GAL4-UAS

목차

1. 목적
2. 원리
3. 기구 및 시약
4. 방법
5. 실험데이터 와 결과
6. 고찰

본문내용

유전자 조작이 상대적으로 쉬운 초파리의 유전자를 인위적으로 조작하는 법을 익힌다.살아 있는 개체의 유전자를 특정한 패턴으로 발현되도록 유도할 수 있다면 특정한 유전자의 생체 내 기능을 연구하는데 유용할 것이다. 또한 특정세포에 형광단백질의 발현을 유도하고 관찰하는 과정에서 형광현미경 및 콘포칼현미경의 원리와 사용법을 익힌다.

<중 략>

GAL4-UAS system이란 초파리등의 유전자 발현과 그 기능을 연구하기 위해 만들어진 방법으로써, 유전자 발현 연구에 있어 매우 유용한 기술이기 때문에 초파리 연구에 혁신을 가져왔다고 할수 있다. GAL4-UAS system은 크게 2가지 중요 부위로 이루어져 있는데,그 하나는 효모의 전사인자를 암호화하는 GAL4유전자 이며, 다른 하나는 UAS(upstreamactivation sequence)라는 프로모터지역의 짧은 서열로서 GAL4가 선택적으로 결합하여 발현시키는 장소이다.GAL4는 DNA-binding domain과 activation domain을 갖는 단백질이며, GAL4가 결합하는 UAS는 CGG-N11-CCG라는 짧은 서열을 갖는 지역이다.(N=아무서열이나 가능한 지역) 비록 GAL4가 효모에서만 발견될 수 있는 단백질이나, 초파리나 심지어는 인간세포 에서도 전사인자로써 작용될 수 있다는 것이 밝혀졌다. 이는 진화를 거치는 동안 유전자가 발현되는 매커니즘이 바뀌지 않고 보존되었다는 것의 반증이기도 하다.GAL4는 UAS인근의 모든 유전자를 발현시킬 수 있는데, 만약 UAS뒤에 관심 있는 유전자를 연결해 준다면 GAL4를 통해 그 유전자를 발현시킬 수 있을 것이다.특히, visible marker인 GFP등을 연결해 준다면 GAL4가 발현되는 세포의 분포양상을 쉽게 관찰할 수 있을 것이다.이러한 실험을 수행하기 위해선, 먼저 gal4 driver초파리와 UAS초파리를 교배시켜야 한다.gal4 driver초파리의 경우 GAL4는 있으나 타겟이 없고, UAS초파리의 경우 타켓은 있으나 activator가 없기 때문에 activator와 타겟을 모두 갖는 자손을 얻어야 할 것이다.

참고자료

· http://blog.naver.com/lupin21kr/50071233830
· http://blog.daum.net/jhr2580/570
· http://www.docdocdoc.co.kr/news/newsview.php?newscd=2014101700003