생화학 실험 보고서 - PCR

소개

생화학 실험 보고서 입니다.

PCR(polymerase chain reaction)
cDNA 합성, Reverse transcription PCR 후 agarose gel로 DNA sample loading 하였음.

목차

1. 실험목적
2. 이론
3. 실험 시약 및 기구
4. 실험 방법
5. 실험 결과
6. 고찰
7. 참고 문헌

본문내용

1. 실험목적
PCR에 대해 알아보고, cDNA 합성과 Reverse transcription PCR을 이해하고, agarose gel을 이용하여 DNA sample을 loading 해본다.

2. 이론
PCR(polymerase chain reaction)은 중합효소 연쇄반응으로, 열을 가하여 DNA의 특정 부분을 증폭시키는 기술이다. reverse transcription PCR은 mRNA에 대해 PCR을 적용하기 위한 방법이다.
mRNA를 역전사시켜서 cDNA를 합성하고 primer와 DNA polymerase를 이용해서 DNA의 일부분을 복제, 증폭시킨다. 이때 mRNA는 단백질을 합성하기 위한 정보를 DNA로 부터 리보솜에 전달하는 것이고, cDNA는 mRNA에 상보적 배열을 가진 상보적 DNA(RNA로 부터 합성된 DNA)이다. 또한 primer는 DNA합성을 위한 출발점 역할을 하는 RNA 혹은 DNA의 짧은 가닥이고, DNA polymerase는 DNA 사슬에 뉴클레오타이드를 연결하면서 새로운 DNA를 합성하는 효소이다. 역전사 PCR에서 DNA polymerase는 열에 안정한 Taq polymerase를 사용한다. Taq polymerase는 온천에 사는 박테리아로부터 분리됐으며 90도 이상의 높은 온도에서도 안정하게 DNA를 중합할 수 있는 효소이다. 이것의 활성의 최적온도는 70~80도이고 72도에서 1초당 100뉴클레오타이드 이상을 합성할 수 있다.

참고자료

· 생화학백과사전, primer
· 생화학백과사전, DNA polymerase
· 분자세포생물학백과사전, Taq polymerase
· 화학백과사전, dNTP
· 두산백과사전, agarose gel