화공생물공학실험 람다DNA

소개

"화공생물공학실험 람다DNA"에 대한 내용입니다.

목차

1. Abstract
2. Introduction
3. Materials & Methods
4. Results
5. Discussion
6. Conclusion
7. Reference

본문내용

1. Abstract
이번 실험의 목표는 Lambda DNA를 임의의 제한효소로 절단하고, 이를 전기영동 통해 사용된 제한효소의 기작 및 DNA의 대략적인 구조를 분석하는 것이다.
제한효소는 박테리아가 자기방어를 위하여 외부로부터 들어오는 침입자의 DNA를 절단함으로써 바이러스 활동을 제한하는 역할을 한다. 이러한 제한효소를 이용하여 DNA와 반응시키면 각각의 제한효소가 특정한 염기서열을 인식하여 DNA를 절단함으로써 각 절편의 크기를 알 수 있다.
전기영동으로 DNA의 양쪽에서 전하를 걸어 –극을 띄는 DNA와 같은 물질은 agarose, acrylamide등과 같은 물질로 이루어진 gel내부에서 같은 전하를 띄는 -극에서부터 +극으로 그 성질에 따라 다양하게 이동하게 되는데 절단된 DNA는 질량에 따라 띠를 형성한다. lamda DNA, lamda DNA에 ecoR1, hindlll 제한효소를 각각 첨가, 두 개를 같이 첨가하는 총 4개의 시료를 만들어 전기영동을 통하여 결과를 얻는다. 실험을 통해 얻은 전기영동 결과를 보고 제한효소를 사용하였을 때 DNA 절단이 일어난 것을 확인 할 수 있긴 하지만 사용한 제한효소의 염기서열대로 절단되었는지는 정확히 알 수 없다. ape program을 사용해 결과값과 비교하여 제한효소의 염기서열대로 잘 절단되었는지 확인한다.
모든 결과값을 비교하였을 때 이론적인 결과와 차이가 남을 알 수 있다. 이는 절단이 제대로 이루어지지 않았거나 전기영동이 제대로 안되었음을 의미한다.
제한효소 또는 전기영동에 있어 방해가 되는 원인에는 star 활성, 효소단백질인 제한효소나 다른 불순단백질이 DNA에 결합할 경우 DNA가 gel속으로 잘 들어가지않고, 염색도 잘 되지 않았거나 온도가 조절이 잘되지 않아 효소가 작용이 잘 안되었을 수 있다고 예상한다.

2. Introduction
1) 실험 목표
Lambda DNA를 임의의 제한효소로 절단하고, 이를 전기영동 통해 사용된 제한효소의 기작 및 DNA의 대략적인 구조를 분석한다.

참고자료

· bioinformatic/lamda DNA sequence
· 한양대학교 출판부, 이영식 등 ,“일반생물학실험”
· 화공생물공학과 교수진, “화공생물공학기초실험”, 동국대학교 화공생물공학과, 2020, pp.5-8
· bioneer/lamda DNA restriction enzyme