서강대학교 일반생물학실험1 GFP단백질, 단백질 정량

소개

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목차

1. Abstract
2. Introduction
3. Materials and Methods
4. Results
5. Discussion
6. References

본문내용

Abstract
이번 실험은 Lowry assay와 Extinction coefficient assay 방법을 통하여 용액에 있는 단백질 량을 측정하는 실험이었다. 각각의 방법을 통해서 만든 시료를 cuvette에 담아 단백질의 양을 흡광도(optical density, O.D) spectrophotometer로 측정하여 기록하였다. Lowry assay 에서는DIW에 BSA를 이용했다. 그 결과 BSA는 750nm에서 최적흡광도를 가졌다. Extinction coefficient assay 에서는 PBS에 EGFP를 이용하여 실험을 진행하였다. 그 결과 EGFP는 488nm에서 최적흡광도를 가지는 특성을 보였다. 이 측정 값에 따라 단백질 정량을 진행하고 그래프를 그려 그 추이를 파악해보았다.

Introduction
이 실험은 다양한 단백질 정량 방법 중 두 가지인 Lowry assay와 Extinction assay를 통하여 단백질 정량을 실험하고, 그 결과값을 토대로 원리와 결과를 파악해보는 실험이다.
먼저 단백질은 아미노산의 펩타이드 결합 중합체(polymerase of amino acid’s peptide bond)로 생물에 있어서 생화학, 구조적인 기능을 맡고, 막단백질, 효소가 그 대표적인 예이다. 단백질의 구조에 따라 아미노산의 서열이 다르고, 3차원적인 형태가 다르다. 단백질은 아미노산이라는 단량체의 사슬인데, 각 아미노산은 4개의 다른 원자 혹은 원자들이 결합된 탄소를 가진다. 각 아미노산들은 많은 종류가 있는데, 생물은 20가지의 아미노산만을 사용한다. 단백질 구조는 1~4차로 구분할 수 있다. 이 중 아미노산은 단백질의 1차 구조에 해당한다. 1차 구조(Primary structure)는 펩타이드 사슬의 아미노산 서열이다. 2차 구조(Secondary structure)는 폴리펩타이드의 일부에서 수소 결합에서 발생하는 정해진 형태의 하부 구조이다. 3차구조(tertiary structure)는 R 그룹과 물 사이의 상호작용에서 생기는 폴리펩타이드의 전반적인 형태이다.

참고자료

· Protein - Marielle Hoefnagels(2012), Biology : concepts and investigations, McGraw- Hill companies, Inc., p36.
· Protein - Campbell 외 5명(2016), Biology, 11th edit, Pearson, pp125~127
· Spectrophotometer and it’s theorem – Campbell 외 5명(2016), Biology, 11th edit, Pearson, p193