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[화학과 수석의 A+ 레포트][조교피드백 포함] 박테리아의 형질전환 (생화학실험)2025.01.161. 형질전환 이번 실험에서는 플라스미드와 박테리아를 이용해 형질 전환한다. 클로닝이란 관심있는 DNA를 많이 만들어내기 위해 박테리아를 이용하는 것을 말한다. 박테리아에 관심있는 DNA 조각을 집어넣고 키우면 관심있는 DNA도 여러개 만들 수 있게 된다. 플라스미드는 박테리아에 DNA를 넣어주기 위한 운반체 역할을 한다. 형질전환 시키는 방법으로는 화학적처리법과 전기천공법이 있으며, 이번 실험에서는 화학적 처리방법으로 CaCl2를 넣어주는 방법을 사용했다. 2. 플라스미드 플라스미드란 세균의 세포 내에 염색체와 별도로 존재하면서 ...2025.01.16
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인천대학교 나노바이오실험(1) A 자료) 4. Plasmid perp & Gel Electrophoresis2025.01.041. Plasmid DNA 플라스미드 DNA는 세균의 세포 내에 염색체와는 별개로 존재하면서 독자적으로 증식할 수 있는 DNA이다. 유전공학에서는 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소로 끊은 뒤, 필요로 하는 유전자를 삽입하여 이를 다시 세균에 넣어 배양하는 유전자재조합 기술을 사용한다. 2. Plasmid DNA 추출 방법 플라스미드 DNA를 추출하는 방법에는 크기 차이를 이용한 방법과 구조 차이를 이용한 알칼리 용해 방법(Alkaline Lysis method)이 있다. 알칼리 용해 방법은 높은 pH의 알칼리성 용액...2025.01.04
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2022년 1학기 서울대 생물학실험 모듈 3 실험보고서2025.01.231. 형질전환 본 실험에서는 재조합된 플라스미드로 대장균을 형질전환하고, PCR과 전기 영동을 통해 형질전환의 결과를 DNA 수준에서 확인하고자 하였다. 여러 종의 플라스미드를 대장균에 도입해 형질전환을 유도했으며, colony PCR을 통해 도입된 플라스미드를 대량으로 복제한 후 확인했다. 2. PCR PCR은 DNA 중합 효소와 프라이머를 이용해 DNA의 특정 부분을 대량으로, 인공 환경에서 복제하는 기술이다. PCR을 통해 실험에서 활용되는 DNA를 대량으로 복제해 사용할 수 있으므로 PCR 기술은 유전 공학에서 매우 중요하다...2025.01.23
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서울대 생물학실험 DNA Techonology (A+)2025.01.291. DNA 기술의 원리와 분석 방법 본 실험에서는 DNA와 관련된 기술과 분석 방법을 파악하고 대장균에 특정 유전자를 삽입하는 것이 목표이다. 실험을 통해 DNA 클로닝, 형질전환, PCR, 젤 전기영동, 제한효소 처리 등 다양한 DNA 기술을 학습하고 이해할 수 있었다. 2. 대장균을 이용한 DNA 기술 실험 본 실험에서는 대장균 세포에 다양한 플라스미드를 도입하여 형질전환을 유도하고, 이를 통해 DNA 기술의 원리와 분석 방법을 확인하였다. 실험 결과 플라스미드가 성공적으로 도입된 대장균 colony에서는 흰색이 나타났으며, ...2025.01.29
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DNA 연결 및 형질전환, 플라스미드 추출 및 제한효소 절단2025.11.171. T4 DNA Ligase와 DNA 연결(Ligation) T4 DNA ligase는 T4 박테리오파지에서 유래한 효소로, DNA의 3'-OH와 5'-P 사이에 phosphodiester 결합을 형성하여 DNA를 연결한다. Ligation buffer에는 Tris-HCl(pH 7.6), MgCl2, DTT, ATP가 포함되며, 각각 완충작용, cofactor 제공, 환원환경 조성, cofactor 제공의 역할을 한다. Self-ligation 방지를 위해 double-digestion(서로 다른 제한효소 사용) 또는 alkali...2025.11.17
