[유전학 실험][서울대] 제한효소를 이용해 vector 자르기

소개

[서울대학교]
유전학 실험 레포트로서, 이번 실험은 우리가 지금까지 실험한 vector(plasmid)를 제한효소를 이용해서 자르고 그것을 전기영동을 통해 로딩시켜 제대로 잘렸는지 확인하는 실험이다.

레포트에는 BSA, TAE buffer(Tris, Acetate, EDTA로 된 pH를 안정시키는 완충용액), EtBr 등에 대한 설명을 기입해놨으며, 방법적인 측면도 그림을 통해 설명했다.

목차

1. Introduction and Abstract
2. Materials and Method
Material >
Method >
3. Results and Discussion
4. Reference

본문내용

유전육종학 실험 Report.
- 제한효소를 이용해 vector 자르기
1. Introduction and Abstract
이번 실험은 우리가 지금까지 실험한 vector(plasmid)를 제한효소를 이용해서 자르고 그것을 전기영동을 통해 로딩시켜 제대로 잘렸는지 확인하는 실험이다. 이번실험도 한조에 4명의 조원이 한번씩 참여하여 각자 실험을 시행했을 때 정리한 필기를 모아서 레포트를 썼다. 전체적 실험과정을 아래 설명하겠다
< Enzyme digestion >
30분30분
① enzyme으로 (digestion 완료)
vector자르기30분30분
② 1% Agarose ③ GE(gel electroporesis) ④ 사진찍기
gel만들기
cmv vector의 제한효소가 인지하는 site는 아래와 같다
Spe I 만약 Spe I 제한효소를 처리시, vector가 Spe I
Hind IIIsite를 잘라서 vector는 2조각으로 나뉠 것이다.
(660bp와 5.5kb짜리 gene)
660bp Spe I EcoR I 제한효소를 처리시, vector의 site가
한군데 이므로 잘려서 linear형태로 될 것이다.
6.2 kb vector(6.2kb짜리 gene)
880bp Hind III와 Not I을 자르기 위해서는 2가지
EcoR I제한효소를 첨가해야 하며, 2조각으로
나뉠 것이다.(880bp와 5.3kb짜리 gene)
Not I
2. Materials and Method
Materials >
① CMV : CytoMegaloVirus. 정상인에게는 별 문제가 되지 않으나 에이즈 환자나
신생아에게 심각한 영향을 줄 수 있는 바이러스
② BSA : Bovine serum albumin. vector와 제한효소의 반응을 안정화시킨다
적은양의 단백질 정량이나 제한효소의 활성을 위해 사용된다.
③ TAE buffer : Tris, Acetate, EDTA로 된 pH를 안정시키는 완충용액.

참고자료

· ① Bric 실험 (http://bric.postech.ac.kr)