초파리의 패턴형성

소개

초파리가 형성하는 패턴을 염색해서 관찰한 보고서

목차

1. Introduction

2. Materials and Methods
(1) Larva와 pupa의 관찰
(2) 배아(embryo)의 관찰
(3) 패턴형성 유전자의 발현 관찰

3. Results
(1) Larva와 pupa의 관찰
(2) 배아(embryo)의 관찰
(3) 패턴형성 유전자의 발현 관찰

4. Discussion

5. Literatures Cited or References

본문내용

1. Introduction

이번 실험에서는 초파리의 발생 과정에 대해 알아보고, 초파리의 embryo와 pupa를 현미경으로 관찰한다. 그리고 체절극성유전자의 wingless(wg) 유전자와 호메오틱 유전자의 ultrabithorax(Ubx)유전자를 X-gal로 염색하여 줄무늬가 나타나는 양상을 비교해 보는 데 목적이 있다.
20세기 초반에 이루어진 모건(Thomas Hunt Morgan) 실험실의 노력 덕분에 오늘날 우리는 다른 어떤 동물보다도 초파리의 유전적 특징에 대해 많이 알게 되었다. 초파리는 번식이 쉽고 알을 많이 낳으며 어떠한 조건에서든 잘 적응한다. 또한 유충의 다사염색체로 인하여 유전자의 분석이 용이하며, 번식 기술의 습득과 돌연변이의 확인이 매우 쉽다.

< 중략 >

4. Discussion
이번 실험은 초파리의 embryo와 pupa를 현미경으로 관찰하고 wingless(wg) 유전자와 호메오틱 유전자의 ultrabithorax(Ubx)유전자를 염색하여 나타난 줄무늬를 비교해보는 실험이었다.
먼저 pupa와 larva 관찰에서는 슬라이드 글라스 위에 10X PBS 10uM를 떨어뜨린 뒤, 그 위에 각 개체를 올려두고 현미경으로 보았다. Larva의 경우, 제대로 고정이 되지 않고 끊임없이 슬라이드 글라스 위를 옮겨 다니다가 결국 슬라이드 글라스 밖으로 벗어나버려서 관찰하는데 어려움이 있었다. 결국 100% ethanol을 가해 운동성을 멈추게 하려고 했으나 실패하였다. 확실한 고정을 위해 물질 대사 등을 막는 다른 시약을 사용하는 것이 적합할 것이다.
다음으로 배아(embryo)의 관찰과 패턴형성 유전자의 발현 관찰에서는 먼저 알 수집기에 알을 모은다. 난각막을 제거할 때, 50% 락스를 사용한다. 5분이 지나면 흐르는 물에 세척하여 락스를 제거하고 2ml의 NTX 용액을 넣는다. 이 때 NTX는 난각막이 제거되어 hydrophobic 상태인 알 표면이 계면활성제인 Triton X-100 성분에 의해 hydrophilic한 상태가 되게 한다.

참고자료

· Gilbert, S. F. 2011. 발생생물학. 9th Ed., 라이프사이언스. pp. 111-114, pp. 131-141.
· Lee, H. J. 2009. 도해 발생생물학. 1st Ed., 정문각. pp. 53-67.
· Lee, S. H. and Y. P. Chun. 2011. 발생학 실험서. 1st Ed., 바이오사이언스. pp. 38-42.