[A+ 리포트] Subculture (세포생물학실험)

소개

본 리포트는 세포생물학실험 중 subculture에 관한 전반적인 실험 프로토콜에 관한 리포트입니다.
참고 바랍니다.

목차

1. Meterial Preparation & Checking cells under the microscope
2. Media suction
3. PBS Washing
4. Adding Trypsin-EDTA (Trypsinization)
5. Collecting detached cells
6. Centrifuge
7. Supernatant Suction (Media suction)
8. Resuspension
9. Seeding

본문내용

* 본격적인 실험 시작에 앞서 clean bench 내부를 소독하고 후드와 형광등을 작동시킨다.
-실험 재료 및 기구 : culture medium(이상 DMEM), 50ml conical tube, water bath, microscope, 70% ethanol, 실험용 티슈, rack, clean bench, HeLa cell이 seeding되어 있는 cell culture dish.
1)37℃로 설정된 water bath에서 실험에 사용될 culture medium이 담긴 50ml conical tube를 37℃의 온도로 유지시킴.
※참고사항 : 세포 배양 시 냉장 보관되어 있던 culture medium을 그대로 사용하게 되면 cell에 stress가 가해질 수 있기 때문에 세포 배양 온도와 동일한 37℃로 일치시킴.
2)과정1)의 50ml conical tube를 70% ethanol로 소독하고 clean bench 내부의 rack에 위치시킴.
3)HeLa cell이 seeding되어 있는 cell culture dish를 microscope의 재물대 위에 올려놓고 배양 상태를 확인함.
※참고사항 : cell을 관찰했을 때 화면 상에서 보여지는 cell confluency(가득 찬 정도)가 70~80%인지 확인함.

참고자료

· 없음