Ligation

소개

Ligation을 설명하는 프레젠테이션.
Ligation을 중심으로 ligase, vector, T-vector 등과 같이 ligation에 주요하게 작용하는 factor를 소개.
슬라이드 외, 슬라이드 노트를 적극 활용함으로써 슬라이드는 최대한 깔끔하게 보이는 반면,
발표자는 최대한 풍부한 설명을 할 수 있음.

목차

1. Ligation

2. Ligase의 종류 및 이용

3. Vector의 정의, 종류 및 기능

4. T-vector의 이용

5. Ligation의 영향인자

6. Ligation 시의 유의점

7. 출처 & 질문

본문내용

Ligation
DNA나 RNA의 끝을 이어주는 과정
Ligase : 반응에 이용되는 효소
DNA ligase : DNA를 기질로 사용
유전자 재조합 과정에 주로 사용
RNA ligase : RNA를 기질로 사용
Single strand의 DNA 또는 RNA를 연결
5`- RACE와 같은 특수목적의 실험에서 사용
Insert와 vector 필요

Ligase의 종류 및 이용
Bacteriophage T4 DNA ligase
Virus, Bacteriophage 등에서 발견
5`-phosphate와 3`-hydroxyl termini 사이에 Phosphodiester bond 형성
ATP를 cofactor로 사용
E.coli DNA ligase
Bacteria에서 발견
5`-phosphate와 3`-hydroxyl termini 사이에 Phosphodiester bond 형성
Polyethylene glycol(PEG) 또는 Ficoll의 존재 하에 blunt end의 ligation 가능
T4 DNA ligase 보다 효율성이 떨어져 일부 cDNA ligation에 사용되고 있음
NAD+를 cofactor로 사용

Phosphodiester bond

Vector의 정의, 종류 및 기능
정의
Ligation에 있어 목적 DNA 단편을 숙주균 등에 도입시켜 주는 cloning vehicle
종류
Plasmid, cosmid, phasmid 등
일반적으로 plasmid가 보편적

참고자료

· 대학생을 위한 유전학, 라이프사이언스, 2010.03.01, David Hyde 作, 김세재 외 4명 譯
· 분자생물학, 제4판, 라이프사이언스, 2008.08.30, Robert F. Weaver 作, 김균언 외 23명 譯