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반응능 세포(Competent Cell) 제조 실험2025.11.171. 유전자 재조합 기술 특정 유전자가 클로닝된 재조합 플라스미드 DNA를 세포 내에 도입하여 특정 유전자를 다량 확보하거나 발현시켜 원래의 생명체가 만들지 않는 특정 단백질을 생산하는 기법입니다. 표적 DNA를 공여 세포로부터 분리한 후 제한효소로 절단하고, 벡터 DNA와 연결하여 재조합 DNA를 만든 후 숙주세포에 도입하여 형질전환시키는 과정으로 진행됩니다. 2. 반응능 세포(Competent Cell) 유전자 도입에 사용되는 숙주세포로, 외부의 DNA를 받아들일 수 있도록 인위적으로 만들어진 세포입니다. 대장균이 가장 널리 사...2025.11.17
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Agarose Gel Electrophoresis 결과 분석2025.11.131. Agarose Gel Electrophoresis Agarose gel electrophoresis는 DNA, RNA, 단백질 등의 생물학적 분자를 크기에 따라 분리하는 기본적인 실험 기법입니다. 전기장을 이용하여 음전하를 띤 핵산 분자들을 agarose 젤을 통해 이동시켜 분자의 크기별로 분리합니다. 이 방법은 분자생물학, 유전학, 생화학 연구에서 DNA 단편 분석, PCR 산물 확인, 플라스미드 검증 등 다양한 목적으로 널리 사용됩니다. 2. DNA 분자 분리 Agarose gel electrophoresis를 통해 DNA...2025.11.13
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[A+ 보장!] 연세대 의대 의예과 1학년 General Biology 실험 레포트 Genomic DNA extraction2025.01.141. DNA 클로닝 DNA 클로닝은 제한 효소를 이용하여 특정한 유전자를 절단하는 과정에서 시작한다. 제한 효소는 특정한 염기들의 서열을 인식하고 이를 절단하는 기능을 수행한다. 또한 제한 효소는 종류에 따라 점착 말단과 무딘 말단을 형성한다. 다음으로 표적 유전자를 벡터에 삽입해야 하며, 이 과정에서 DNA 연결 효소가 사용된다. 마지막으로 재조합 플라스미드를 박테리아에 다시 도입한다. 2. 젤 전기영동 젤 전기영동은 동일한 DNA를 찾는 과정에서 유용하게 사용된다. 동일한 DNA를 동일한 제한 효소로 처리한다면 동일한 길이의 D...2025.01.14
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분자생물학실험 Gene cloning_TAE buffer 제작2025.04.271. TAE buffer 제작 TAE buffer 제작(30ml 50X TAE buffer)의 목적, 재료, 방법 등을 자세히 설명하고 있습니다. TAE buffer는 DNA 전기영동에 사용되는 완충액으로, Tris, acetic acid, EDTA 성분으로 구성됩니다. 제작 방법은 각 성분의 양을 계산하여 증류수와 혼합하고 멸균하는 과정으로 이루어집니다. 2. PCR(중합효소 연쇄반응) PCR은 DNA 증폭 기술로, DNA 중합효소를 사용하여 원하는 DNA 염기서열을 대량으로 증폭시킬 수 있습니다. PCR에 필요한 주요 요소는 주...2025.04.27
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효모 유전자 녹아웃(Gene Knockout) 실험 보고서2025.11.141. 유전자 녹아웃(Gene Knockout) 유전자 녹아웃은 특정 유전자의 기능을 분석하기 위해 그 유전자를 무력화하는 기술입니다. 기능적 단백질에 대한 유전정보를 삭제하는 효소를 이용하여 DNA 단편을 절단하며, 주로 상동 재조합에 의해 진행됩니다. 본 실험에서는 효모의 MET2 유전자를 마커 유전자인 URA3로 치환하여 녹아웃을 수행했습니다. 이 과정을 통해 MET2 유전자가 메티오닌 생합성에 관여함을 확인할 수 있었습니다. 2. 상동 재조합(Homologous Recombination) 상동 재조합은 상동인 두 개의 DNA ...2025.11.14
