미생물의 형광 염색 및 형광 현미경을 이용한 총세균수 측정

소개

"미생물의 형광 염색 및 형광 현미경을 이용한 총세균수 측정"에 대한 내용입니다.

목차

1. Title

2. Date

3. Object

4. Introduction
4-1. 형광현미경과 형광 염색
4-2. 미생물 계수법(Counting method)

5. Materials & Methods
5-1. Materials
5-2. Methods

6. Results
6-1. Results figure
6-2. 세균 수 측정 문제 해결

7. Discussion
7-1. AO를 이용한 형광현미경 사진을 통한 시료 내 상태
7-2. 동일한 시료를 사용한 두 조의 결과 차이 원인

본문내용

- 형광 염색
관찰하고자 하는 세포를 형광물질을 이용하여 관찰하는 방법이다. 형광 물질을 직접 세포에 염색시키거나, 형광표기가 부착된 항체 또는 vector를 이용하는 종류가 있다.
주로 사용하는 형광 시료로는 Acridine Orange(AO)와 4',6-diamidino-2-phenylindole(DAPI)가 있다.
Acridine Orange는 세포의 DNA와 RNA에 결합하는 방법을 통해 세포를 염색하는 시료이다. DNA와 결합하였을 경우, 녹색 형광을, RNA와 결합하였을 경우 적색 형광을 방출하는 것이 특징이다.
DAPI는 DNA의 adenine-thymine 부위에 강하게 결합이 가능하며, 초자외선(358nm)에 노출되었을 때 파란빛(최대 461nm)을 방출하는 것이 특징이다. RNA와도 전기적으로 결합이 가능하나, DNA보다는 그 힘이 약하며, 초자외선에 노출되었을 때 녹색(500nm)의 빛을 방출한다.

참고자료

· 미생물 검출, 동정 또는 계수 방법 및 이를 이용한 시스템. 10-2015-0061723. 2015. 04. 30
· LIVE/DEAD Cell Viability Assays
· Brock의 핵심 미생물학 14th