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DNA 클로닝과 유전공학 기술2025.11.121. DNA 클로닝 기술 DNA 클로닝은 특정 유전자를 선택적으로 증폭하는 DNA 복제기술입니다. 제한효소로 DNA를 절단하고, 클로닝 벡터에 연결한 후, 숙주세포에 도입하여 DNA를 증폭시킵니다. 5단계 과정으로 진행되며: ①DNA 절단(제한효소 사용), ②벡터 선택(플라스미드, 바이러스), ③DNA 연결(DNA 리가제), ④숙주세포 이동, ⑤선별 배양입니다. 재조합 DNA 기술 또는 유전공학이라고도 불립니다. 2. 클로닝 벡터와 발현 벡터 클로닝 벡터는 DNA 증식 및 분리에 사용되며, 자가복제, 마커 선택, 제한효소 부위를 갖...2025.11.12
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Colony PCR 실험 결과 및 분석 보고서2025.11.141. Colony PCR 원리 및 방법 Colony PCR은 DNA 추출이나 플라스미드 정제 없이 세균 colony에서 직접 원하는 insert를 포함하는 플라스미드를 선별하는 방법이다. 미생물 colony를 template로 사용하여 비용 절감과 시간 단축의 장점이 있으나, 목적 DNA의 돌연변이를 탐지할 수 없어 거짓 양성 결과 확률이 높다는 단점이 있다. 2. PCR 실험 오차 원인 및 개선 방안 실험 오차는 클린 벤치 미사용으로 인한 오염, 이쑤시개 재사용으로 인한 colony 오염, 피펫팅 과정의 거품 발생으로 인한 DNA...2025.11.14
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Restriction Enzyme Digestion and Gel Electrophoresis 레포트2025.01.211. Plasmid DNA와 Vector Plasmid DNA는 박테리아 세포 내에 염색체와 별도로 존재하면서 독자적으로 복제, 증식할 수 있는 원형 DNA 분자를 말한다. Plasmid Vector는 원하는 특정 유전자를 운반할 수 있고, 한 세대의 박테리아로부터 다음 세대로 전달되기 때문에, DNA 클로닝을 위한 핵심적인 도구이다. Vector에는 restriction enzyme이 작용하는 multicloning site과, 클로닝이 이루어진 후 많은 박테리아 중에서 vector를 가지고 있는 박테리아만 분리할 수 있도록 하는...2025.01.21
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유전학-박테리아의 증식접합, 형질전환, 형질도입2025.01.171. 자가영양성(Prototrophic) Prototrophic 생물은 일반적으로 최소한의 영양소만으로도 생존하고 번식할 수 있는 박테리아이다. 기본적인 탄소원, 질소원, 염류 등의 기본 영양소만으로 모든 필수적인 유기 분자를 합성할 수 있다. 이러한 생물은 대사 경로가 완전하게 작동하여 추가적인 영양소나 보조 인자를 필요로 하지 않는다. 자연 환경에서 잘 생존하며, 실험실 조건에서도 기본적인 배지에서 잘 자란다. 2. 영양요구성 돌연변이(Auxotrophic) Auxotrophic 생물은 특정 필수 영양소를 합성하지 못하는 돌연변...2025.01.17
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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(DNA plasmid transfection, Immunoprecipitation)2025.01.231. DNA plasmid transfection DNA plasmid transfection 실험의 목적은 고분자-유전자 복합체를 이용하여 동물 세포에 plasmid DNA를 넣어 세포의 형질을 전환하는 것이다. 이를 위해 먼저 단백질 A에 대한 염기서열 옆에 epitope tag인 V5 폴리펩타이드에 대한 염기서열을 같이 붙여서 플라스미드 DNA를 세포 내에 넣어준다. 그러면 플라스미드가 핵내에 들어가서 DNA 역할을 할 수 있고, 이후 벡터 DNA가 mRNA로 전사되어 V5가 붙은 단백질 A가 발현된다. 2. Immunopre...2025.01.23
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