DNA Plasmid 분리 및 정량 레포트

목차

1. Introduction
2. Result
3. Discussion
4. Reference

본문내용

-각각의 buffer를 넣는 이유
1) S1 buffer: EDTA, Glucose, Tris로구성되어 있다.EDTA는 E coli에서 plasmid를 분해하는 DNase를 활성화시키지 않는 용도로 쓰인다. DNase는 Mg 이온이 있으면 작동하는데, 이때 Mg 이온을 EDTA가 붙잡으면 작용을 못해서 plasmid가 손상을 입지 않는다. 또한E coli의 세포벽을 안정화시키는 Ca 이온을 붙잡아서 세포벽을 불안정하게 만들어 세포벽이 깨지게 한다. Glucose는 대장균을 suspension하기 위해 vortex 할 때 세균이 터지는걸 막아주는 물리적 buffer이다.삼투압을 유지시켜 세포의 외형을 유지한다.Tris는 pH를 유지시키는 pH buffer이다.

2) S2 buffer: SDS, NaOH로 구성되어 있다. SDS는 세포막의 인지질 이중막을 녹이고 세포막 단백질도 녹여내서 세균을 lysis시킨다. NaOH는 세포막 단백질을 변성시켜서 막을 lysis 시키고 gDNA를 변성시키는 작용을 한다.

참고자료

· http://compbio.korea.ac.kr/wiki/index.php/Prep_kit_%EC%9B%90%EB%A6%AC
· http://www.ibric.org/myboard/read.php?Board=exp_qna&id=487698
· http://www.ibric.org/myboard/read.php?Board=exp_qna&id=460058&ksr=1&FindText=eb buffer
· https://blog.naver.com/hafs_snu/221108898928
· http://www.ibric.org/myboard/read.php?Board=exp_qna&id=518157&ksr=1&FindText=230/260
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· https://blog.naver.com/selee320/220707302692