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Plasmid DNA 정제2025.01.131. 대장균(E. coli) 대장균(E.coli)은 Theodor Esherich의 이름을 따서 발견되어 명명된 박테리아이다. 특징으로는 그람음성의 간균이며, 포자 생성을 하지 않으며, 1-2 microns x 30-30 micron (1 micron = 0.001 mm)크기이고, 섭씨 37도에서 쉽게 자랄 수 있다. 2. Plasmid DNA Plasmid DNA란 세균 속에 주 DNA와 별도로 존재하면서 증식할 수 있는 고리 형태의 DNA로, 원핵생물과 효모 등에서 발견된다. 대장균 세포에서 분리된 Plasmid DNA는 sup...2025.01.13
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생화학 실험/실습 보고서 (DNA Gel electrophoresis)2025.01.231. 제한효소 제한효소는 DNA의 특정한 염기배열을 식별하고 이중사슬을 절단하는 엔도뉴클레아제로서 재조합 DNA를 만들기 위해서 사용하는 특수한 효소이다. 제한효소의 종류에는 1형, 2형, 3형, 4형, 5형 등이 있으며, 각각 인식하는 염기서열과 절단 방식이 다르다. 하나의 플라스미드는 여러 제한효소에 의해 자를 수 있다. 2. 전기영동 Agarose gel에서의 DNA pattern은 smear, 용해되지 않은 물질과 고분자량의 DNA, RNA cloud, supercoiled plasmid, relaxed 또는 nicked c...2025.01.23
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P1 박테리오파지를 이용한 형질도입 실험2025.11.111. 박테리오파지(Bacteriophage) 박테리오파지는 박테리아를 감염시키는 바이러스로, 단백질 구조로 둘러싸인 핵산 분자로 구성된다. 유전물질은 ssRNA, dsRNA, ssDNA, dsDNA 등이 원형 또는 선형으로 배열되어 있다. 박테리오파지는 머리와 꼬리로 구성되며, 약 96%는 숙주세포에 유전물질을 주입할 때 사용하는 꼬리를 가지고 있다. 독성파지와 온건성 파지로 구분되며, 용균성 생활사(lytic cycle)와 용원성 생활사(lysogenic cycle)를 거친다. 2. P1 박테리오파지 P1은 대장균과 일부 박테리아...2025.11.11
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DNA 구조 및 추출2025.01.191. DNA 구조 DNA는 데옥시리보뉴클레오타이드라고 하는 단량체가 사슬의 형태로 연결된 중합체이며, 2개의 폴리뉴클레오타이드 가닥으로 이루어진 이중나선 구조의 고분자 화합물이다. DNA를 구성하는 각각의 뉴클레오타이드는 아데닌(A), 사이토신(C), 타이민(T), 구아닌(G) 중에서 하나의 질소 함유 염기를 가진다. 이 질소 함유 염기는 피리미딘과 퓨린의 2종류로 나뉘며, 각 염기에는 작용기가 부착되어 있어 단 한 가지 종류의 짝과 수소결합을 형성할 수 있다. 2. DNA 추출 DNA 추출 과정에서 buffer1의 EDTA는 세포...2025.01.19
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제한효소 절단 실험 결과 분석 및 고찰2025.11.141. 제한효소(Restriction Enzyme) 제한효소는 DNA의 특정한 염기배열을 식별하고 이중사슬을 절단하는 핵산분해효소로, 유전공학에서 재조합 DNA를 만들기 위해 사용되는 특수한 효소이다. 형태, 절단 위치, 절단 서열의 모양, 조효소 유무에 따라 제1형부터 제5형으로 분류된다. 실험에 사용된 EcoR1은 대장균에서 분리된 제2형 제한효소로, 'GAATTC' 염기서열을 인식하여 절단하며 5'-돌출 점착성 말단을 형성한다. 활성화를 위해서는 pH7.5, 50mM NaCl, 5mM MgCl2, 37°C 조건이 필요하다. 2....2025.11.14
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