생명과학실험1 Immunoprecipitation (IP)

소개

생명과학실험1 A+ 받은 보고서이며, 만점을 받은 보고서입니다.

목차

1. Introduction
2. Materials
3. Methods
4. Result
5. Discussion
6. Reference

본문내용

(1) Immunoprecipitation (면역침강법, IP)
면역침강법이란 항원-항체 반응을 이용하여 원하는 단백질을 분리하고자 하는 실험이다.
단백질은 특정한 항체에만 결합하는 항체 특이성을 가지고 있다. 따라서 검출하고자하는 target protein 또한 특정한 종류의 항체와만 결합하게 된다. 항원-항체 복합체가 바닥에 가라앉도록 하기 위해서 먼저 항체와 Bead 를 붙이고, bead 와 결합한 항체가 다시 단백질과 결합하여 단백질-항체-Bead 복합체를 형성하게 된다. 이 복합체가
원심분리를 통해 침강하게 되면서 원하는 단백질을 분리할 수 있는 것이다.
① Antibody (항체)
항체는 항원과 특이적으로 결합하는 물질이다. 항체는 중심에 두 가닥의 heavy chain 과 주변에 각각 한 가닥의 light chain 을 가지고 있다. 전체적으로 항원과 직접적으로 결합하는 부위인 antigen binding site 와 중심 기둥이 되는 Fc domain 으로 나눌 수 있는 형태를 가진다. 생체 내에는 다양한 항체를 가지는데, 이번 Immunoprecipitation 실험 과정에서 사용될 항체는 Ig G 이다.
Ig G 항체는 감염 시에 면역 반응 과정에서 주로 사용되는 항체이며, 면역 반응 초기에 생성되는 항체인 Ig M 이 면역 반응 과정에서 Ig G 로 바뀌어서 생산된다.
② Protein Tagging
Protein Tagging 은 검출하고자 하는 목표 단백질에 인위적으로 합성한 아미노산 배열 집단을 붙이고, 이 아미노산에 결합하는 항체를 loading 하여 목표 단백질을 검출하고자 한다. 이렇게 tagging 된 단백질만을 세포에서 인위적으로 배양시키면 용액 내의 여러 단백질들 중 원하는 단백질만을 얻을 수 있다

참고자료

· Immunoprecipitation 1-2 주차 강의자료
· Immunoprecipitation, https://www.fortislife.com/immunoprecipitation
· Immunoprecipitation ,
· https://ruo.mbl.co.jp/bio/e/support/method/immunoprecipitation.html
· 면역침강법,
· https://terms.naver.com/entry.naver?docId=5929992&cid=61233&categoryId=61233
· 김민주 [외]공저 (2010). 생명과학실험, 부산 : 동아대학교출판부.
· 이선희 [외]지음 (2022). 기초생명과학 실험서, 서울 : 라이프사이언스.