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형질 전환 실험: 원핵 세포의 유전자 조작2025.11.141. 형질 전환(Transformation) 형질 전환은 외부에서 만들어진 plasmid를 plasmid가 없는 원핵 세포에 삽입하여 새로운 유전형질을 나타내게 하는 과정입니다. 제한효소를 이용하여 plasmid의 특정 부위를 절단하고 원하는 염기서열을 삽입합니다. Competent cell을 CaCl₂로 처리하여 외부 DNA를 쉽게 받아들일 수 있는 상태로 만들고, 42°C heat-shock과 ice bucket 처리를 통해 plasmid를 세포 내로 도입합니다. 이 과정은 인슐린 생산 등 의약품 개발에 광범위하게 활용됩니다. ...2025.11.14
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DNA 기술을 이용한 형질전환 및 PCR 실험2025.11.171. DNA 클로닝 및 형질전환(Transformation) DNA 클로닝은 DNA를 재조합하고 숙주 안에서 복제하는 과정이다. 대장균 형질전환을 위해 competent cell을 준비하고 플라스미드를 도입한 후 열충격(heat shock)을 가한다. X-gal/IPTG가 포함된 고체배지에서 배양하면 형질전환된 세포는 흰색 colony를, 형질전환되지 않은 세포는 파란색 colony를 형성한다. 이는 LacZ 유전자의 발현 여부에 따른 결과로, 외부 DNA가 삽입되면 LacZ 발현이 억제되어 β-galactosidase가 생성되지 ...2025.11.17
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박테리아 세포로부터 플라스미드 정제하기 - 분자생물학 실험 예비보고서2025.01.041. 플라스미드 정제 이 실험에서는 박테리아 세포로부터 플라스미드를 정제하는 과정이 설명되어 있습니다. 플라스미드는 박테리아 세포 내에 존재하는 작은 원형 DNA 분자로, 유전자 조작 실험에 많이 사용됩니다. 이 실험에서는 플라스미드를 추출하고 정제하는 단계별 과정이 자세히 기술되어 있습니다. 2. 분자생물학 실험 이 자료는 분자생물학 실험의 일환으로 진행된 것으로, 유전자 조작 및 분석을 위한 기본적인 실험 기법들이 소개되어 있습니다. 플라스미드 정제 외에도 전기영동, 제한효소 처리 등 다양한 분자생물학 실험 기법들이 포함되어 있...2025.01.04
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[A+] 연세대학교 생화학실험(2) 3주차 Plasmid and Plasmid DNA preparation2025.05.121. Plasmid and Plasmid DNA preparation 이 자료는 플라스미드와 플라스미드 DNA 준비에 대한 내용을 다루고 있습니다. 플라스미드는 세포 염색체와는 별도로 존재하는 자기 복제 DNA 분자로, 다양한 클로닝 사이트를 가지고 있습니다. 플라스미드 DNA 추출 과정에서는 세포벽 용해, 세포막 파괴, 염색체 DNA와 플라스미드 DNA 분리 등의 단계를 거치게 됩니다. 이를 통해 순수한 플라스미드 DNA를 얻을 수 있습니다. 1. Plasmid and Plasmid DNA preparation Plasmids a...2025.05.12
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[A+ 보장!] 연세대 의대 의예과 1학년 General Biology 실험 레포트 Ligation and transformation2025.01.141. 제한효소 제한효소는 DNA의 특정한 염기 서열을 인식하고 절단하는 가수분해 효소이다. 제한효소는 박테리아가 박테리오파지 바이러스로부터 자신을 보호하기 위한 수단이다. 제한효소는 다양한 분류 기준에 의해서 Ⅰ형, Ⅱ형, Ⅲ형으로 나뉜다. 제한효소는 유전자 재조합 외에도 유전자 클로닝, 형질전환 등 여러 가지 생명공학 기술에 널리 활용된다. 2. 플라스미드 DNA 플라스미드 DNA는 주형 DNA와 별도로 박테리아에 존재하는 DNA이다. 플라스미드 DNA는 진정세균뿐만 아니라 고세균이나 진핵생물에도 존재한다. 플라스미드 DNA는 독...2025.01.14
