FRTL-5 세포에서 과산화수소 유발 아포프토시스에 대한 에스트로겐의 영향

서지정보

· 발행기관 : 대한내분비학회
· 수록지 정보 : Endocrinology and Metabolism / 19권 / 4호 / 320 ~ 331페이지
· 저자명 : 김원배, 김태용, 송자영, 송영기

초록

연구배경: 갑상선종과 암 발생의 기전은 미상하며, 정상 갑상선 세포에서 아포프토시스 과정의 조절과 그 기작에 대해 이해하는 것은 이들 질환의 병태생리 규명에 매우 중요할 것으로 생각된다. 본 연구에서는 갑상선세포에서 아포프토시스 자극으로 작용할 것으로 생각되는 과산화수소(H2O2)를 이용하여 FRTL-5 세포에서의 아포프토시스를 살펴보는 체계를 확립하고자 하였으며 그에 대한 갑상선자극호르몬(TSH) 및 에스트로겐의 효과를 살펴보고자 하였다.방법: FRTL-5 세포를 이용한 아포프토시스 측정 시스템을 최적화하는 과정은 아포프토시스의 가장 전형적인 현상으로 알려진 DNA laddering을 이용하였고, 최적화된 조건에서 아포프토시스의 정량적 분석을 위해서는 좀 더 예민한 방법을 적용하여야 할 필요성이 제기되어 세포질에서 히스톤-결합 DNA fragment를 ELISA 방법으로 측정하였다.결과: 1) FRTL-5 세포에서 과산화수소(H2O2)-유발 아포프토시스는 세포를 6H5 배양액으로 80～90% 차게 키운 후, 5H0 또는 5H1 배양액에 48시간 노출시킨 상태에서 H2O2를 배양액에 0.3mM이 되도록 한 번 가하고 18～24시간 후에 DNA fragmentation 현상을 관찰하였을 때 가장 잘 나타났다.2) TSH(1mU/L)가 포함된 배지(6H0)에서 48시간 유지한 경우는 H2O2로 유발된 FRTL-5 세포의 아포프토시스가 유의하게 감소되었으나(2.27±0.11 vs. 0.98 ±0.21 arbitrary unit, p<0.05), 24시간 동안만 유지한 경우에는 감소되지 않았다.3) TSH가 없는 조건에서(5H0 배양액) FRTL-5 세포의 H2O2-유발 아포프토시스는 1-100uM의 17β-estradiol을 전처치하였을 때 용량-의존적으로 감소하였다. TSH가 없지만 1%의 혈청을 추가한 경우에는(5H1 배양액) 에스트로겐에 의한 H2O2-유발 아포프토시스의 억제효과가 감소되는 경향을 보였다. 생리적인 농도의 에스트로겐(10～100nM)을 FRTL-5 세포에 전처치하였을 때에는 H2O2-유발 아포프토시스의 억제효과가 관찰되지 않았다.

참고자료

· 없음