Diff-Quik 염색방법에 의한 오계 닭 정자의 염색질 이상과 운동성 추정에 관한 연구 (The Study of Estimation of Chromatin Abnormality of Ogye Rooster Spermand Activity by Diff-Quik Staining Method)

서지정보

· 발행기관 : 한국가금학회
· 수록지 정보 : 한국가금학회지 / 42권 / 2호 / 109 ~ 116페이지
· 저자명 : 김성우, 최아름, 최창용, 김동교, 성환후, 김재환, 김종대

초록

본 연구에서는 육종이 필요한 종계장에서 슬라이드 위에 도말된 닭 정액시료를 간편하게 염색하여 정자의 염색질 이상성과 운동성을 유추할 수 있는 기법을 확립하고자 실시하였다. 오계 정자 도말 슬라이드를 Diff-Quik 시약으로 염색하여 관찰하면 신선정액에서는 정자 생존성이 93.53%, 82.42% 및 90.63%일 때, Diff-Quik 염색질의 정상도는 87.96%, 74.25 % 및 85.10%로 관찰되었다. 동일한 시료를 동결하고 융해 후 정액의 생존성은 조사하면 69.58%, 61.98% 및 72.20%로 관찰되었으며, 염색질의 정상도는 58.91%, 48.49% 및 63.34%로 관찰되었다. 융해된 동결정액에서 활력이 우수한 정자를 쉽게 관찰하기 위하여 정자를 HS-1 희석액으로 재 희석하고, 37℃에서 가온하여 도말하면 염색된 정자의 두부에서 활력이 우수한 정자의 비율을 간단히 유추할 수 있음을 보여주었다. 특히, 신선 정자에서 정상 염색질을 가진 정자의 비율과 생존성이 상관관계는 매우 높은 것으로 판단되며, 동결정자에서도 상관관계가 높다고 추정되었다. 이러한 결과는 Diff-Quik 염색방법으로 닭 정액의 품질을 정자의 염색질의 이상성 유무로 판단할 수 있음을 보여주고 있다. 특히 본 연구에서 제시된 방법은 닭 정자의 우수성을 판단하는데 유용할 것으로 판단되며, 닭 정액 시료를 준비할 때 준비한 도말 슬라이드를 현미경적 관찰에 의하여 활성화된 정자의 비율과 정상 염색질을 가진 정자의 비율을 추정하는 방법을 제시하였으며, 이는 인공 수정에 필요한 현장에서 수컷 개체의 종축 이용성을 쉽게 판단할 수 있는 근거를 마련할 수 있음을 의미한다.

영어초록

Ogye rooster sperm chromatin status can be detected using well-established sperm assays. In this paper, a simple and fast method for monitoring rooster sperm chromatin status was employed in the field for the assessment of chicken sperm quality. Using standard bright field microscopes, Diff-Quik stains can be reproducibly, easily and routinely monitored with simple staining. The presence of abnormal chromatin staining of the rooster sperm was determined based on the presence of darker staining in the head. In the fresh semen, the viabilities of the spermatozoa from three tested Ogye were 93.53%, 82.42% and 90.63%, and normal chromatin rates were 87.96%, 74.25% and 85.10%, respectively. However, after freezing, the viability rates of the thawed semen were reduced to 69.58%, 61.98% and 72.20%, and the normal chromatin rates were also reduced to 58.91 %, 48.49% and 63.34%. The significant correlations between the live sperm and the normal sperm nuclei were 0.875 in the fresh semen and 0.513 in the frozen semen. After the incubation of the sperm at 37℃ for 5 min, the rates of viability, chromatin normality and sperm head activity were found to be 90.63±1.28%, 82.44±8.09% and 66.68±10.29%, respectively, in fresh semen. However, the corresponding rates in the thawed semen were reduced to 67.92±7.55%, 56.92±12.15% and 47.32 ±5.02%. The relationship between chromatin normality and sperm head movement in the fresh and thawed semen were 0.564 and 0.540, respectively. These results indicate that chicken sperm normality can be assessed with Diff-Quik staining, which could be used as a simple and rapid staining method for assessing the chromatin status of sperm heads and the activated morphologies of live spermatozoa.

참고자료

· 없음