 서식하는 세균 중 하나로, 다양한 아종이 존재하며 실험에는 DH5α, BL21, JM103 등 약 130여 종이 사용되고 있다. 대장균은 대표적인 간균이며, 그람음성균으로 펩티도글리칸층이 얇아 그람염색 시 대조염색에 의해 분홍색으로 관찰된다. 주로 plasmid, 단백질, 실험자가 원하는 DNA나 RNA를 얻기 위해 배양되며, 고체배지와 액체배지 모두에서 잘 자란다. 극한 환경이 아닌 이상 대부분의 환경에서 잘 증식하며, 약 20분마다 분열할 수 있어 실험에 매우 유용하다.

참고자료

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