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DNA 메인레포트

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PCR 증폭을 통하여 얻은 DNA를 agarose gel 전기영동으로 분석한 결과이다. 우리 조의 결과는 표시한 곳으로 어느 정도 선이 나오긴 했는데 화질이 좋지않아 매우 희미하게 나왔다. 가운데에 보이는 것이 DNA ladder 로 우리 조 것과 비교하면 매우 현저한 차이가 나고 있는 것을 알 수 있다. 원래는 두번째 그림처럼 나와야 제대로 실험했다고 할 수 있는데 우리와 같이 했던 조들 모두 아예 안나오거나 우리와 비슷하게 분석이 되었다. gldA는 이번 실험에서 0.8%의 젤 농도를 사용했기 때문에 range of separation of linear DNA molecules (kb)가 0.7~9 Kb 정도로 예측할 수 있다.

DNA ladder와 비교할 primer 로 mgs 와 gldA를 사용하였는데 이 둘은 DNA 복제에 필요한 RNA 가닥이다. 첫 번째 실험 날에는 실험과정 3까지는 준비가 되어 있었고 4부터 시작하였다. 이는 세포벽을 파괴하여 DNA만을 추출하는 과정으로 원심분리기를 사용하여 물질을 걸러내고 DNA만을 남겨내는 것을 하였다. AL buffer, AW 1buffer, AW2 buffer, AE buffer와 원심분리를 이용하여 mgsA, gldA 2개의 DNA를 정제했다. 이 때 넣어주는 ATL buffer, proteinase K, AL buffer는 모두 단백질의 결합을 끊어주기 위함이다. 여기서 70도에서 배양을 해야 하는데 그 이유는 heat shock으로 세표벽을 끊어주기 위한 것이다. 또한 3차 증류수를 넣은 이유는 오염을 방지하기 위해서이고 에탄올을 넣었는데 응집이 잘 일어나도록 하기 위해서다.

참고자료

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