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제한효소를 이용한 DNA 절단 및 전기영동 분석2025.11.171. 제한효소(Restriction Enzyme) 제한효소는 주로 세균이 보유한 DNA 절단 효소로, 외부 바이러스의 DNA를 절단하여 자기 보호 기능을 한다. 종류에 따라 4개 또는 6개의 염기서열을 인식하여 비점착성 또는 점착성 말단을 생성한다. 같은 효소로 절단된 부위는 동일한 끝을 가지므로, 표적DNA와 플라스미드를 같은 제한효소로 자르고 ligase로 결합시켜 재조합 DNA를 만들 수 있다. DNA 클로닝 등 분자생물학 연구에 광범위하게 사용된다. 2. 전기영동(Electrophoresis) 전기장의 영향으로 전하를 띤 물...2025.11.17
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[만점자료] DNA전기영동과 SDS-PAGE 실험 보고서2025.01.231. DNA 전기영동 DNA 전기영동은 PCR을 통해 유전자를 증폭시킨 후, 전기를 이용해 DNA를 크기별로 분리하는 기술이다. PCR은 DNA 변성, Primer 부착, 신장 과정을 거치며 유전자를 지수적으로 증폭시킬 수 있다. 아가로오스 겔 전기영동은 한천을 이용해 만든 겔을 통해 DNA를 크기별로 분류할 수 있다. 실험 결과에서는 원래 플라스미드, 제한효소 처리 플라스미드, PCR 증폭 산물 등의 밴드를 확인할 수 있었다. 2. SDS-PAGE SDS-PAGE는 SDS를 이용해 단백질에 균일한 음전하를 부여하고, 폴리아크릴아마...2025.01.23
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박테리아 형질전환(Bacterial Transformation) 실험 보고서2025.11.151. 형질전환(Transformation)의 정의 및 원리 형질전환은 외부 유전자를 세포에 도입하여 새로운 유전 형질을 갖도록 만드는 과정입니다. S형균의 DNA를 R형균에 도입하면 R형균이 S형균으로 변화하며, 이는 원핵생물의 유전적 다양성 확보 전략입니다. 자연 상태에서 형질전환이 일어나려면 DNA 결합 단백질, Type IV pili, Type II secretion system 등이 관여하며, 환경 영향(집단 밀도, 영양분 고갈, DNA 손상)에 따라 유도됩니다. 외래 DNA 도입 방법으로는 접합(conjugation)과 형...2025.11.15
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아가로스겔 전기영동을 이용한 플라스미드 클로닝 확인2025.11.151. 아가로스겔 전기영동 Restriction digestion 및 uncut plasmid를 통해 클로닝 여부를 확인하는 실험 방법입니다. 아가로스겔을 이용하여 DNA 샘플을 전기영동으로 분리하고, band shift 및 insert 유무를 관찰하여 클로닝 성공 여부를 판단합니다. 1X TAE buffer에 아가로스를 녹여 겔을 만들고, EtBr을 첨가한 후 DNA 샘플을 로딩하여 110V에서 전기영동을 수행합니다. 2. 플라스미드 클로닝 검증 Restriction digestion으로 처리된 DNA와 uncut plasmid를 ...2025.11.15
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형질전환 실험보고서2025.05.041. 형질전환 형질전환은 외부에서 만들어진 plasmid를 plasmid가 없는 원핵 세포 cell에 넣어 그 원핵 세포가 본래 성질과는 다른 새로운 유전형질을 나타내게 하여 삽입한 plasmid를 대량으로 키우는 과정이다. 형질전환은 폐렴구균을 통해 DNA가 유전물질임을 PCR과 클로닝 등의 방법으로 증명했다. 인슐린의 경우 처음에는 돼지에게서 추출했지만 많은 수요에 비해 공급은 원활하지 못 했고 깨끗하지 않을 수도 있다는 의견 때문에 중지되었다. 그 후, 인간에게서 인슐린을 만드는 단백질(염기서열)을 찾아내어 인슐린을 공급할 방...2025.05.04
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