[동물자원과학실습 반추실][서울대] 반추위 미생물 정성분석, 정량분석

소개

[서울대학교]
반추위내의 미생물을 정성분석, 정량분석한 실험 레포트이다.

이번 실험은 정량분석과 정성분석 2가지로 나눠서 실행했다. 정량분석의 경우, 소와 염소의 반추위액에서 bacteria를 isolation시켜서 얼마나 존재하는지 관찰하는 실험으로, serial dilution시킨 후 plate에 깔아서 배양하고, plate에 생긴 콜로니의 개수를 세는 과정을 통해 bacteria의 수를 분석하는 것이다. 정성분석의 경우, 반추위액과 락토바실러스 균을 가지고 실험을 진행했으며, 그람염색법을 통해 이 2가지 sample을 염색시켜 각각 Gram positive인지 negative인지를 관찰하는 것이다.

실험내용과 더불어 RGCA media의 역할, Gram (+), (-) bacteria에 대해서도 조사했다.

목차

1. Introduction
2. Material & Methods
3. Result & Discussion
4. Search
① RGCA media의 역할에 대해
② Gram (+), (-) bacteria에 대해
5. References

본문내용

1. Introduction
이번 실험은 정량분석과 정성분석 2가지로 나눠서 실행했다. 정량분석의 경우, 소와 염소의 반추위액에서 bacteria를 isolation시켜서 얼마나 존재하는지 관찰하는 실험으로, serial dilution시킨 후 plate에 깔아서 배양하고, plate에 생긴 콜로니의 개수를 세는 과정을 통해 bacteria의 수를 분석하는 것이다. 정성분석의 경우, 반추위액과 락토바실러스 균을 가지고 실험을 진행했으며, 그람염색법을 통해 이 2가지 sample을 염색시켜 각각 Gram positive인지 negative인지를 관찰하는 것이다.

2. Material & Methods
1) 정량분석
정량분석 실험의 경우, 우선 반추위액에서 bacteria를 isolation시켜야 한다. rumen bacteria를 분리하는 과정은 매우 힘든데, 이는 반추위의 상태는 혐기성상태인데 비해 밖으로 꺼낼 경우, 외부환경은 호기성 상태이므로 실험을 하는 과정에서 모두 혐기성상태에 맞춰야 하기 때문이다. 이를 위해 우리는 실험실에 있는 anaerobic chamber를 사용했다.
실험에 앞서 소와 염소의 반추위액 sample을 준비하고, 이를 anaerobic chamber안에서 serial dilution시켰다. 이 방법은 원액에서 1mL를 채취하여 배지 9mL이 들어있는 실험관에 넣어서 1/10으로 희석하는 방법으로, 순차적으로 계속 희석시켜 , , 농도까지 만든다. serial dilution을 하는 이유는 위액 1mL안에는 bacteria가 ~cells나 있기 때문에 바로 plate에 깔아서 키울 경우 cell counting이 안되기 때문이다. 박테리아 한 마리 한 마리는 우리가 볼 수 없지만, plate에 혐기상태로 키울 경우, 증식을 통해 colony를 형성한다. colony의 경우 우리가 육안으로 볼 수 있는데, 이 colony하나에 bacteria가 1마리 존재했다고 생각하는 것이다.

참고자료

· ① 하종규 외 3명, 반추동물영양생리학, 서울대 출판부, 2008
· ② Lewis 외 2명, 생명과학 길라잡이, 라이프사이언스, 2005
· ③ David L.Nelson 외 1명, Lehninger Principle of biochemistry, 5th edition, 2008
· ④ Cecie starr 외 2명, 생명과학, 라이프사이언스, 2008
· ⑤ Bric 실험 (http://bric.postech.ac.kr/labinfo)
· ⑥ 그람양성, 음성 세균 이미지
· (http://silverfalls.k12.or.us/staff/read_shari/mysite/chapter_24_AB.htm)
· ⑦ RGCA관련 논문 (garfield.library.upenn.edu/classics1981/A1981LC33200001.pdf)
· ⑧ RGCA관련 논문 (ijs.sgmjournals.org/cgi/reprint/22/2/78.pdf)